| 摘要 | 第4-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 中英文缩略词对照表 | 第19-22页 |
| 前言 | 第22-26页 |
| 第一部分 HCV NS5B RNA聚合酶抑制性多肽虚拟筛选 | 第26-42页 |
| 1 前言 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-28页 |
| 2.1 仪器与设备 | 第27页 |
| 2.2 方法 | 第27-28页 |
| 3 结果 | 第28-33页 |
| 3.1 对接活性口袋 | 第28-29页 |
| 3.2 对接结果评价 | 第29-30页 |
| 3.3 HCV NS5B与多肽之间亲和力分析 | 第30-33页 |
| 4. 讨论 | 第33-36页 |
| 参考文献 | 第36-42页 |
| 第二部分 HCV NS5B RNA聚合酶的体外表达和纯化 | 第42-56页 |
| 1 前言 | 第42页 |
| 2 材料与方法 | 第42-48页 |
| 2.1 生物试剂和仪器 | 第42-43页 |
| 2.2 引物设计 | 第43页 |
| 2.3 目的片段的PCR扩增 | 第43-44页 |
| 2.4 HCV NS5B表达载体的构建 | 第44-47页 |
| 2.5 NS5B的诱导表达条件探索 | 第47页 |
| 2.6 NS5B表达形式的鉴定 | 第47页 |
| 2.7 表达蛋白镍柱纯化 | 第47-48页 |
| 2.8 表达产物的浓缩 | 第48页 |
| 3 结果 | 第48-52页 |
| 3.1 目的基因片段的扩增 | 第48页 |
| 3.2 重组质粒的酶切鉴定 | 第48-49页 |
| 3.2 表达条件的探索 | 第49-50页 |
| 3.3 表达蛋白的结果分析 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-56页 |
| 第三部分 HCV NS5B RNA聚合酶表达蛋白体外活性鉴定 | 第56-72页 |
| 1 前言 | 第56-57页 |
| 2 材料与方法 | 第57-61页 |
| 2.1 试剂 | 第57页 |
| 2.2 蛋白含量检测方法 | 第57页 |
| 2.3 Western-Blot检测 | 第57-58页 |
| 2.4 表达HCV NS5B蛋白与血清的检测 | 第58页 |
| 2.5 磁珠与poly(A)的偶联 | 第58页 |
| 2.6 HCV NS5B酶活性的检测 | 第58-60页 |
| 2.7 HCV NS5B表达蛋白Km值的测定 | 第60-61页 |
| 3 结果 | 第61-64页 |
| 3.1 Western-Blot结果 | 第61页 |
| 3.2 HCV NS5B表达蛋白与血清的结合 | 第61-62页 |
| 3.3 最佳底物浓度测定 | 第62-63页 |
| 3.4 最佳反应时间测定 | 第63-64页 |
| 3.5 Km值测定 | 第64页 |
| 4 讨论 | 第64-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 第四部分 HCV NS5B RNA聚合酶抑制多肽的筛选与鉴定 | 第72-84页 |
| 1 前言 | 第72页 |
| 2 材料与方法 | 第72-75页 |
| 2.1 试剂 | 第72-73页 |
| 2.2 多肽与HRP的偶联 | 第73页 |
| 2.3 表达HCV NS5B蛋白与多肽的ELISA检测 | 第73页 |
| 2.4 DMSO对HCV NS5B酶活性的影响 | 第73-74页 |
| 2.5 多肽对HCV NS5B酶活性抑制的检测 | 第74页 |
| 2.6 多肽对NS5B聚合酶的IC_(50)测定 | 第74-75页 |
| 3 结果 | 第75-77页 |
| 3.1 多肽与融合表达蛋白结合的ELISA结果 | 第75-76页 |
| 3.2 不同浓度DMSO对表达蛋白活性的影响 | 第76-77页 |
| 3.3 多肽对表达蛋白活性抑制的测定 | 第77页 |
| 3.4 抑制多肽的IC_(50)测定 | 第77页 |
| 4 讨论 | 第77-80页 |
| 参考文献 | 第80-84页 |
| 综述 丙型肝炎病毒及其治疗药物研究进展 | 第84-114页 |
| 1 丙型肝炎病毒概述 | 第84-88页 |
| 1.1 丙型肝炎病毒基因结构 | 第84-87页 |
| 1.2 HCV感染过程 | 第87-88页 |
| 2 HCV非结构蛋白5A的研究概况 | 第88-91页 |
| 2.1 HCV NS5A的基因结构 | 第88-89页 |
| 2.2 HCV NS5A的功能 | 第89-91页 |
| 3 HCV非结构蛋白5B的研究概况 | 第91-93页 |
| 4 抗丙型肝炎病毒药物的研究 | 第93-101页 |
| 4.1 常规疗法 | 第93-94页 |
| 4.2 直接抗病毒药物 | 第94-101页 |
| 5 结语 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-114页 |
| 附录基于核酸适配体的HCV核心抗原快速检测方法研究 | 第114-124页 |
| 1 前言 | 第114-115页 |
| 2 材料与方法 | 第115-117页 |
| 2.1 样品收集 | 第115页 |
| 2.2 试剂 | 第115页 |
| 2.3 金纳米颗粒的制备 | 第115-116页 |
| 2.4 纳米金颗粒适配体探针的制备 | 第116页 |
| 2.5 链霉素-生物素DNA探针复合物的制备 | 第116页 |
| 2.6 适配体试纸的组装 | 第116-117页 |
| 2.7 HCV核心抗原的检测 | 第117页 |
| 2.8 试纸条的灵敏度和特异性的测定 | 第117页 |
| 2.9 核酸适配体试纸的临床应用 | 第117页 |
| 3 结果 | 第117-119页 |
| 3.1 原理和结果的判定 | 第117-118页 |
| 3.2 最低检测限 | 第118页 |
| 3.3 灵敏度和特异性 | 第118-119页 |
| 3.4 临床样品检测 | 第119页 |
| 4 讨论 | 第119-121页 |
| 参考文献 | 第121-124页 |
| 个人简历、在校期间发表的学术论文与研究成果 | 第124-126页 |
| 致谢 | 第126页 |
