| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-17页 |
| ·EIAV 的历史和研究现状 | 第10页 |
| ·EIAV 流行病学研究 | 第10-13页 |
| ·EIAV 感染的控制 | 第10-11页 |
| ·EIAV 的发病周期 | 第11-12页 |
| ·流行性病学调查 | 第12页 |
| ·EIAV 的病理学表现 | 第12-13页 |
| ·EIAV 疫苗的研究进展 | 第13-14页 |
| ·EIAV 感染的免疫控制和病毒复制 | 第14-15页 |
| ·病毒的进化 | 第15-16页 |
| ·EIAV 分子生物学研究进展 | 第16-17页 |
| ·EIAV 形态结构和理化特性 | 第16页 |
| ·EIAV 的基因及其编码蛋白 | 第16-17页 |
| ·本研究课题的目的与意义 | 第17页 |
| 2 实验马传贫病毒中国株S2 基因原核表达及多抗体制备 | 第17-29页 |
| ·材料 | 第17-20页 |
| ·菌株与载体 | 第17-18页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| ·酶类及主要生化试剂 | 第18-19页 |
| ·主要试剂的配制 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-27页 |
| ·目的基因的克隆 | 第20-22页 |
| ·引物的设计与合成 | 第20-21页 |
| ·基因的PCR 扩增 | 第21页 |
| ·PCR 扩增出S2 基因片段的胶回收 | 第21-22页 |
| ·S2 基因的鉴定 | 第22-24页 |
| ·S2 基因与载体连接 | 第22页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第22页 |
| ·连接产物的转化 | 第22-24页 |
| ·S2 基因原核表达载体构建与鉴定 | 第24页 |
| ·表达载体PET-30A 制备 | 第24页 |
| ·连接与转化 | 第24页 |
| ·重组质粒的筛选和鉴定 | 第24页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第24-26页 |
| ·表达菌株的诱导表达 | 第24-25页 |
| ·融合蛋白的检测 | 第25-26页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第26-27页 |
| ·包涵体样品的准备 | 第26页 |
| ·融合蛋白的镍柱纯化 | 第26页 |
| ·透析袋的处理 | 第26-27页 |
| ·透析法复性重组蛋白 | 第27页 |
| ·蛋白浓缩与定量 | 第27页 |
| ·抗血清的制备 | 第27-29页 |
| ·免疫动物方案确立 | 第27页 |
| ·抗体水平的监测 | 第27-28页 |
| ·间接ELISA 操作步骤 | 第28页 |
| ·ELISA 法测定兔血清抗体效价 | 第28页 |
| ·抗体的特异性检测 | 第28-29页 |
| ·表2-2 TRICINE-SDS-PAGE 凝胶的制备 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-36页 |
| ·目的基因的获得 | 第29页 |
| ·S2 基因的鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组表达载体的鉴定 | 第30-31页 |
| ·PCR 鉴定 | 第30页 |
| ·酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·序列测定 | 第31页 |
| ·融合蛋白的表达及纯化 | 第31-34页 |
| ·大肠杆菌菌株BL21（DE3）中融合蛋白的表达 | 第31-32页 |
| ·蛋白表达条件的优化 | 第32-33页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| ·融合表达蛋白的WB 检测 | 第34页 |
| ·多克隆抗体的鉴定 | 第34-35页 |
| ·抗原最适包被浓度和血清最佳稀释度和抗体效价 | 第34-35页 |
| ·抗体的特异性检测 | 第35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| ·关于S2 基因的大肠杆菌表达 | 第35页 |
| ·蛋白复性 | 第35-36页 |
| ·融合蛋白纯化 | 第36页 |
| ·小分子蛋白质TRICINE-SDS-PAGE 电泳 | 第36页 |
| 4. 结论 | 第36-37页 |
| 致谢 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 作者简介 | 第42页 |
