摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
1 绪论 | 第8-16页 |
·蜘蛛丝简介 | 第8-12页 |
·蜘蛛丝的性质 | 第8页 |
·蜘蛛丝的分子构成 | 第8-9页 |
·蜘蛛丝的表达研究现状 | 第9-11页 |
·蜘蛛丝的应用 | 第11-12页 |
·原核表达 | 第12-13页 |
·原核表达载体 | 第12-13页 |
·原核表达宿主菌 | 第13页 |
·原核表达条件优化 | 第13页 |
·蛋白纯化 | 第13-14页 |
·亲和纯化 | 第13-14页 |
·组氨酸标签(His Tag) | 第14页 |
·多克隆抗体制备 | 第14-15页 |
·研究目的及意义 | 第15-16页 |
2 原核表达质粒的构建 | 第16-32页 |
·实验材料 | 第16-18页 |
·实验菌株 | 第16页 |
·载体信息 | 第16-17页 |
·实验试剂信息 | 第17页 |
·实验药品配制 | 第17-18页 |
·仪器设备 | 第18页 |
·实验方法 | 第18-24页 |
·蜘蛛拖丝蛋白基因二聚体片段的获得 | 第18-21页 |
·2S-pEasy-T3重组质粒的构建 | 第21-22页 |
·2S-pET-52b(+)重组质粒的构建 | 第22-24页 |
·实验结果 | 第24-30页 |
·2S-pEasy-T3重组质粒的获得及鉴定 | 第24-26页 |
·表达型2S-pET-52b(+)重组质粒的获得及鉴定 | 第26-30页 |
·讨论 | 第30页 |
·本章小结 | 第30-32页 |
3 蜘蛛拖丝蛋白二聚体的原核表达与蛋白纯化 | 第32-39页 |
·实验材料 | 第32-33页 |
·实验菌株 | 第32页 |
·实验试剂信息 | 第32页 |
·实验药品配制 | 第32-33页 |
·仪器设备 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-35页 |
·拖丝蛋白二聚体的原核表达 | 第33-34页 |
·二聚化拖丝蛋白的纯化 | 第34-35页 |
·实验结果 | 第35-37页 |
·拖丝蛋白二聚体原核表达菌株的筛选 | 第35页 |
·拖丝蛋白二聚体原核表达条件的筛选 | 第35-37页 |
·二聚化拖丝蛋白的纯化 | 第37页 |
·讨论 | 第37-38页 |
·本章小结 | 第38-39页 |
4 二聚化蜘蛛拖丝蛋白多克隆抗体的制备 | 第39-43页 |
·实验材料 | 第39页 |
·实验动物 | 第39页 |
·主要试剂配制 | 第39页 |
·实验仪器 | 第39页 |
·实验方法 | 第39-41页 |
·抗原处理 | 第39页 |
·动物免疫 | 第39-40页 |
·Elisa抗体效价检测 | 第40-41页 |
·实验结果 | 第41-42页 |
·抗体效价 | 第41-42页 |
·讨论 | 第42页 |
·本章小结 | 第42-43页 |
结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |