| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第9-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-28页 |
| ·类黄酮物质的研究进展 | 第13-20页 |
| ·植物的色素物质 | 第13-14页 |
| ·类黄酮的生物合成途径 | 第14页 |
| ·类黄酮代谢途径中的功能基因 | 第14-17页 |
| ·类黄酮功能 | 第17页 |
| ·类黄酮化合物的理化特性 | 第17-20页 |
| ·彩色棉的研究进展 | 第20-27页 |
| ·彩色棉发展历史 | 第20页 |
| ·彩色棉在国内外研究现状 | 第20-22页 |
| ·彩色棉的颜色类型 | 第22页 |
| ·彩色棉纤维色泽的遗传 | 第22-23页 |
| ·天然彩色棉纤维发育和色素形成 | 第23-25页 |
| ·彩色棉纤维结构 | 第25页 |
| ·彩色棉纤维色素物质的形成与探索 | 第25-27页 |
| ·天然彩色棉的发展前景 | 第27页 |
| ·本研究的目与意义 | 第27-28页 |
| 第二章 利用cDNA-AFLP技术分离与彩色棉纤维色素相关的cDNA片段 | 第28-43页 |
| ·试验材料 | 第29-30页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·试剂和菌种 | 第29-30页 |
| ·引物 | 第30页 |
| ·试验方法 | 第30-37页 |
| ·棉花纤维细胞RNA的提取 | 第30-32页 |
| ·cDNA-AFLP试验 | 第32-36页 |
| ·反Northern杂交筛选差异cDNA片段 | 第36-37页 |
| ·DNA序列测定与分析 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-41页 |
| ·棉花纤维细胞总RNA的提取 | 第37-38页 |
| ·彩色棉棉花纤维cDNA-AFLP | 第38-39页 |
| ·差异片段反Northern杂交 | 第39-40页 |
| ·差异片段的克隆及序列分析 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第三章 彩色棉类黄酮3'羟基化酶(GhF3'H)与类黄酮3’5’羟基化酶(GhF3'5'H)的克隆与表达分析 | 第43-65页 |
| ·材料与试剂 | 第44页 |
| ·植物材料 | 第44页 |
| ·试剂与菌种 | 第44页 |
| ·引物 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-50页 |
| ·棉纤维总RNA提取 | 第44-45页 |
| ·RACE扩增反应 | 第45-47页 |
| ·半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR | 第47-48页 |
| ·GhF3'5'H与GhF3'H基因半定量RT-PCR | 第48页 |
| ·GhF3'5'H与GhF3'H基因实时荧光定量PCR | 第48-49页 |
| ·GhF3'H与GhF3'5'H原核表达载体的构建 | 第49页 |
| ·GhF3'H与GhF3'5'H蛋白诱导 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-62页 |
| ·cDNA末端序列快速扩增F3'5'H与F3'H片段全长 | 第50-51页 |
| ·GhF3'5'H全长cDNA的克隆及序列分析 | 第51-52页 |
| ·GhF3'5'H编码产物结构分析 | 第52-53页 |
| ·GhF3'5'H组织特异性表达分析 | 第53-55页 |
| ·GhF3'H全长cDNA的克隆、序列分析以及编码产物结构分析 | 第55-57页 |
| ·GhF3'H组织特异性表达分析 | 第57-59页 |
| ·GhF3'H与GhF3'5'H原核表达载体的构建 | 第59-61页 |
| ·pET28a-F3'H和pET28a-F3'5'H在大肠杆菌中的诱导表达 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| 第四章 查尔酮合成酶(GhCHS)基因的功能初步分析 | 第65-76页 |
| ·实验材料 | 第65-66页 |
| ·菌株与载体 | 第65页 |
| ·烟草转化培养基 | 第65-66页 |
| ·引物合成 | 第66页 |
| ·方法 | 第66-68页 |
| ·棉花纤维总RNA的提取 | 第66页 |
| ·各材料DNA提取 | 第66页 |
| ·烟草RNA提取 | 第66页 |
| ·农杆菌电击感受态的制备 | 第66-67页 |
| ·农杆菌电击感受态的电击转化 | 第67页 |
| ·农杆菌活化 | 第67页 |
| ·农杆菌介导的烟草转化 | 第67-68页 |
| ·烟草叶片中总黄酮的提取与测定 | 第68页 |
| ·结果分析 | 第68-73页 |
| ·GhCHS基因过表达载体构建与对烟草的转化 | 第68-69页 |
| ·GhCHS基因转化烟草及检测 | 第69-70页 |
| ·转基因植物的生物胁迫反应 | 第70-71页 |
| ·GhCHS转基因烟草叶片总黄酮检测 | 第71页 |
| ·GhCHS基因RNAi沉默载体构建 | 第71-73页 |
| ·讨论 | 第73-74页 |
| ·小结 | 第74-76页 |
| 第五章 彩色棉纤维四种类黄酮化合物HPLC测定方法的研究及其在棉纤维发育过程的含量变化 | 第76-91页 |
| ·材料和方法 | 第78-80页 |
| ·实验材料 | 第78-79页 |
| ·实验仪器与标准品 | 第79页 |
| ·标准曲线的制备 | 第79页 |
| ·样品的制备 | 第79页 |
| ·色谱条件 | 第79页 |
| ·方法精密度、重复性和样品稳定性试验 | 第79-80页 |
| ·加样回收率验证试验 | 第80页 |
| ·结果与分析 | 第80-88页 |
| ·四种类黄酮标准品色谱条件的优化条件 | 第80-83页 |
| ·类黄酮化合物含量与吸收峰面积间的线性关系 | 第83页 |
| ·方法精密度、重复性和样品稳定性 | 第83-84页 |
| ·试验方法的回收率 | 第84-85页 |
| ·天然彩色棉花纤维中的类黄酮化合物的提取条件 | 第85页 |
| ·棉花纤维中类黄酮化合物含量变化分析 | 第85-88页 |
| ·讨论 | 第88-90页 |
| ·小结 | 第90-91页 |
| 第六章 主要结论与创新点 | 第91-93页 |
| ·主要结论 | 第91页 |
| ·本文主要创新点 | 第91-92页 |
| ·进一步工作设想 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-103页 |
| 附录 | 第103-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 个人简介 | 第112-113页 |
| 导师评阅表 | 第113页 |
