| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-17页 |
| 一 大肠杆菌的药物外排作用 | 第10页 |
| 二 大肠杆菌的多种外排系统 | 第10-12页 |
| 三 大肠杆菌AcrAB-TolC外排系统的表达调控 | 第12-13页 |
| 四 大肠杆菌AcrAB-TolC外排系统作用特点 | 第13页 |
| 五 大肠杆菌AcrAB-TolC外排系统的结构特点 | 第13-15页 |
| 六 大肠杆菌多药外排系统引起对不同类药物耐药的作用机制 | 第15-17页 |
| 2 引言 | 第17-18页 |
| 3 材料和方法 | 第18-28页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·菌株 | 第18页 |
| ·药品及药敏纸片 | 第18页 |
| ·试剂 | 第18页 |
| ·仪器 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-28页 |
| ·菌株鉴定 | 第19页 |
| ·液、固培养基及平板的制备和细菌菌液及试剂的制备 | 第19-21页 |
| ·菌株诱导 | 第21页 |
| ·临床分离菌株的外排表型筛选 | 第21页 |
| ·ESBLs的检测 | 第21页 |
| ·ESBLs基因型检测 | 第21-23页 |
| ·ESBLs的引物设计 | 第21-22页 |
| ·模板DNA的提取 | 第22-23页 |
| ·PCR扩增 | 第23页 |
| ·核苷酸序列测序及分析 | 第23页 |
| ·大肠杆菌ACRA的MRNA表达水平检测 | 第23-27页 |
| ·标准质粒的制备 | 第23-26页 |
| ·总RNA的提取 | 第26页 |
| ·菌体总RNA的反转录 | 第26-27页 |
| ·CPR扩增反转录产物以检验反转录结果 | 第27页 |
| ·荧光定量PCR的实验步骤 | 第27-28页 |
| 4 结果与分析 | 第28-41页 |
| ·诱导菌株的检测结果 | 第28-30页 |
| ·诱导菌株的MIC检测 | 第28页 |
| ·诱导菌株外排表型筛选结果 | 第28-30页 |
| ·诱导产ESBLs菌株应用泵抑制剂后的外排泵阳性株和外排阴性株比较 | 第30页 |
| ·诱导菌株ESBLs检测结果 | 第30页 |
| ·临床分离菌株的检测结果 | 第30-33页 |
| ·临床分离菌株的MIC检测 | 第30-31页 |
| ·临床分离菌株外排表型筛选 | 第31-33页 |
| ·临床分离菌株ESBLs筛选结果 | 第33页 |
| ·鸡大肠杆菌的ESBLs基因型检测结果 | 第33-37页 |
| ·诱导菌株检测结果 | 第33-35页 |
| ·测序结果及同源性比较结果 | 第35-36页 |
| ·不同ESBLs基因型筛选出的外排阳性株 | 第36-37页 |
| ·大肠杆菌ACRA的MRNA表达水平检测 | 第37-41页 |
| ·标准曲线的制备 | 第37-38页 |
| ·克隆质粒PCR电泳结果 | 第37页 |
| ·制备标准曲线 | 第37-38页 |
| ·待测样品cDNA的电泳结果 | 第38-39页 |
| ·待测样品荧光定量结果 | 第39-41页 |
| 5 讨论与分析 | 第41-45页 |
| ·临床和诱导菌株的外排表型筛选 | 第41-43页 |
| ·诱导菌株的ESBLs基因型分析 | 第43-44页 |
| ·大肠杆菌外排基因ACRA的MRNA表达水平检测 | 第44-45页 |
| 6 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| Abstract | 第51-52页 |
