河南部分地区PCV2流行病学调查及卵黄抗体制备
致谢 | 第4-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
第一部分 文献综述 | 第11-24页 |
第一章 PCV研究进展 | 第11-16页 |
1 PCV2的病原学 | 第11-12页 |
1.1 猪圆环病毒的发现及分类 | 第11页 |
1.2 猪圆环病毒2型的理化性质 | 第11页 |
1.3 猪圆环病毒2型病毒的传染性 | 第11页 |
1.4 猪圆环病毒的分子生物学特征 | 第11-12页 |
1.4.1 猪圆环病毒基因组结构 | 第11页 |
1.4.2 猪圆环病毒2型基因组编码的蛋白 | 第11-12页 |
1.4.3 猪圆环病毒2型的致病机理 | 第12页 |
2 PCV2引起的相关疾病 | 第12-14页 |
2.1 断奶仔猪多系统衰竭综合征 | 第12-13页 |
2.2 猪皮炎肾病综合征 | 第13页 |
2.3 猪呼吸道疾病综合征 | 第13页 |
2.4 繁殖障碍 | 第13-14页 |
2.5 仔猪先天性震颤 | 第14页 |
3 诊断方法 | 第14-16页 |
3.1 临床诊断 | 第14页 |
3.2 病理学检查 | 第14页 |
3.3 病原学和血清学检查 | 第14-16页 |
3.3.1 间接免疫荧光试验(IFA) | 第14页 |
3.3.2 免疫组织化学方法技术 | 第14-15页 |
3.3.3 聚合酶链式反应 | 第15页 |
3.3.4 原位杂交 | 第15页 |
3.3.5 酶联免疫吸附试验 | 第15-16页 |
4 PCV2疫苗研究现状 | 第16页 |
第二章 IgY综述 | 第16-24页 |
1 IgY的发现与优势 | 第16-17页 |
1.1 IgY的发现 | 第16-17页 |
1.2 IgY的优势 | 第17页 |
2 IgY的应用 | 第17-22页 |
2.1 IgY在人类疾病防治中的应用 | 第17-18页 |
2.2 IgY在禽病防治中的应用 | 第18-19页 |
2.2.1 新城疫 | 第18页 |
2.2.2 传染性法氏囊病 | 第18页 |
2.2.3 禽流感 | 第18-19页 |
2.2.4 小鹅瘟 | 第19页 |
2.2.5 鸭肝炎 | 第19页 |
2.2.6 鸭坦布苏病毒 | 第19页 |
2.3 IgY在猪病防治中的应用 | 第19-22页 |
2.3.1 大肠杆菌 | 第19-20页 |
2.3.2 沙门氏菌 | 第20页 |
2.3.3 猪传染性胃肠炎与猪流行性腹泻 | 第20-21页 |
2.3.5 轮状病毒 | 第21页 |
2.3.6 猪圆环病毒2型 | 第21页 |
2.3.7 猪繁殖与呼吸综合征 | 第21-22页 |
2.3.8 猪瘟 | 第22页 |
3 IgY的提取纯化方法 | 第22-24页 |
3.1 聚乙二醇6000沉淀法 | 第22-23页 |
3.2 硫酸葡聚糖沉淀法 | 第23页 |
3.3 氯仿法 | 第23页 |
3.4 有机溶剂法 | 第23页 |
3.5 水稀释法 | 第23页 |
3.6 表面活性剂法 | 第23页 |
3.7 辛酸法 | 第23-24页 |
第二部分 研究内容 | 第24-45页 |
第一章 CV2全基因组测序及分析 | 第24-36页 |
1 引言 | 第24页 |
2 材料与方法 | 第24-30页 |
2.1 主要仪器设备 | 第24-25页 |
2.2 主要试剂及配置方法 | 第25-26页 |
2.3 引物设计及合成 | 第26页 |
2.4 病毒核酸纯化 | 第26-27页 |
2.5 检测收集的病料 | 第27页 |
2.6 PCV2基因组测序 | 第27-30页 |
3 实验结果 | 第30-35页 |
3.1 部分病料检测结果 | 第30页 |
3.2 PCV2全基因组扩增结果 | 第30-31页 |
3.3 阳性菌株鉴定 | 第31-32页 |
3.4 PCV2全基因组同源性分析 | 第32页 |
3.5 PCV2ORF1序列及编码蛋白分析 | 第32-33页 |
3.6 PCV2ORF2序列及编码蛋白分析 | 第33-34页 |
3.7 PCV2的遗传进化分析 | 第34-35页 |
4 讨论 | 第35-36页 |
第二章 PCV2特异性IgY的研制 | 第36-45页 |
1 引言 | 第36-37页 |
2 材料与方法 | 第37-40页 |
2.1 常用试剂的配置 | 第37-38页 |
2.2 蛋鸡的饲养与免疫 | 第38页 |
2.3 鸡蛋的收集及血清采集 | 第38页 |
2.4 血清抗体的制备 | 第38-39页 |
2.5 IgY的制备 | 第39页 |
2.6 IgY纯度检测 | 第39-40页 |
2.7 两种方法纯化样品的抗体水平检测 | 第40页 |
2.8 不同免疫方案中血清抗体变化规律 | 第40页 |
2.9 不同免疫方案中IgY变化规律 | 第40页 |
3 结果与分析 | 第40-43页 |
3.1 抗体纯化效果 | 第40-41页 |
3.2 纯化方法对抗体水平的影响 | 第41-42页 |
3.3 血清抗体与IgY变化规律 | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-52页 |