前言 | 第4-6页 |
中文摘要 | 第6-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
英文缩写词 | 第17-19页 |
第1章 绪论 | 第19-21页 |
第2章 文献综述 | 第21-35页 |
2.1 胶质瘤的治疗现状 | 第21-23页 |
2.1.1 手术治疗 | 第21页 |
2.1.2 放射治疗 | 第21-22页 |
2.1.3 化学治疗 | 第22页 |
2.1.4 其他治疗方法 | 第22-23页 |
2.2 程序性坏死 | 第23-26页 |
2.3 RIP1和RIP3 | 第26-28页 |
2.4 ROS与H2O2 | 第28-30页 |
2.5 糖酵解障碍 | 第30-33页 |
2.6 紫草素的研究现状 | 第33-35页 |
第3章 实验材料与方法 | 第35-59页 |
3.1 主要器材与试剂 | 第35-37页 |
3.1.1 主要实验器材 | 第35-36页 |
3.1.2 主要实验试剂 | 第36-37页 |
3.2 细胞系及其培养裸鼠饲养 | 第37-38页 |
3.3 实验液体及配制方法 | 第38-39页 |
3.4 细胞复苏、传代及冻存 | 第39-40页 |
3.5 实验技术 | 第40-59页 |
3.5.1 乳酸脱氢酶释放法(LDH法)测细胞死亡率 | 第40-41页 |
3.5.2 Hoechst及PI染色观察胶质瘤细胞形态学变化 | 第41页 |
3.5.3 流式细胞术测细胞死亡方式及死亡率 | 第41-43页 |
3.5.4 免疫共沉淀法测胶质瘤细胞中RIP1和RIP3的相互作用 | 第43页 |
3.5.5 细胞内ROS检测 | 第43-45页 |
3.5.6 BALB/C裸鼠移植瘤模型试验 | 第45-46页 |
3.5.7 细胞及裸鼠肿瘤组织内H2O2含量测定 | 第46-47页 |
3.5.8 DTNB-GSSH检测法测胶质瘤细胞及裸鼠移植瘤中GSH含量的变化 | 第47-48页 |
3.5.9 siRNA沉默RIP1、RIP3基因 | 第48-49页 |
3.5.10 Western Blot法测细胞及组织内蛋白变化 | 第49-54页 |
3.5.11 细胞内及裸鼠移植瘤内葡萄糖6磷酸测定 | 第54-55页 |
3.5.12 细胞内及裸鼠移植瘤内丙酮酸含量的测定。 | 第55-57页 |
3.5.13 胶质瘤细胞及裸鼠移植瘤组织内ATP含量测定 | 第57页 |
3.5.14 胶质瘤细胞及裸鼠移植瘤组织内半胱氨酸含量测定 | 第57-58页 |
3.5.15 统计学分析 | 第58-59页 |
第4章 实验结果 | 第59-85页 |
4.1 紫草素诱导胶质瘤细胞的死亡 | 第59-61页 |
4.1.1 LDH法检测shikonin浓度梯度对C6、SHG-44、U87、U251胶质瘤细胞毒性作用 | 第59页 |
4.1.2 流式细胞学及PI、Hoechst染色提示紫草素诱导的细胞死亡是坏死而不是凋亡 | 第59-61页 |
4.2 RIP1、RIP3参与调控紫草素诱导的胶质瘤细胞死亡 | 第61-64页 |
4.2.1 胶质瘤细胞在紫草素作用下RIP1、RIP3表达上调并呈浓度依赖性。 | 第61页 |
4.2.2 紫草素促进了SHG44、U251细胞中RIP1、RIP3的相互作用 | 第61-62页 |
4.2.3 RIP1抑制剂和RIP3抑制剂可降低紫草素引起的胶质瘤细胞死亡率 | 第62-64页 |
4.3 RIP1、RIP3在紫草素诱导的胶质瘤细胞糖酵解障碍中发挥重要作用 | 第64-73页 |
4.3.1 紫草素抑制了胶质瘤细胞的糖酵解 | 第64-66页 |
4.3.2 RIP1和RIP3调控了紫草素诱导的胶质瘤细胞糖酵解障碍 | 第66-69页 |
4.3.3 RIP1和RIP3调控了紫草素诱导的胶质瘤细胞HK II和PKM2蛋白水平的变化 | 第69-70页 |
4.3.4 RIP1和RIP3通过消耗GSH提高了H2O2的积聚水平 | 第70-73页 |
4.4 H2O2促进了紫草素诱导的胶质瘤细胞糖酵解障碍 | 第73-78页 |
4.4.1 紫草素诱导胶质瘤细胞中ROS的产生及H2O2的积聚 | 第73-76页 |
4.4.2 外源性H2O2在胶质瘤细胞糖酵解障碍中的作用 | 第76-78页 |
4.5 体内条件下紫草素对糖酵解的抑制 | 第78-80页 |
4.6 丙酮酸消耗促进了紫草素诱导的胶质瘤细胞H2O2积聚和死亡 | 第80-85页 |
第5章 讨论 | 第85-89页 |
第6章 结论 | 第89-91页 |
参考文献 | 第91-115页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第115-117页 |
致谢 | 第117页 |