| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-30页 |
| 1 卵母细胞体外成熟研究进展 | 第15-19页 |
| 1.1 原生殖细胞的来源 | 第15页 |
| 1.2 卵子的发生及发育成熟 | 第15-16页 |
| 1.3 卵母细胞的体外成熟 | 第16页 |
| 1.4 影响体外成熟的因素 | 第16-19页 |
| 1.4.1 卵母细胞的来源 | 第16-17页 |
| 1.4.2 体外培养条件 | 第17-18页 |
| 1.4.3 其他成分 | 第18-19页 |
| 2 卵泡细胞对卵母细胞成熟的影响 | 第19-20页 |
| 3 活性氧自由基对卵母细胞成熟影响 | 第20-23页 |
| 3.1 活性氧自由基与卵母细胞成熟 | 第20-21页 |
| 3.2 常氧环境与卵母细胞成熟 | 第21-22页 |
| 3.3 抗氧剂与卵母细胞成熟 | 第22-23页 |
| 4 NF-κB信号通路与卵母细胞成熟 | 第23-25页 |
| 5 线粒体与卵母细胞成熟 | 第25-27页 |
| 5.1 线粒体转录因子A(TFAM) | 第26-27页 |
| 5.2 线粒体转录因子UCP2简和PGC-1 α | 第27页 |
| 6 没食子酸的研究进展 | 第27-29页 |
| 7 研究目的和意义 | 第29-30页 |
| 第二部分 试验研究 | 第30-56页 |
| 第一章 没食子酸对黄牛卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育的影响 | 第31-40页 |
| 1 材料与方法 | 第32-35页 |
| 1.1 材料 | 第32-33页 |
| 1.1.1 组织材料 | 第32页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第32页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第32-33页 |
| 1.1.4 试剂的配制 | 第33页 |
| 1.2 试验方法 | 第33-35页 |
| 1.2.1 卵母细胞收集及成熟 | 第33-34页 |
| 1.2.2 卵母细胞体外受精及早期胚胎培养 | 第34页 |
| 1.2.3 囊胚Hoechst染色和Tunel染色 | 第34-35页 |
| 1.3 试验设计 | 第35页 |
| 1.4 数据分析 | 第35页 |
| 2 结果 | 第35-38页 |
| 2.1 不同浓度没食子酸对黄牛卵丘卵母细胞复合物体外成熟过程中卵丘细胞扩展的影响 | 第35-36页 |
| 2.2 不同浓度没食子酸对黄牛卵母细胞成熟过程中第一极体排出率的影响 | 第36-37页 |
| 2.3 黄牛卵母细胞体外成熟液中添加不同浓度的没食子酸对后续IVF胚胎发育的影响 | 第37页 |
| 2.4 黄牛卵母细胞成熟液中添加没食子酸对其后续IVF囊胚的细胞数及囊胚细胞凋亡率的影响 | 第37-38页 |
| 3 分析与讨论 | 第38-39页 |
| 4 小结 | 第39-40页 |
| 第二章 没食子酸对黄牛卵母细胞体外成熟作用机制的研究 | 第40-56页 |
| 1 材料与方法 | 第41-47页 |
| 1.1 材料 | 第41-43页 |
| 1.1.1 组织材料 | 第41页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第41页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第41页 |
| 1.1.4 试剂的配制 | 第41页 |
| 1.1.5 引物设计及合成 | 第41-43页 |
| 1.2 试验方法 | 第43-46页 |
| 1.2.1 卵母细胞收集及成熟 | 第43页 |
| 1.2.2 ROS染色 | 第43页 |
| 1.2.3 总谷胱甘肽含量测定 | 第43页 |
| 1.2.4 过氧化氢酶含量测定 | 第43-44页 |
| 1.2.5 卵丘细胞的收集及RNA提取 | 第44页 |
| 1.2.6 普通反转录 | 第44-45页 |
| 1.2.7 卵母细胞微量反转录 | 第45页 |
| 1.2.8 实时荧光定量PCR (Roche) | 第45页 |
| 1.2.9 卵母细胞免疫荧光 | 第45-46页 |
| 1.3 试验设计 | 第46-47页 |
| 1.4 数据分析 | 第47页 |
| 2 结果 | 第47-54页 |
| 2.1 成熟液中添加没食子酸对黄牛卵母细胞内活性氧水平影响 | 第47-48页 |
| 2.2 成熟液中添加没食子酸对黄牛卵母细胞内总谷胱甘肽含量影响 | 第48页 |
| 2.3 成熟液中添加没食子酸对黄牛卵母细胞内过氧化氢酶含量影响 | 第48-49页 |
| 2.4 成熟液中添加没食子酸对黄牛卵母细胞抗氧化基因表达的影响 | 第49页 |
| 2.5 成熟液中添加没食子酸对黄牛卵母细胞内NF-κ B信号通路的影响 | 第49-50页 |
| 2.6 成熟液中添加没食子酸对黄牛COCs复合体中卵丘细胞内的活性氧、总谷胱甘肽,及过氧化氢酶含量的影响 | 第50-51页 |
| 2.7 黄牛COCs复合体成熟过程中,没食子酸对卵丘细胞促凋亡基因(Bax、Bad)、抗凋亡基因(Bcl2)、增殖基因(spy1/spy2/spy3)及抗氧化基因(GPX4和SOD1) mRNA表达影响 | 第51-53页 |
| 2.8 成熟液中添加没食子酸对黄牛卵母细胞线粒体生物合成的影响 | 第53-54页 |
| 3 分析与讨论 | 第54-56页 |
| 4 小结 | 第56页 |
| 全文总结 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-70页 |
| 中英文缩略表 | 第70-71页 |
| 附图 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 攻读学位期间发表论文及专利 | 第74页 |
