缩略语表 | 第6-9页 |
中文摘要 | 第9-14页 |
英文摘要 | 第14-20页 |
前言 | 第21-23页 |
文献回顾 | 第23-35页 |
第一部分 炎症微环境对PDLSCS成骨分化能力的影响 | 第35-46页 |
1 实验材料 | 第35-37页 |
1.1 主要试剂 | 第35-36页 |
1.2 主要仪器 | 第36-37页 |
2 实验方法 | 第37-41页 |
2.1 PDSLCs的分离培养 | 第37-38页 |
2.2 PDSLCs的鉴定及成骨分化诱导 | 第38页 |
2.3 应用TNF-α刺激H-PDLSCs模拟炎症微环境 | 第38-39页 |
2.4 实时定量聚合酶链式反应 | 第39-41页 |
2.5 统计 | 第41页 |
3 结果 | 第41-45页 |
3.1 正常及炎症来源PDSLCs的鉴定 | 第41页 |
3.2 H-PDLSCs和PDLSCs成骨分化能力的比较 | 第41-43页 |
3.3 TNF-α模拟炎症微环境下,PDLSCs成骨分化能力的改变 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-46页 |
第二部分 炎症微环境下线粒体融合蛋白表达及其介导的细胞器活动改变 | 第46-58页 |
1 实验材料 | 第46-47页 |
1.1 主要试剂 | 第46-47页 |
1.2 主要仪器 | 第47页 |
2 实验方法 | 第47-48页 |
2.1 qRT-PCR检测Mfn1、Mfn2表达量 | 第47页 |
2.2 透射电镜样本制备 | 第47-48页 |
2.3 内质网及线粒体的荧光标记 | 第48页 |
2.4 统计 | 第48页 |
3 结果 | 第48-56页 |
4 讨论 | 第56-58页 |
第三部分 线粒体融合蛋白对PDLSCS成骨分化能力的调控作用 | 第58-65页 |
1 实验材料 | 第58页 |
1.1 主要试剂 | 第58页 |
1.2 主要仪器 | 第58页 |
2 实验方法 | 第58-60页 |
2.1 siRNA转染 | 第58-59页 |
2.2 过表达质粒转染 | 第59页 |
2.3 qRT-PCR检测转染效率及成骨基因表达 | 第59页 |
2.4 茜素红染色及十六烷基吡啶定量 | 第59-60页 |
2.5 统计 | 第60页 |
3 结果 | 第60-64页 |
4 讨论 | 第64-65页 |
第四部分 WNT/Β-CATENIN通路通过线粒体融合蛋白调控PDLSCS成骨分化 | 第65-74页 |
1 实验材料 | 第65页 |
1.1 主要试剂 | 第65页 |
1.3 主要仪器 | 第65页 |
2 实验方法 | 第65-67页 |
2.1 应用LiCl激活细H-PDSLCs中Wnt通路 | 第65-66页 |
2.2 应用siMfn1、siMfn2下调H-PDLSCs+LiCl组中表达量 | 第66页 |
2.3 qRT-PCR检测Mfn1、Mfn2及成骨基因表达量 | 第66页 |
2.4 茜素红染色及十六烷基吡啶定量 | 第66页 |
2.5 透射电镜样本制备 | 第66页 |
2.6 内质网及线粒体的荧光标记 | 第66页 |
2.7 统计 | 第66-67页 |
3 结果 | 第67-73页 |
4 讨论 | 第73-74页 |
小结 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-83页 |
个人简历和研究成果 | 第83-84页 |
致谢 | 第84-85页 |