摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第1章 绪论 | 第10-19页 |
1.1 课题背景 | 第10-14页 |
1.1.1 囊泡分泌核心蛋白 ---SNARE复合体 | 第10-11页 |
1.1.2 Munc13蛋白简介 | 第11-13页 |
1.1.3 Syntaxin蛋白简介 | 第13-14页 |
1.2 本文研究内容介绍 | 第14-17页 |
1.2.1 囊泡的循环 | 第14-15页 |
1.2.2 囊泡的融合机制 | 第15-16页 |
1.2.3 本文研究内容 | 第16-17页 |
1.3 研究意义 | 第17-19页 |
第2章 Munc13-1 的MUN结构域中NF残基在促进囊泡融合过程中的机制研究 | 第19-30页 |
2.1 引言 | 第19页 |
2.2 实验材料 | 第19-21页 |
2.2.1 菌株、细胞株 | 第19-20页 |
2.2.2 实验试剂,耗材 | 第20页 |
2.2.3 常用试剂 | 第20-21页 |
2.3 实验方法 | 第21-25页 |
2.3.1 感受态制备 | 第21页 |
2.3.2 质粒的扩增 | 第21-22页 |
2.3.3 HEK293T细胞的复苏和培养 | 第22页 |
2.3.4 慢病毒制备 | 第22页 |
2.3.5 慢病毒浓缩 | 第22-23页 |
2.3.6 神经元细胞的培养 | 第23页 |
2.3.7 全细胞膜片钳记录 | 第23-25页 |
2.4 结果与讨论 | 第25-30页 |
2.4.1 病毒测试 | 第25-26页 |
2.4.2 Munc13-1 的NF氨基酸残基在调控囊泡自发释放中的作用 | 第26-27页 |
2.4.3 Munc13-1 的NF残基在动作电位引起囊泡同步释放中的作用 | 第27-28页 |
2.4.4 Munc13-1 的NF氨基酸残基对可释放囊泡库的影响 | 第28-29页 |
2.4.5 小结 | 第29-30页 |
第3章 体外寻找与Munc13-1NF残基相互作用的蛋白位点的研究 | 第30-34页 |
3.1 引言 | 第30页 |
3.2 实验材料 | 第30页 |
3.3 实验方法 | 第30-31页 |
3.4 结果与讨论 | 第31-34页 |
3.4.1 Syntaxin的LE突变体能够绕过NF残基作用促进囊泡融合 | 第31页 |
3.4.2 NF突变后的MUN结构域与Syntaxin的连接区域相互作用减弱 | 第31-32页 |
3.4.3 Syntaxin连接区域的Arg, Ile残基与MUN结构域相互作用研究 | 第32-33页 |
3.4.4 小结 | 第33-34页 |
第4章 体内Munc13与Syntaxin相互作用机制研究 | 第34-39页 |
4.1 引言 | 第34页 |
4.2 实验材料 | 第34页 |
4.3 实验方法 | 第34页 |
4.4 结果与讨论 | 第34-39页 |
4.4.1 Syntaxin的RI氨基酸残基在调控囊泡自发释放中的作用 | 第34-36页 |
4.4.2 Syntaxin的RI氨基酸残基在动作电位引起囊泡同步释放中作用 | 第36-37页 |
4.4.3 Syntaxin的RI氨基酸残基对可释放囊泡库的影响 | 第37-38页 |
4.4.4 小结 | 第38-39页 |
结论与展望 | 第39-41页 |
结论 | 第39-40页 |
展望 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第47页 |