| 中文摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-51页 |
| 1 东方粘虫及其基本迁飞规律 | 第15-17页 |
| ·东方粘虫分布与危害 | 第15页 |
| ·东方粘虫研究现状 | 第15-17页 |
| 2 遗传标记及其在昆虫学研究中的应用 | 第17-33页 |
| ·遗传标记概述 | 第17-22页 |
| ·遗传标记分类 | 第17页 |
| ·分子遗传标记简况 | 第17-19页 |
| ·分子遗传标记在昆虫生态学研究中的作用 | 第19-20页 |
| ·其它迁飞昆虫遗传标记应用情况 | 第20-22页 |
| ·微卫星标记及其克隆方法 | 第22-33页 |
| ·微卫星种类、分布和功能 | 第22-23页 |
| ·微卫星变异 | 第23-25页 |
| ·微卫星标记分离方法 | 第25-28页 |
| ·微卫星基因座的多态性检测 | 第28-31页 |
| ·微卫星标记克隆和检测中的问题 | 第31-32页 |
| ·昆虫微卫星标记分离情况 | 第32-33页 |
| 3 本课题的提出和研究思路 | 第33-35页 |
| 参考文献 | 第35-51页 |
| 第二章 基因组DNA提取 | 第51-67页 |
| 1 材料与方法 | 第52-55页 |
| ·实验材料 | 第52-53页 |
| ·CTAB+传统方法提取基因组DNA | 第53-54页 |
| ·虫体处理 | 第53页 |
| ·组织裂解 | 第53页 |
| ·苯酚抽提 | 第53页 |
| ·乙醇沉淀 | 第53-54页 |
| ·对比实验方案 | 第54页 |
| ·精胺纯化DNA样品方法 | 第54页 |
| ·DNA样品质量检测 | 第54页 |
| ·用热NaOH溶液提取基因组DNA | 第54-55页 |
| ·DNA样品应用 | 第55页 |
| ·微卫星富集文库的构建 | 第55页 |
| ·扩增微卫星等位基因 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-61页 |
| ·传统方法与CTAB+传统方法提取DNA结果比较 | 第55-56页 |
| ·CTAB+传统方法和热NaOH溶液法提取的DNA样品比较 | 第56-58页 |
| ·不同组织用CTAB+传统方法提取DNA结果比较 | 第58-59页 |
| ·CTAB+传统方法DNA提取量与样品用量的关系 | 第59页 |
| ·在2 mL离心管中用CTAB+传统方法提取DNA的适宜组织用量 | 第59页 |
| ·在0.2 mL离心管中用热NaOH法提取DNA的适宜处理时间 | 第59-61页 |
| ·精胺纯化DNA样品的效果 | 第61页 |
| 3 讨论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 第三章 东方粘虫微卫星富集文库的建立和抽样测序 | 第67-77页 |
| 1 材料和方法 | 第67-69页 |
| ·实验材料 | 第67页 |
| ·接头、引物和探针 | 第67页 |
| ·接头和引物 | 第67页 |
| ·生物素标记的探针 | 第67页 |
| ·载体和菌株 | 第67页 |
| ·主要试剂 | 第67-68页 |
| ·微卫星富集文库的构建 | 第68-69页 |
| ·基因组DNA提取和酶切 | 第68页 |
| ·酶切片断加接头 | 第68页 |
| ·磁珠亲和捕捉及扩增 | 第68-69页 |
| ·微卫星富集DNA片断的克隆 | 第69页 |
| ·连接转化效率的抽样鉴定 | 第69页 |
| ·文库抽样测序和微卫星鉴别 | 第69页 |
| 2 结果与分析 | 第69-73页 |
| ·基因组DNA酶切 | 第69-70页 |
| ·酶切片断胶回收与连接头 | 第70-71页 |
| ·磁珠捕捉和PCR扩增 | 第71-72页 |
| ·微卫星富集片断的克隆 | 第72页 |
| ·连接转化效率的检测 | 第72页 |
| ·微卫星富集文库的抽样检测和微卫星鉴别 | 第72-73页 |
| 3 结论与讨论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-77页 |
| 第四章 粘虫基因组微卫星的主要特征和变异 | 第77-91页 |
| 1 材料和方法 | 第77页 |
| 2 结果与分析 | 第77-86页 |
| ·粘虫基因组微卫星分布的基本特征 | 第77-79页 |
| ·粘虫微卫星核心序列的变异 | 第79-85页 |
| ·粘虫微卫星核心序列替换/缺失/插入基本特征 | 第79-81页 |
| ·粘虫微卫星核心序列变异与其长度和基序的关系 | 第81-84页 |
| ·粘虫微卫星核心序列变异的位置效应 | 第84-85页 |
| ·粘虫微卫星家族和多拷贝微卫星基因座分析 | 第85-86页 |
| 3 结论与讨论 | 第86-89页 |
| 参考文献 | 第89-91页 |
| 第五章 粘虫微卫星单拷贝基因座的筛选和基本特征 | 第91-105页 |
| 1 材料和方法 | 第91-94页 |
| ·实验材料 | 第91页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第91-92页 |
| ·仪器设备 | 第91页 |
| ·化学试剂 | 第91-92页 |
| ·筛选过程 | 第92-94页 |
| 2 结果与分析 | 第94-99页 |
| 3 结论与讨论 | 第99-102页 |
| 参考文献 | 第102-105页 |
| 第六章 全文总结 | 第105-109页 |
| 1 主要结论 | 第105-108页 |
| ·通过对比研究,发现CTAB方法提取DNA效果明显优于传统方法,而NaOH方法所得DNA样品可用于基因分型 | 第105页 |
| ·利用磁珠富集法成功构建6个东方粘虫微卫星富集文库,抽样检测微卫星阳性克隆率较高 | 第105-106页 |
| ·东方粘虫基因组三核苷酸基序微卫星占据优势,重复序列变异丰富且以替换发生频率最高 | 第106-107页 |
| ·筛选出8个东方粘虫微卫星遗传标记,证明东方粘虫基因组中多态性微卫星基因座比例很低 | 第107-108页 |
| ·8个微卫星标记具有较高多态性,适合作为分子遗传标记 | 第108页 |
| 2 讨论 | 第108-109页 |
| 附录:前期研究中所用其它物种微卫星引物 | 第109-111页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第111-113页 |
| 致谢 | 第113页 |
