| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语/符号说明 | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-18页 |
| 研究现状、成果 | 第13-16页 |
| 研究目的、方法 | 第16-18页 |
| 一、miR-10a在肝癌细胞及体内的功能研究 | 第18-37页 |
| 1.1 材料和方法 | 第18-27页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第18-20页 |
| 1.1.2 实验方法 | 第20-27页 |
| 1.2 结果 | 第27-33页 |
| 1.2.1 实时定量PCR分析肝癌及其邻近癌旁组织中miR-10a的表达水平差异 | 第28页 |
| 1.2.2 成功构建miR-10a的过表达质粒pcDNA3-pri-10a,并筛选得到了过表达及封闭表达miR-10a的QGY-7703细胞稳定克隆株 | 第28-29页 |
| 1.2.3 miR-10a对QGY-7703及HepG2细胞的活性及增殖能力无明显影响 | 第29-30页 |
| 1.2.4 miR-10a促进肝癌细胞的迁移及侵袭能力 | 第30-32页 |
| 1.2.5 miR-10a在体内抑制肝癌的转移 | 第32-33页 |
| 1.3 讨论 | 第33-36页 |
| 1.4 小结 | 第36-37页 |
| 二、miR-10a在肝癌细胞中靶基因的确定及其功能研究 | 第37-63页 |
| 2.1 材料与方法 | 第37-48页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第37页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第37-48页 |
| 2.2 结果 | 第48-58页 |
| 2.2.1 miR-10a候选靶基因的筛选 | 第48-49页 |
| 2.2.2 miR-10a在肝癌中与EphA4靶定关系的研究 | 第49-53页 |
| 2.2.2.1 Real-time RT-PCR证明在miR-10a表达水平偏高的肝癌组织中EphA4的mRNA表达水平较低 | 第49-50页 |
| 2.2.2.2 免疫组化染色证明miR-10a在肝癌组织中可以下调EphA4的蛋白表达水平 | 第50-51页 |
| 2.2.2.3 Real-time RT-PCR及Western blot检测再次证明miR-10a在肝癌细胞中可以下调EphA4的mRNA及蛋白表达水平 | 第51-52页 |
| 2.2.2.4 荧光报告载体实验验证EphA4是miR-10a的直接靶基因 | 第52-53页 |
| 2.2.4 miR-10a的靶基因功能的研究 | 第53-58页 |
| 2.3 讨论 | 第58-61页 |
| 2.4 小结 | 第61-63页 |
| 三、miR-10a在体内及体外对肝癌转移发挥作用的机制研究 | 第63-78页 |
| 3.1 材料与方法 | 第63-66页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第63页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第63-66页 |
| 3.2 结果 | 第66-73页 |
| 3.2.1 EMT过程分析探索miR-10a在体外促进肝癌细胞迁移的作用机制 | 第66-68页 |
| 3.2.2 运用细朐粘附及VM实验检测miR-10a及EphA4表达水平不同时对肝癌细胞粘附能力及血管生成拟态的影响 | 第68-70页 |
| 3.2.3 体内实验证实miR-10a可抑制肝内转移灶的血管形成 | 第70-71页 |
| 3.2.4 Western blot检测miR-10a及EphA4表达水平不同时与细胞-基质粘附及血管生成拟态相关的分子表达水平的变化 | 第71-72页 |
| 3.2.5 挽救实验验证miR-10a通过EphA4发挥抑制细胞粘附作用的直接性 | 第72-73页 |
| 3.3 讨论 | 第73-77页 |
| 3.4 小结 | 第77-78页 |
| 全文结论 | 第78-80页 |
| 论文创新点 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-89页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第89页 |
| 论文资助项目 | 第89-91页 |
| 综述 microRNA与肿瘤转移的研究进展 | 第91-104页 |
| 综述参考文献 | 第97-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
