| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 文献综述 | 第10-25页 |
| 1.1 植物miRNA的研究 | 第10-13页 |
| 1.1.1 植物miRNA的起源 | 第10页 |
| 1.1.2 植物miRNA的生物合成 | 第10-12页 |
| 1.1.3 植物miRNA的降解 | 第12页 |
| 1.1.4 miRNA的作用方式 | 第12-13页 |
| 1.2 植物miRNA对生长发育的作用 | 第13-16页 |
| 1.2.1 对根的发育 | 第13页 |
| 1.2.2 对茎和叶发育的影响 | 第13-14页 |
| 1.2.3 对花的发育 | 第14-15页 |
| 1.2.4 对果实的发育 | 第15-16页 |
| 1.3 miRNA与生物胁迫 | 第16-17页 |
| 1.4 miRNA与非生物胁迫 | 第17-22页 |
| 1.4.1 干旱胁迫 | 第17页 |
| 1.4.2 盐胁迫 | 第17-18页 |
| 1.4.3 高温与低温胁迫 | 第18-19页 |
| 1.4.4 养分胁迫 | 第19-21页 |
| 1.4.5 重金属胁迫 | 第21-22页 |
| 1.5 CRISPR/Cas9技术在植物中的研究 | 第22-23页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第23页 |
| 1.7 技术路线 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-27页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第26页 |
| 2.1.4 主要培养基的配制 | 第26-27页 |
| 2.1.5 植物总DNA提取试剂配制 | 第27页 |
| 2.1.6 琼脂糖凝胶电泳常用试剂的配制 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-41页 |
| 2.2.1 水稻miR159和miR390基因的基本信息 | 第27页 |
| 2.2.2 植物材料培养 | 第27-28页 |
| 2.2.3 植物总DNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.2.4 植物总RNA的提取及浓度测定 | 第29-30页 |
| 2.2.5 实时荧光定量PCR | 第30-33页 |
| 2.2.6 载体的构建 | 第33-39页 |
| 2.2.6.1 miR159和miR390以及其靶基因CRISPR/Cas9载体的构建 | 第33-39页 |
| 2.2.6.2 miR159和miR390以及其靶基因过表达载体的构建 | 第39页 |
| 2.2.7 miR390突变体基因型和突变情况 | 第39-41页 |
| 3 结果 | 第41-63页 |
| 3.1 miR159、miR390及其靶基因的时空表达 | 第41-48页 |
| 3.2 miR159和miR390CRISPR/Cas9和过表达载体的构建结果 | 第48页 |
| 3.3 miR390T0代基因型和突变体情况 | 第48-53页 |
| 3.4 miR390T1代基因型和突变体情况 | 第53-59页 |
| 3.5 miR390T2代基因型和突变体情况 | 第59-62页 |
| 3.6 小结 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-65页 |
| 5 总结与展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
