| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 文献综述 | 第11-16页 |
| 引言 | 第16-18页 |
| 1 材料与方法 | 第18-32页 |
| ·实验菌株 | 第18页 |
| ·工程菌与质粒 | 第18页 |
| ·酶类与主要试剂(盒) | 第18页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| ·主要培养基与溶液的配制 | 第18-23页 |
| ·LB 液体培养基 | 第18页 |
| ·含氨苄青霉素的LB 琼脂平板 | 第18页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳所用溶液 | 第18-19页 |
| ·感受态细胞制备及转化用溶液 | 第19页 |
| ·SDS-PAGE 电泳所需溶液 | 第19-20页 |
| ·蛋白诱导表达所用溶液 | 第20-21页 |
| ·提纯表达蛋白所需培养基与溶液 | 第21-22页 |
| ·Western-blot 试验所用溶液 | 第22页 |
| ·ELISA 实验所用溶液 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·拟态弧菌OmpU B 细胞表位筛选 | 第23-24页 |
| ·OmpU 的二级结构及柔性区域分析 | 第23页 |
| ·OmpU 亲水性分析 | 第23页 |
| ·OmpU 表面可能性分析 | 第23-24页 |
| ·OmpU 抗原指数分析 | 第24页 |
| ·ompU 多表位串联基因的设计及合成 | 第24页 |
| ·多表位重组质粒的构建与鉴定 | 第24-28页 |
| ·多表位重组质粒的构建 | 第24-27页 |
| ·多表位重组质粒的鉴定 | 第27-28页 |
| ·多表位重组质粒的表达及其产物纯化 | 第28-30页 |
| ·多表位重组质粒的诱导表达 | 第28页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第28-29页 |
| ·表达产物的定位与可溶性分析 | 第29页 |
| ·表达产物的纯化 | 第29-30页 |
| ·重组多表位蛋白的免疫特性分析 | 第30-32页 |
| ·免疫反应性分析 | 第30-31页 |
| ·免疫原性分析 | 第31页 |
| ·免疫保护性分析 | 第31-32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-46页 |
| ·拟态弧菌 OmpU B 细胞表位筛选 | 第32-35页 |
| ·OmpU 的二级结构及柔性区域 | 第32-33页 |
| ·OmpU 的亲水性 | 第33页 |
| ·OmpU 的表面可能性 | 第33-34页 |
| ·OmpU 的抗原指数 | 第34-35页 |
| ·OmpU 的B 细胞表位 | 第35页 |
| ·ompU 多表位串联基因的设计与合成 | 第35-36页 |
| ·多表位重组质粒的构建与鉴定 | 第36-39页 |
| ·多表位重组质粒的构建 | 第36-37页 |
| ·多表位重组质粒的鉴定 | 第37-38页 |
| ·多表位重组质粒的测序结果 | 第38-39页 |
| ·多表位重组质粒的表达及其产物纯化 | 第39-41页 |
| ·多表位重组质粒的诱导表达 | 第39页 |
| ·表达产物的定位与可溶性分析 | 第39-40页 |
| ·表达产物的纯化 | 第40-41页 |
| ·重组多表位蛋白的免疫特性检测 | 第41-46页 |
| ·重组多表位蛋白的反应原性 | 第41-42页 |
| ·重组多表位蛋白的免疫原性 | 第42-44页 |
| ·重组多表位蛋白的免疫保护性 | 第44-46页 |
| 3 讨论 | 第46-50页 |
| ·B 细胞表位的筛选方法与多表位串联基因的设计 | 第46-47页 |
| ·表达载体的选择 | 第47-48页 |
| ·弧菌病的免疫防治方法与重组多表位蛋白的免疫保护作用 | 第48-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58页 |