| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第9-28页 |
| ·苦瓜蛋白MAP30的研究进展 | 第9-15页 |
| ·MAP30的生物活性 | 第10-12页 |
| ·MAP30的结构 | 第12-13页 |
| ·MAP30的作用机制 | 第13-15页 |
| ·巴斯特毕赤酵母的研究进展 | 第15-22页 |
| ·巴斯特毕赤酵母表达系统的构成 | 第15-20页 |
| ·巴斯特毕赤酵母的遗传特性 | 第20页 |
| ·外源蛋白在巴斯德毕赤酵母中的表达 | 第20-22页 |
| ·基因的优化 | 第22-26页 |
| ·影响外源基因表达的因数 | 第22-23页 |
| ·优化基因表达的关键因素 | 第23-25页 |
| ·基因优化的实例 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的意义、内容和技术路线 | 第26-28页 |
| ·目的意义 | 第26页 |
| ·研究内容 | 第26-27页 |
| ·技术路线 | 第27-28页 |
| 第2章 map30优化及未优化基因的克隆及鉴定 | 第28-47页 |
| ·实验材料 | 第28-30页 |
| ·菌株与质粒 | 第28页 |
| ·主要材料 | 第28-29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·实验中用到的数据库 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-39页 |
| ·优化map30基因 | 第30-31页 |
| ·引物设计 | 第31-32页 |
| ·优化map30基因质粒提取 | 第32页 |
| ·苦瓜总DNA的提取 | 第32页 |
| ·PCR扩增map30基因 | 第32-35页 |
| ·PCR扩增产物回收 | 第35-36页 |
| ·map30基因的克隆与测序 | 第36-37页 |
| ·重组质粒酶切鉴定 | 第37-39页 |
| ·重组质粒序列分析 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-45页 |
| ·优化基因质粒提取 | 第39页 |
| ·苦瓜总DNA的提取 | 第39页 |
| ·PCR扩增map30基因 | 第39-40页 |
| ·重组pMD18-map30基因的鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组质粒酶切鉴定 | 第41-43页 |
| ·重组质粒序列鉴定 | 第43-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第3章 map30酵母重组表达 | 第47-70页 |
| ·实验材料 | 第47-49页 |
| ·菌株 | 第47页 |
| ·主要试剂 | 第47-48页 |
| ·主要仪器 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-59页 |
| ·map30基因重组表达载体的构建及鉴定 | 第49-55页 |
| ·工程菌GS115/pPGAPHa/map30的构建 | 第55-57页 |
| ·工程菌GS115/pPGAPHa/map30表达及筛选鉴定 | 第57-59页 |
| ·结果与分析 | 第59-67页 |
| ·map30基因重组表达载体的构建及鉴定 | 第59-62页 |
| ·重组map30/pPGAPHa质粒的序列分析 | 第62-63页 |
| ·重组质粒线性化 | 第63-65页 |
| ·工程菌GS115/pPGAPHa/map30的构建 | 第65页 |
| ·SDS-PAGE筛选结果 | 第65-66页 |
| ·优化基因与未优化基因表达的比较 | 第66-67页 |
| ·重组蛋白Western blot鉴定 | 第67页 |
| ·讨论 | 第67-70页 |
| ·表达系统的选择 | 第67-68页 |
| ·表达载体的选择 | 第68页 |
| ·线性化及电转化 | 第68-69页 |
| ·TCA法沉淀蛋白 | 第69页 |
| ·蛋白质鉴定方法 | 第69-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
