| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| ·家蚕抗菌肽的种类 | 第11-13页 |
| ·Cecropin | 第11页 |
| ·Attacin | 第11-12页 |
| ·Lebocin | 第12页 |
| ·Moricin | 第12页 |
| ·Gloverin | 第12页 |
| ·Defencin | 第12-13页 |
| ·抗菌肽基因的活化机制 | 第13-15页 |
| ·Toll途径 | 第13-14页 |
| ·IMD途径 | 第14-15页 |
| ·抗菌肽的作用机制 | 第15-16页 |
| ·抗菌肽的应用 | 第16-17页 |
| ·抗菌肽在动植物抗病基因工程中的应用 | 第16页 |
| ·抗菌肽在医药方面的应用 | 第16-17页 |
| ·抗菌肽应用中存在的问题 | 第17-19页 |
| 第二章 引言 | 第19-21页 |
| ·研究目的及意义 | 第19页 |
| ·研究内容 | 第19-20页 |
| 1.转基因表达载体的构建 | 第19页 |
| 2.转基因蚕的制作与检测 | 第19页 |
| 3.转基因家蚕相关抗菌肽基因的表达分析 | 第19-20页 |
| 4.转基因家蚕的抗菌试验与生长发育情况观察 | 第20页 |
| ·研究的技术路线 | 第20-21页 |
| 第三章 抗菌肽转基因表达载体的构建 | 第21-41页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第21-22页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·主要溶液及配制 | 第21-22页 |
| ·主要设备 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-28页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第22-23页 |
| ·PCR产物、酶切产物的回收 | 第23页 |
| ·目的片段与载体连接 | 第23页 |
| ·转化 | 第23-24页 |
| ·质粒DNA的制备 | 第24页 |
| ·RNA的抽提、检测及反转录 | 第24-26页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·PCR反应 | 第26页 |
| ·酶切 | 第26页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第26-27页 |
| ·1%琼脂糖凝胶制备 | 第27页 |
| ·双链DNA 5'末端突出的Klenow补平 | 第27页 |
| ·CIP去磷酸化处理 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-39页 |
| ·目的片段的克隆 | 第28-32页 |
| ·pBac[3×P3-EGFP+SDH-Mor]转基因表达载体的构建 | 第32-35页 |
| ·pBac[3×P3-DsRed+IE1-Leb]转基因表达载体的构建 | 第35-37页 |
| ·pBac[3×P3-DsRed+SDH-Leb]转基因表达载体的构建 | 第37-39页 |
| ·小节与讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 转基因蚕的制作与分子检测 | 第41-47页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·主要试剂和主要设备 | 第41页 |
| ·实验试剂 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-44页 |
| ·用于显微注射质粒的提取 | 第41页 |
| ·蚕卵显微注射 | 第41-42页 |
| ·阳性转基因蚕的荧光筛选 | 第42页 |
| ·基因组的提取 | 第42页 |
| ·阳性转基因家蚕的Southern blot检测 | 第42-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-46页 |
| ·抗菌肽转基因蚕的制作与荧光检测 | 第44-45页 |
| ·SDH-Mor转基因蚕的Southern blot检测 | 第45页 |
| ·IE1-Leb和SDH-Leb阳性转基因蚕的Southern blot检测 | 第45-46页 |
| ·小节与讨论 | 第46-47页 |
| 第五章 转基因家蚕相关抗菌肽基因的表达分析 | 第47-57页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·主要试剂和主要设备 | 第47页 |
| ·实验试剂 | 第47页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-49页 |
| ·RNA的抽提、检测及反转录 | 第47-49页 |
| ·RT-PCR | 第49页 |
| ·PCR电泳条带光密度扫描 | 第49页 |
| ·方差分析 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-57页 |
| ·总RNA的提取及反转录 | 第49-50页 |
| ·半定量RT-PCR循环数的确定 | 第50-52页 |
| ·半定量RT-PCR | 第52-54页 |
| ·小节与讨论 | 第54-57页 |
| 第六章 转基因蚕的抗菌能力分析 | 第57-63页 |
| ·材料 | 第57页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第57页 |
| ·主要试剂 | 第57页 |
| ·主要仪器 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-58页 |
| ·细菌培养及其处理 | 第57页 |
| ·对家蚕添食细菌 | 第57-58页 |
| ·方差分析 | 第58页 |
| ·结果与讨论 | 第58-63页 |
| ·SDH-Mor转基因蚕抗苏云金芽孢杆菌试验 | 第58-59页 |
| ·IE1-Leb和SDH-Leb转基因蚕抗E.coli试验 | 第59-61页 |
| ·讨论 | 第61-63页 |
| 第七章 总结与展望 | 第63-65页 |
| ·总结 | 第63页 |
| ·展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 附录 | 第69-71页 |
| 发表文章与参研课题 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
