摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-11页 |
1 前言 | 第11-20页 |
·p53的功能 | 第12-13页 |
·p53稳定性的调控 | 第13-18页 |
·MDM2调节p53的稳定性 | 第13-15页 |
·翻译后修饰对p53稳定性的影响 | 第15-17页 |
·蛋白质-蛋白质相互作用影响p53的稳定性 | 第17-18页 |
·本课题的研究思路和意义 | 第18-20页 |
2 材料和方法 | 第20-32页 |
·实验材料 | 第20-24页 |
·菌种与细胞 | 第20页 |
·质粒载体 | 第20页 |
·试剂盒 | 第20页 |
·抗体 | 第20-21页 |
·其它试剂 | 第21页 |
·实验用的溶液 | 第21-23页 |
·PCR引物 | 第23-24页 |
·细胞RNA的抽提和反转录 | 第24-25页 |
·CCDC106基因表达质粒和突变质粒的构建 | 第25页 |
·CCDC106基因的全长cDNA克隆 | 第25-26页 |
·细胞培养与DNA转染 | 第26页 |
·荧光素酶实验 | 第26-27页 |
·EGFP-CCDC106融合蛋白的亚细胞定位 | 第27页 |
·CCDC106抗体的制备 | 第27-28页 |
·蛋白质的Western分析 | 第28-29页 |
·免疫共沉淀 | 第29-30页 |
·细胞免疫组织化学 | 第30-32页 |
3 结果与分析 | 第32-43页 |
·CCDC106的三个转录本的克隆和鉴定 | 第32-34页 |
·CCDC106蛋白的抗体制备及在细胞中的表达分析 | 第34-36页 |
·两个核定位信号位点(NLS)位点调节CCDC106的定位 | 第36-38页 |
·CCDC106和p53在细胞核内的共定位 | 第38-39页 |
·CCDC106蛋白和p53蛋白相互作用 | 第39-40页 |
·CCDC106抑制p53的转录活性 | 第40-41页 |
·CCDC106促进p53的降解 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-47页 |
参考文献 | 第47-59页 |
附录 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |