| 中文摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-21页 |
| 1.1 金属硫蛋白概述 | 第13-17页 |
| 1.1.1 金属与生命 | 第13页 |
| 1.1.2 MTs的基本特征 | 第13-14页 |
| 1.1.3 MTs的分类及分布 | 第14-15页 |
| 1.1.4 MTs的表达调控 | 第15页 |
| 1.1.5 MTs的功能 | 第15-17页 |
| 1.2 单细胞真核生物MTs概述 | 第17-19页 |
| 1.2.1 单细胞原生动物MTs的研究现状 | 第17-18页 |
| 1.2.2 单细胞原生动物MTs的结构 | 第18-19页 |
| 1.2.3 金藻及藻类MTs概述 | 第19页 |
| 1.3 本项研究工作的目的和意义 | 第19-20页 |
| 实验技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 金藻CRP1基因的鉴定及表达分析 | 第21-34页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第21-23页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第21-23页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-28页 |
| 2.2.1 金藻的培养 | 第23页 |
| 2.2.2 金藻基因组的提取及PmCRP1基因的鉴定 | 第23-25页 |
| 2.2.3 半定量PCR和实时荧光定量PCR分析PmCRP1基因表达 | 第25-28页 |
| 2.3 实验结果 | 第28-33页 |
| 2.3.1 金藻PmCRP1基因的克隆鉴定 | 第28-29页 |
| 2.3.2 金藻PmCRP1基因序列及蛋白序列分析 | 第29-31页 |
| 2.3.3 金藻PmCRP1基因表达分析 | 第31-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 金藻CRP1的表达纯化和功能分析 | 第34-49页 |
| 3.1 实验材料与试剂 | 第34-36页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第35-36页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-42页 |
| 3.2.1 pSUMO-PmCRP1重组质粒的构建 | 第36-38页 |
| 3.2.2 SUMO-PmCRP1的表达分析 | 第38-39页 |
| 3.2.3 SUMO-PmCRP1的Western-blotting检测 | 第39-40页 |
| 3.2.4 SUMO-PmCRP1的纯化 | 第40-41页 |
| 3.2.5 SUMO-PmCRP1的热稳定性分析 | 第41页 |
| 3.2.6 SUMO-PmCRP1的荧光光谱分析 | 第41-42页 |
| 3.3 实验结果 | 第42-47页 |
| 3.3.1 pSUMO-PmCRP1重组质粒的构建及鉴定 | 第42页 |
| 3.3.2 SUMO-PmCRP1的表达及可溶性分析 | 第42-44页 |
| 3.3.3 SUMO-PmCRP1的Western-blotting结果 | 第44页 |
| 3.3.4 SUMO-PmCRP1的纯化 | 第44-46页 |
| 3.3.5 SUMO-PmCRP1的热稳定性 | 第46页 |
| 3.3.6 SUMO-PmCRP1结合Cd~(2+),Cu~(2+),Zn~(2+)的数目 | 第46-47页 |
| 3.4 讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 重组大肠杆菌对重金属离子的响应 | 第49-57页 |
| 4.1 实验材料与试剂 | 第49页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第49页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第49页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第49页 |
| 4.2 实验方法 | 第49-53页 |
| 4.2.1 pSUMO-tru29PmCRP1,pSUMO-tru51PmCRP1质粒构建 | 第49-52页 |
| 4.2.2 重组大肠杆菌在金属离子胁迫下的增殖分析 | 第52-53页 |
| 4.3 实验结果 | 第53-56页 |
| 4.3.1 pSUMO-tru29PmCRP1,pSUMO-tru51PmCRP1质粒鉴定 | 第53-54页 |
| 4.3.2 无金属离子条件下四种重组大肠杆菌的增殖 | 第54-55页 |
| 4.3.3 四种重组大肠杆菌对镉,铜,锌离子的耐受性 | 第55页 |
| 4.3.4 在不同金属离子胁迫下四种重组大肠杆菌的增殖 | 第55-56页 |
| 4.4 讨论 | 第56-57页 |
| 总结和展望 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 附录 | 第67-69页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 个人简况及联系方式 | 第71-74页 |
