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蜡梅(Chimonanthus praecox (L.)Link)几丁质酶基因Cpchia的克隆及原核表达产物特性分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
第一章 文献综述第9-17页
   ·几丁质酶的特性第9页
   ·几丁质酶的分类第9-10页
   ·几丁质酶的作用第10-12页
     ·抗真菌第10-11页
     ·抗细菌第11页
     ·抗虫害第11页
     ·抗冻第11页
     ·植物发育调控第11页
     ·共生固氮第11-12页
   ·几丁质酶的应用进展第12-15页
     ·几丁质酶降解产物的应用第12页
     ·转几丁质酶基因植物的研究进展第12-13页
     ·植物几丁质酶在大肠杆菌、酵母中表达产物的应用第13-15页
     ·几丁质酶在生物农药的增效作用第15页
   ·几丁质酶的表达调控第15-17页
     ·植物病原物的诱导第15页
     ·乙烯的诱导第15-16页
     ·植物发育分化阶段性的调控表达第16页
     ·水杨酸的诱导第16页
     ·非生物因子第16页
     ·生长素、细胞分裂素等植物激素的反调节作用第16-17页
第二章 引言第17-18页
   ·研究背景第17页
   ·研究的目的与意义第17-18页
第三章 蜡梅几丁质酶基因的克隆与序列分析第18-29页
   ·技术路线第18页
   ·试验材料与试剂第18-20页
     ·蜡梅花cDNA文库第18页
     ·菌株与载体第18页
     ·主要试剂第18-19页
     ·主要设备第19页
     ·自配的主要试剂第19-20页
   ·方法第20-24页
     ·EST序列特征分析第20页
     ·Cpchia基因cDNA获得第20-23页
     ·Cpchia基因cDNA的生物信息学分析第23-24页
   ·结果与分析第24-28页
     ·Cpchia的克隆子的获得及其cDNA序列特征第24页
     ·Cpchia基因Blastx分析及保守结构域分析第24-25页
     ·Cpchia编码蛋白多序列比对和进化树分析第25页
     ·Cpchia基因编码蛋白结构特征第25-28页
   ·小结第28-29页
第四章 蜡梅几丁质酶基因的原核表达及产物特性分析第29-43页
   ·技术路线第30页
   ·试验材料与试剂第30-32页
     ·试验材料第30页
     ·主要试剂第30页
     ·主要设备第30页
     ·自配的主要试剂第30-32页
   ·试验方法第32-38页
     ·原核表达载体的构建第32-34页
     ·目的蛋白的诱导表达及表达体系的优化第34-35页
     ·SDS-PAGE检测表达产物第35-36页
     ·重组蛋白pET-28a/Cpchia包涵体的分离纯化与复性第36-37页
     ·几丁质酶酶学性质的测定与分析第37-38页
   ·结果与分析第38-41页
     ·原核表达载体的构建第38页
     ·pET-28a/Cpchia在BL21(DE3)中的表达和纯化第38-40页
     ·重组目的蛋白的分离纯化及复性第40-41页
     ·几丁质酶酶学性质的测定与分析第41页
   ·小结第41-43页
第五章 讨论第43-45页
   ·关于几丁质酶基因克隆第43页
   ·生物信息学分析基因功能的必要性第43页
   ·关于几丁质酶的原核表达第43-44页
   ·关于几丁质酶的活性检测及功能分析第44-45页
第六章 总结第45-47页
   ·结论第45页
   ·创新点第45页
   ·下一步工作打算第45-47页
参考文献第47-52页
缩略词表第52-53页
附录第53-54页
致谢第54页

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