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初步探究Adp抑制脂肪细胞分化的分子机制

缩略词对照表第10-11页
中文摘要第11-12页
英文摘要第12-14页
1 前言第14-22页
    1.1 肥胖与脂肪细胞第14-15页
        1.1.1 肥胖第14页
        1.1.2 脂肪组织第14-15页
    1.2 脂肪细胞分化第15-18页
        1.2.1 脂肪细胞的体外研究模型第15页
        1.2.2 脂肪细胞分化过程第15-16页
        1.2.3 脂肪细胞分化的转录调控第16-18页
    1.3 Adp第18-21页
        1.3.1 Adp 的结构第18-19页
        1.3.2 Adp 的功能第19-21页
    1.4 本课题研究的目的、内容和意义第21-22页
2 实验材料与方法第22-55页
    2.1 实验材料第22-27页
        2.1.1 实验药品第22-24页
        2.1.2 酶第24页
        2.1.3 抗体第24页
        2.1.4 材料及仪器第24-26页
        2.1.5 质粒第26页
        2.1.6 菌株第26页
        2.1.7 细胞株第26-27页
    2.2 实验方法第27-55页
        2.2.1 分子克隆实验第27-36页
            2.2.1.1 感受态的制备第27-28页
            2.2.1.3 质粒DNA转化实验第28-29页
            2.2.1.3 质粒DNA小量抽提第29-30页
            2.2.1.4 质粒DNA中量抽提第30-32页
            2.2.1.5 DNA琼脂糖凝胶电泳第32-33页
            2.2.1.6 DNA琼脂糖凝胶回收第33-34页
            2.2.1.7 质粒的构建第34-36页
        2.2.2 细胞相关实验第36-41页
            2.2.2.1 细胞系培养第36-38页
            2.2.2.2 细胞冻存第38页
            2.2.2.3 3T3-L1细胞诱导分化第38-39页
            2.2.2.4 油红染色观察3T3-L1细胞分化第39-40页
            2.2.2.5 细胞转染第40页
            2.2.2.6 慢病毒的包装与感染第40-41页
        2.2.3 RNA相关实验第41-43页
            2.2.3.1 Trizol法小量提取总RRNA第42页
            2.2.3.2 逆转录为 cDNA第42-43页
            2.2.3.3 实时荧光定量PCR第43页
        2.2.4 蛋白质相关实验第43-55页
            2.2.4.1 细胞总蛋白的提取及样品制备第44页
            2.2.4.2 提取细胞核蛋白第44-46页
            2.2.4.3 串联亲和层析纯化蛋白第46-48页
            2.2.4.4 免疫共沉淀实验第48-49页
            2.2.4.5 蛋白质免疫印迹法第49-52页
            2.2.4.6 银染第52-55页
3 结果与分析第55-73页
    3.1 Adp抑制脂肪细胞分化第55-56页
    3.2 Adp 通过与DDB1-CUL4 形成E3复合体发挥作用第56-57页
    3.3 检测Adp 对PPARγ等的影响第57-58页
    3.4 纯化Adp 相互作用蛋白第58-73页
        3.4.1 鉴定Adp 作用时期第58-60页
        3.4.2 初步纯化Adp 相互作用蛋白第60-64页
        3.4.3 检测标签对Adp 功能的影响第64-66页
        3.4.4 以Flag-Adp 来纯化Adp 相互作用蛋白第66-68页
        3.4.5 以NLS-Flag-Adp来纯化Adp 相互作用蛋白第68-70页
        3.4.6 Adp作用于Mybbpla第70-73页
4 讨论第73-75页
参考文献第75-81页
致谢第81页

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