| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 引言 | 第10-16页 |
| 第一部分：SIRT2载体构建、SIRT2的表达与纯化及SIRT2与HSP90之间的相互作用 | 第16-38页 |
| 1.1 实验方法 | 第16-31页 |
| 1.1.1 引物设计 | 第16页 |
| 1.1.2 PCR扩增目的基因及克隆 | 第16-17页 |
| 1.1.3 克隆载体的构建与鉴定 | 第17-18页 |
| 1.1.4 构建pGEX-6P1SIRT2表达载体并鉴定 | 第18-20页 |
| 1.1.5 SIRT2蛋白的原核表达及纯化 | 第20-21页 |
| 1.1.6 融合蛋白GST-SIRT2的pull-down及蛋白的质谱分析 | 第21-22页 |
| 1.1.7 免疫共沉淀确定SIRT2与HSP90相互作用 | 第22页 |
| 1.1.8 SIRT2和HSP90的siRNA的筛选 | 第22-25页 |
| 1.1.9 慢病毒载体的构建及稳定表达 | 第25-30页 |
| 1.1.10 SIRT2过表达，对HSP90去乙酰化的影响 | 第30页 |
| 1.1.11 抑制SIRT2，对HSP90去乙酰化的影响 | 第30-31页 |
| 1.2 结果与分析 | 第31-38页 |
| 第二部分 SIRT2的亚细胞定位 | 第38-44页 |
| 2.1 实验方法 | 第38-39页 |
| 2.1.1 引物设计 | 第38页 |
| 2.1.2 PCR扩增目的基因及克隆 | 第38页 |
| 2.1.3 重组质粒SIRT2-pEGFP-C2的构建及鉴定 | 第38页 |
| 2.1.4 细胞培养 | 第38-39页 |
| 2.1.5 真核细胞中的表达 | 第39页 |
| 2.1.6 亚细胞定位 | 第39页 |
| 2.2 结果与分析 | 第39-44页 |
| 2.2.1 SIRT2目的基因的获得 | 第39-40页 |
| 2.2.2 T载体克隆的鉴定 | 第40页 |
| 2.2.3 真核表达载体的构建与鉴定 | 第40页 |
| 2.2.4 重组质粒在 293T细胞中的表达 | 第40-41页 |
| 2.2.5 SIRT2的亚细胞定位 | 第41-44页 |
| 结论 | 第44-46页 |
| 讨论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 综述 | 第52-64页 |
| 1 哺乳动物Sirtuins家族简介 | 第52页 |
| 2 SIRT2的生物学功能 | 第52-60页 |
| 2.1 SIRT2大脑细胞中的表达 | 第52页 |
| 2.2 SIRT2作为一种微管蛋白去乙酰化酶 | 第52-53页 |
| 2.3 SIRT2调节正常细胞周期中的有丝分裂退出 | 第53-55页 |
| 2.4 SIRT2在少突胶质细胞中的重要功能 | 第55页 |
| 2.5 SIRT2是小鼠肿瘤的抑制剂 | 第55-57页 |
| 2.6 SIRT2积极引导APC/C活性，防止基因组不稳定 | 第57-58页 |
| 2.7 SIRT2调节神经退行性疾病 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
| 攻读硕士期间发表和待发表的学术论文 | 第66-67页 |
