摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
中英文缩略词表 | 第9-10页 |
第1章 引言 | 第10-12页 |
第2章 实验材料 | 第12-15页 |
2.1 U87和U251细胞 | 第12页 |
2.2 免疫缺陷裸鼠 | 第12页 |
2.3 主要设备仪器 | 第12页 |
2.4 主要试剂耗材 | 第12-13页 |
2.5 主要试剂配法 | 第13-15页 |
2.5.1 完全培养基 | 第13页 |
2.5.2 6.5×磷酸盐缓冲液(PBS) | 第13-14页 |
2.5.3 12.5×电泳缓冲液 | 第14页 |
2.5.4 calycosin配制 | 第14页 |
2.5.5 结晶紫染色溶液: | 第14页 |
2.5.6 6.5×转膜缓冲液 | 第14-15页 |
第3章 实验方法 | 第15-23页 |
3.1 U87和U251培养 | 第15页 |
3.1.1 细胞培养和传代 | 第15页 |
3.1.2 细胞复苏及冻存 | 第15页 |
3.2 MTT实验检测细胞生长增殖能力 | 第15-16页 |
3.3 Transwell实验检测细胞迁移 | 第16页 |
3.4 Transwell实验检测细胞侵袭 | 第16-17页 |
3.5 RNA提取及real-time pcr | 第17-19页 |
3.5.1 RNA的提取及浓度测定 | 第17页 |
3.5.2 基因的反转录 | 第17-18页 |
3.5.3 Q-PCR测定基因表达 | 第18-19页 |
3.6 转染用质粒的准备 | 第19页 |
3.7 细胞转染 | 第19-20页 |
3.8 Western Blotting | 第20-21页 |
3.8.1 提取蛋白 | 第20页 |
3.8.2 SDS-PAGE电泳 | 第20-21页 |
3.9 裸鼠皮下肿瘤模型建立 | 第21页 |
3.10 Western Blot检测裸鼠皮下瘤块中侵袭相关分子的蛋白表达 | 第21-22页 |
3.11数据统计处理 | 第22-23页 |
第4章 结果 | 第23-36页 |
4.1 calycosin对人胶质母细胞瘤U87和U251细胞增殖生长的影响 | 第23-24页 |
4.2 transwell迁徙实验检测calycosin对人胶质母细胞瘤迁徙的影响 | 第24-25页 |
4.3 transwell小室实验检测calycosin对人胶质母细胞瘤侵袭的影响 | 第25-26页 |
4.4 calycosin对U87和U251间质相关分子及基质金属蛋白酶的基因及蛋白表达有抑制作用 | 第26-29页 |
4.5 calycosin对U87和U251细胞TGF-β表达有抑制作用 | 第29-30页 |
4.6 转染TGF-β1 质粒后能逆转calycosin引起的间质相关分子及基质金属蛋白酶的表达变化并逆转calycosin引起的现象 | 第30-33页 |
4.7 在裸鼠体内实验中calycosin能抑制U87细胞的迁徙和侵袭 | 第33-36页 |
第5章 讨论 | 第36-39页 |
第6章 结论 | 第39-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-43页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第43-44页 |
综述 | 第44-50页 |
参考文献 | 第48-50页 |