| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一部分 狂犬病病毒CTN-181株糖蛋白的杆状病毒表达及初步应用 | 第14-48页 |
| 材料和方法 | 第15-31页 |
| 1 CTN-181株G基因的克隆 | 第17-21页 |
| ·引物设计 | 第17-18页 |
| ·RNA的提取 | 第18-19页 |
| ·RT-PCR | 第19页 |
| ·CTN-181 G基因的克隆和鉴定 | 第19-21页 |
| 2 CTN-181株G基因重组杆状病毒表达质粒的构建 | 第21-25页 |
| ·CTN-181 G基因重组转移质粒的构建 | 第22-24页 |
| ·CTN-181 G基因重组表达质粒的构建 | 第24-25页 |
| 3 CTN-181株G蛋白的表达及鉴定 | 第25-28页 |
| ·G基因重组表达质粒大量制备 | 第25-26页 |
| ·G基因重组表达质粒脂质体转染sf9细胞 | 第26页 |
| ·转染细胞病变观察 | 第26-27页 |
| ·G基因重组杆状病毒的扩增 | 第27页 |
| ·杆状病毒表达G蛋白的鉴定 | 第27-28页 |
| ·PCR鉴定 | 第27页 |
| ·间接免疫荧光鉴定 | 第27-28页 |
| ·Western-Blot鉴定 | 第28页 |
| 4 表达的G蛋白初步应用 | 第28-31页 |
| ·HRP标记的抗人IgG抗体稀释度的优化 | 第29页 |
| ·间接ELISA法的初步探索 | 第29-30页 |
| ·间接ELISA法的初步应用 | 第30-31页 |
| 结果 | 第31-43页 |
| 1 CTN-181株G蛋白基因的克隆和鉴定 | 第31-33页 |
| ·CTN-181 G基因的扩增 | 第31页 |
| ·CTN-181 G基因T-A克隆重组质粒的构建和鉴定 | 第31-33页 |
| 2 CTN-181株G基因重组杆状病毒表达质粒的构建和鉴定 | 第33-35页 |
| ·CTN-181 G基因转移质粒的构建和鉴定 | 第33-34页 |
| ·CTN-181 G基因表达质粒的构建和鉴定 | 第34-35页 |
| 3 重组CTN-181株G蛋白的表达及鉴定 | 第35-39页 |
| ·重组表达质粒转染Sf9细胞后病变效应(CPE)的观察 | 第35-37页 |
| ·杆状病毒表达G蛋白的鉴定 | 第37-39页 |
| ·PCR鉴定 | 第37页 |
| ·间接免疫荧光鉴定 | 第37-38页 |
| ·Western-Blot鉴定 | 第38-39页 |
| 4 表达G蛋白在的初步应用 | 第39-43页 |
| ·HRP标记的抗人IgG抗体稀释度的优化 | 第39-40页 |
| ·间接ELISA法的初步探索 | 第40-42页 |
| ·间接ELISA法的初步应用 | 第42-43页 |
| 讨论 | 第43-47页 |
| 小结 | 第47-48页 |
| 第二部分 表达狂犬病病毒CTN-181株糖蛋白细胞株的建立 | 第48-67页 |
| 材料和方法 | 第49-58页 |
| 1.狂犬病病毒CTN-181株G基因pIRES2-ZsGreen1和pIRES2-AcGFP1-Nuc表达质粒的构建 | 第50-55页 |
| ·CTN-181株G基因克隆入pcDNA3.1(+)载体 | 第50-52页 |
| ·CTN-181 G基因+pIRES2-ZsGreen1和CTN-181 G基因+pIRES2-AcGFP1-Nuc表达质粒的构建 | 第52-55页 |
| 2.表达狂犬病病毒CTN-181 G蛋白细胞系的建立 | 第55-58页 |
| ·BHK-21细胞最适G418筛选浓度的确定 | 第55页 |
| ·狂犬病病毒CTN-181株G基因pIRES2-ZsGreen1和plRES2-AcGFP1-Nuc重组表达质粒的大量制备 | 第55页 |
| ·CTN-181 G基因表达质粒转染BHK-21细胞 | 第55-56页 |
| ·表达CTN-181 G蛋白的细胞系的筛选 | 第56页 |
| ·表达CTN-181 G蛋白的细胞系的鉴定 | 第56-58页 |
| ·荧光鉴定 | 第56页 |
| ·PCR鉴定 | 第56-58页 |
| 结果 | 第58-64页 |
| 1.狂犬病病毒CTN-181株G基因pIRES2-ZsGreen1和pIRES2-AcGFP1-Nuc重组表达质粒的构建和鉴定 | 第58-60页 |
| ·CTN-181株G基因+pcDNA3.1(+)表达质粒的构建和鉴定 | 第58-59页 |
| ·CTN-181 G基因+pIRES2-ZsGreen1和CTN-181 G基因+pIRES2-AcGFP1-Nuc表达质粒的构建和鉴定 | 第59-60页 |
| 2.表达狂犬病病毒CTN-181 G蛋白细胞系的建立 | 第60-64页 |
| ·BHK-21细胞最适G418筛选浓度的确定 | 第60-61页 |
| ·表达CTN-181 G蛋白细胞系的鉴定 | 第61-64页 |
| ·荧光鉴定 | 第62页 |
| ·PCR鉴定 | 第62-64页 |
| 讨论 | 第64-66页 |
| 小结 | 第66-67页 |
| 论文总结 | 第67-68页 |
| 综述:狂犬病病毒糖蛋白的性质及其应用 | 第68-76页 |
| 论文参考文献 | 第76-82页 |
| 英文缩略语表 | 第82-83页 |
| 个人简历 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 附录 | 第85-103页 |
