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STAT3特异性短干涉RNA抑制神经胶质瘤细胞增殖的研究

提要第1-11页
前言第11-12页
第一篇 文献综述第12-29页
 第一章 STAT3的研究背景及发展趋势第12-19页
  1 JAK-STAT途径第12-13页
  2 STAT蛋白第13-15页
  3 STATs信号转导通路作用机制第15-16页
  4 STAT3第16-19页
 第二章 RNAi的回顾与展望第19-29页
  1 RNAi的发现第20页
  2 RNAi的作用机制第20-22页
  3 双链RNA 的构建第22-23页
  4 siRNA的设计第23-24页
  5 siRNA的获得第24-26页
  6 RNAi 的应用第26-29页
第二篇 实验研究第29-88页
 第一章 STAT3腺病毒载体的构建及制备第29-64页
  第一节 实验材料第29-30页
   1 主要仪器第29页
   2 主要材料及试剂第29-30页
  第二节 实验方法第30-48页
   1 引物设计第30-36页
   2 引物合成第36-39页
   3 PCR法获得带有STAT3短发夹环(short hairpin, sh)的HU6启动子第39-40页
   4 HU6 shSTAT3与T载体连接第40-42页
   5 携带HU6sh STAT3的重组腺病毒的包装第42-48页
  第三节 实验结果第48-63页
   1 PCR法获得带有STAT3短发夹环(short hairpin, sh)的HU6启动子第48-50页
   2 测序结果第50-57页
   3 重组腺病毒rAdUshSTAT3的包装第57-63页
  第四节 小结第63-64页
 第二章 STAT3重组腺病毒转染神经胶质瘤细胞体外实验第64-88页
  第一节 实验材料第64-66页
   1 主要仪器设备第64页
   2 主要材料和试剂第64-66页
  第二节 实验方法第66-72页
   1 rAdUshSTAT3转染神经胶质瘤细胞(C6)细胞第66-67页
   2 转导rAdUshSTAT3的C6细胞STAT3 mRNA水平的检测第67-68页
   3 转导后细胞中STAT3蛋白水平的检测第68-70页
   4 MTT法检测转染后细胞增殖情况的变化第70-71页
   5 吖啶橙法检测转染后细胞形态的变化第71页
   6 免疫组织化学方法检测转染后细胞中PCNA蛋白表达情况第71-72页
  第三节 实验结果第72-86页
   1 rAdUshSTAT3的转导效率第72-73页
   2 RT-PCR在mRNA水平检测转导后细胞中STAT3mRNA的变化第73-76页
   3 Western-blot在蛋白质水平检测转导后细胞中STAT3变化第76-78页
   4 MTT法检测转导后细胞增殖情况的变化第78-80页
   5 吖啶橙染色法检测转染后细胞形态的变化第80-83页
   6 免疫组织化学法检测转染后细胞PCNA蛋白表达第83-86页
  第四节 小结第86-88页
   1 利用MTT法检测C6细胞增殖情况第86页
   2 利用RT-PCR在mRNA水平检测转导后细胞中STAT3mRNA的变化第86页
   3 利用Western-blot在蛋白质水平检测转导后细胞中STAT3变化第86-87页
   4 吖啶橙染色法检测转染后细胞形态的变化第87页
   5 免疫组织化学法检测转染后细胞PCNA表达第87-88页
第三篇 讨论第88-92页
第四篇 结论第92-93页
参考文献第93-101页
攻读学位期间发表的学术论文及取得的科研成果第101-102页
致谢第102-103页
中文摘要第103-106页
Abstract第106-109页

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