| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-17页 |
| ·几丁质酶的特性 | 第9页 |
| ·几丁质酶的分类 | 第9-10页 |
| ·几丁质酶的作用 | 第10-12页 |
| ·抗真菌 | 第10-11页 |
| ·抗细菌 | 第11页 |
| ·抗虫害 | 第11页 |
| ·抗冻 | 第11页 |
| ·植物发育调控 | 第11页 |
| ·共生固氮 | 第11-12页 |
| ·几丁质酶的应用进展 | 第12-15页 |
| ·几丁质酶降解产物的应用 | 第12页 |
| ·转几丁质酶基因植物的研究进展 | 第12-13页 |
| ·植物几丁质酶在大肠杆菌、酵母中表达产物的应用 | 第13-15页 |
| ·几丁质酶在生物农药的增效作用 | 第15页 |
| ·几丁质酶的表达调控 | 第15-17页 |
| ·植物病原物的诱导 | 第15页 |
| ·乙烯的诱导 | 第15-16页 |
| ·植物发育分化阶段性的调控表达 | 第16页 |
| ·水杨酸的诱导 | 第16页 |
| ·非生物因子 | 第16页 |
| ·生长素、细胞分裂素等植物激素的反调节作用 | 第16-17页 |
| 第二章 引言 | 第17-18页 |
| ·研究背景 | 第17页 |
| ·研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 第三章 蜡梅几丁质酶基因的克隆与序列分析 | 第18-29页 |
| ·技术路线 | 第18页 |
| ·试验材料与试剂 | 第18-20页 |
| ·蜡梅花cDNA文库 | 第18页 |
| ·菌株与载体 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·主要设备 | 第19页 |
| ·自配的主要试剂 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-24页 |
| ·EST序列特征分析 | 第20页 |
| ·Cpchia基因cDNA获得 | 第20-23页 |
| ·Cpchia基因cDNA的生物信息学分析 | 第23-24页 |
| ·结果与分析 | 第24-28页 |
| ·Cpchia的克隆子的获得及其cDNA序列特征 | 第24页 |
| ·Cpchia基因Blastx分析及保守结构域分析 | 第24-25页 |
| ·Cpchia编码蛋白多序列比对和进化树分析 | 第25页 |
| ·Cpchia基因编码蛋白结构特征 | 第25-28页 |
| ·小结 | 第28-29页 |
| 第四章 蜡梅几丁质酶基因的原核表达及产物特性分析 | 第29-43页 |
| ·技术路线 | 第30页 |
| ·试验材料与试剂 | 第30-32页 |
| ·试验材料 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·主要设备 | 第30页 |
| ·自配的主要试剂 | 第30-32页 |
| ·试验方法 | 第32-38页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第32-34页 |
| ·目的蛋白的诱导表达及表达体系的优化 | 第34-35页 |
| ·SDS-PAGE检测表达产物 | 第35-36页 |
| ·重组蛋白pET-28a/Cpchia包涵体的分离纯化与复性 | 第36-37页 |
| ·几丁质酶酶学性质的测定与分析 | 第37-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-41页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第38页 |
| ·pET-28a/Cpchia在BL21(DE3)中的表达和纯化 | 第38-40页 |
| ·重组目的蛋白的分离纯化及复性 | 第40-41页 |
| ·几丁质酶酶学性质的测定与分析 | 第41页 |
| ·小结 | 第41-43页 |
| 第五章 讨论 | 第43-45页 |
| ·关于几丁质酶基因克隆 | 第43页 |
| ·生物信息学分析基因功能的必要性 | 第43页 |
| ·关于几丁质酶的原核表达 | 第43-44页 |
| ·关于几丁质酶的活性检测及功能分析 | 第44-45页 |
| 第六章 总结 | 第45-47页 |
| ·结论 | 第45页 |
| ·创新点 | 第45页 |
| ·下一步工作打算 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 缩略词表 | 第52-53页 |
| 附录 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |