摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第1章 文献综述 | 第11-27页 |
·概述 | 第11页 |
·大肠杆菌的抗原特性 | 第11-12页 |
·致病力与毒力因子 | 第12-19页 |
·黏附素 | 第12-15页 |
·肠毒素 | 第15-18页 |
·外膜蛋白 | 第18-19页 |
·溶血素 | 第19页 |
·猪大肠杆菌病 | 第19-23页 |
·仔猪黄白痢 | 第19-20页 |
·断奶仔猪腹泻 | 第20-21页 |
·断奶仔猪水肿病 | 第21-22页 |
·致病机理 | 第22-23页 |
·体内诱导抗原技术 | 第23-27页 |
第2章 仔猪大肠杆菌O139基因组表达文库的构建 | 第27-41页 |
·实验材料 | 第27-28页 |
·菌株和质粒 | 第27-28页 |
·实验动物 | 第28页 |
·大肠杆菌O抗原定型血清诊断液 | 第28页 |
·微量生化鉴定管 | 第28页 |
·工具酶及主要试剂 | 第28-31页 |
·工具酶 | 第28页 |
·主要试剂 | 第28-29页 |
·主要试剂的配制 | 第29-30页 |
·主要仪器设备 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-36页 |
·样本采集 | 第31页 |
·大肠杆菌的分离鉴定 | 第31-32页 |
·仔猪大肠杆菌O139的培养及其染色体基因组的提取 | 第32-33页 |
·限制性内切酶Sau3AI的最佳酶切浓度的确定 | 第33页 |
·宝生物TaKaRa公司试剂盒回收DNA | 第33-34页 |
·pET-32a(+)质粒载体连接位点的暴露和去磷酸化 | 第34页 |
·DNA的连接 | 第34页 |
·感受态细胞的制备及重组DNA转化 | 第34-35页 |
·碱变性法提取质粒 | 第35页 |
·重组质粒的鉴定 | 第35-36页 |
·表达文库的构建和质量鉴定 | 第36页 |
·实验结果 | 第36-39页 |
·待检菌株的鉴定结果 | 第36页 |
·文库载体的制备 | 第36-37页 |
·仔猪大肠杆菌O139基因组DNA的提取 | 第37页 |
·仔猪大肠杆菌O139基因组DNA部分酶切 | 第37-38页 |
·仔猪大肠杆菌O139基因组表达文库的构建和质量鉴定 | 第38-39页 |
·讨论 | 第39-41页 |
第3章 仔猪大肠杆菌O139体内诱导基因的筛选 | 第41-49页 |
·实验材料和试剂 | 第41-42页 |
·实验材料 | 第41页 |
·主要试剂和溶液 | 第41-42页 |
·主要仪器和设备 | 第42页 |
·实验方法 | 第42-45页 |
·玻片凝集检测血清抗体 | 第42页 |
·去除抗血清中交叉反应的抗体 | 第42-43页 |
·血清最佳稀释倍数的确定及吸附后血清抗体滴度的测定 | 第43-44页 |
·E.coli O139基因组表达文库的筛选 | 第44-45页 |
·实验结果 | 第45-47页 |
·血清抗体的检测 | 第45页 |
·血清的吸附处理 | 第45-47页 |
·E.coli O139基因组表达文库的筛选 | 第47页 |
·讨论 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-57页 |
缩略语表 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
攻读学位期间发表的论文 | 第59页 |