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草地暝围食膜蛋白的分离鉴定

摘要第1-8页
Abstract第8-15页
第一章 绪论第15-28页
   ·围食膜的结构、组分与蛋白特性第15-20页
     ·围食膜的结构和组分第16页
     ·围食膜蛋白种类及特性第16-20页
   ·围食膜的功能第20-21页
     ·机械保护和外源物入侵的屏障第20页
     ·选择通透性第20-21页
     ·提高中肠酶系的消化效率第21页
   ·围食膜在昆虫防治中的作用第21-24页
     ·破坏蛋白质与几丁质的结合第22页
     ·降解围食膜中的蛋白组分第22-23页
     ·降解几丁质或抑制几丁质合成第23页
     ·抑制O-联糖基化第23-24页
   ·CDNA 文库第24-27页
     ·cDNA 文库的构建第24-25页
     ·cDNA 文库的质量检测第25-26页
     ·cDNA 文库的筛选第26-27页
   ·研究思路第27-28页
     ·立题依据第27页
     ·研究内容第27-28页
第二章 草地螟中肠cDNA 文库构建及围食膜蛋白免疫筛选第28-50页
   ·材料与方法第28-38页
     ·实验材料第28-31页
     ·草地螟中肠cDNA 文库的构建第31-37页
     ·cDNA 文库的免疫筛选第37页
     ·cDNA 序列分析第37-38页
   ·结果与分析第38-46页
     ·总RNA 及mRNA 的提取和纯化第38页
     ·cDNA 第一、二链的合成第38-39页
     ·文库的容量及重组率第39页
     ·文库质量的检测第39-40页
     ·围食膜蛋白抗体对cDNA 文库的免疫筛选第40-46页
   ·讨论第46-50页
     ·高质量RNA第46-47页
     ·cDNA 文库质量第47页
     ·基因的克隆第47-48页
     ·免疫筛选第48-50页
第三章 草地螟围食膜蛋白 LstiCBP 的分离鉴定第50-73页
   ·材料与方法第50-60页
     ·供试昆虫第50页
     ·试剂及用品第50页
     ·cDNA 文库的筛选及序列分析第50页
     ·LstiCBP 基因的克隆第50-56页
     ·LstiCBP 的原核表达第56-59页
     ·LstiCBP 特异抗体的分离第59-60页
     ·LstiCBP 蛋白在草地螟幼虫中的鉴别和组织定位第60页
     ·M2R 对草地螟几丁质结合蛋白LstiCBP 的影响第60页
   ·结果与分析第60-71页
     ·LstiCBP 序列分析第60-66页
     ·LstiCBP 与已知的几种CBP 氨基酸序列的比较分析第66-68页
     ·LstiCBP 的原核表达第68-70页
     ·LstiCBP 在草地螟幼虫不同组织中的定位第70页
     ·M2R 对围食膜的蛋白质种类及CBP 的影响第70-71页
   ·讨论第71-73页
第四章 草地螟围食膜蛋白 Lsti99 的分离鉴定第73-94页
   ·材料与方法第73-83页
     ·供试昆虫及试剂第73页
     ·cDNA 文库的筛选及序列分析第73页
     ·Lsti99 蛋白的原核表达及纯化第73-76页
     ·Lsti99 基因的真核表达第76-82页
     ·Lsti99 蛋白在昆虫组织中的定位及特性分析第82-83页
   ·结果与分析第83-91页
     ·Lsti99 基因序列分析第83-86页
     ·Lsti99 和Lsti201 的原核表达第86-88页
     ·Lsti99 融合蛋白的纯化第88页
     ·Lsti99 的真核表达第88-90页
     ·Lsti99 蛋白在草地螟组织中的定位第90-91页
     ·M2R 和几丁质酶对中肠围食膜中Lsti99 蛋白的影响第91页
   ·讨论第91-94页
     ·关于Lsti99 蛋白第91-92页
     ·蛋白纯化第92页
     ·真核表达第92-94页
第五章 草地螟围食膜蛋白 Lsti201 的分离鉴定第94-107页
   ·材料与方法第94-96页
     ·供试昆虫及试剂第94页
     ·cDNA 文库的筛选第94页
     ·Lsti201 的原核表达第94-95页
     ·Lsti201 蛋白在草地螟幼虫中的鉴别和组织定位第95-96页
   ·结果与分析第96-106页
     ·Lsti201 基因序列分析第96-100页
     ·Lsti99 和Lsti201 蛋白比较第100-103页
     ·Lsti201 的原核表达第103-105页
     ·Lsti201 在草地螟幼虫组织中的定位第105-106页
   ·讨论第106-107页
第六章 草地螟肉碱-脂酰肉碱转位酶基因的分离鉴定第107-115页
   ·材料与方法第107-108页
     ·供试昆虫及试剂第107页
     ·cDNA 文库的筛选及序列分析第107-108页
     ·LstiSLC25 基因的原核表达第108页
   ·结果与分析第108-114页
     ·LstiSLC25 基因序列分析第108-112页
     ·LstiSLC25 与几种运载蛋白氨基酸序列的比较分析第112-113页
     ·重组载体的构建和表达第113-114页
   ·讨论第114-115页
第七章 草地螟羧肽酶 A 基因的分离鉴定第115-124页
   ·材料与方法第115-116页
     ·供试昆虫及试剂第115页
     ·cDNA 文库的筛选及7.1.3 序列分析第115页
     ·LstiCPA 的原核表达第115-116页
     ·CPA 活力测定第116页
   ·结果与分析第116-122页
     ·LstiCPA 基因序列分析第116-119页
     ·CPA 与几种CP 氨基酸序列的比较分析第119-121页
     ·CP 重组载体的构建和表达第121-122页
     ·CPA 活力测定第122页
   ·讨论第122-124页
第八章 草地螟羧酸酯酶基因的分离鉴定第124-134页
   ·材料与方法第124-126页
     ·供试昆虫及试剂第124页
     ·cDNA 文库的筛选及序列分析第124页
     ·LstiCarE 的原核表达第124-126页
   ·结果与分析第126-132页
     ·LstiCarE 基因序列分析第126-129页
     ·LstiCarE 与几种羧酸酯酶氨基酸序列的比较分析第129-131页
     ·羧酸酯酶重组载体的构建和表达第131-132页
   ·讨论第132-134页
第九章 草地螟围食膜形态结构及光增白剂的影响第134-143页
   ·材料与方法第134-135页
     ·试虫和试剂第134页
     ·围食膜制备第134-135页
     ·围食膜的电镜观察第135页
     ·围食膜蛋白种类第135页
     ·不同浓度M2R 对草地螟5 龄幼虫围食膜结构的影响第135页
     ·M2R 对围食膜及其蛋白种类的影响第135页
     ·M2R 对草地螟初孵幼虫生长的影响第135页
     ·M2R 对Bt 增效作用的实验第135页
   ·结果与分析第135-141页
     ·草地螟幼虫正常围食膜形态特征第135-136页
     ·M2R 对草地螟围食膜的影响第136-139页
     ·M2R 对围食膜的蛋白质种类的影响第139页
     ·M2R 处理对草地螟幼虫生长的影响第139-140页
     ·M2R 对Bt 杀虫效果的影响第140-141页
   ·讨论第141-143页
第十章 全文总结第143-145页
   ·主要结论第143-144页
   ·创新点第144页
   ·进一步的工作第144-145页
参考文献第145-161页
致谢第161-162页
作者简历第162页

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