缩略语表 | 第6-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
前言 | 第14-16页 |
文献回顾 | 第16-32页 |
实验一 dprA突变株的构建 | 第32-72页 |
1 材料 | 第33-36页 |
1.1 菌株 | 第33页 |
1.2 质粒载体 | 第33-34页 |
1.3 主要试剂 | 第34-35页 |
1.4 常用缓冲液和培养基 | 第35-36页 |
1.5 主要仪器 | 第36页 |
2 方法 | 第36-51页 |
2.1 构建dprA缺失突变株 | 第36-43页 |
2.2 构建dprA突变对照株 | 第43-44页 |
2.3 构建生物发光突变株 | 第44-48页 |
2.4 构建dprA回补株 | 第48-51页 |
3 结果 | 第51-71页 |
3.1 完成dprA缺失突变株构建 | 第51-59页 |
3.2 完成dprA突变对照株构建 | 第59-65页 |
3.3 完成生物发光突变株构建 | 第65-69页 |
3.4 完成dprA回补株构建 | 第69-71页 |
4 讨论 | 第71-72页 |
实验二 DprA在肺炎链球菌生理和毒力中的功能验证 | 第72-90页 |
1 材料 | 第72-74页 |
1.1 菌株 | 第72页 |
1.2 主要试剂 | 第72-73页 |
1.3 细胞株 | 第73页 |
1.4 常用缓冲液和培养基 | 第73-74页 |
1.5 主要仪器 | 第74页 |
2 方法 | 第74-81页 |
2.1 绘制生长曲线 | 第74-75页 |
2.2 生物膜形成实验 | 第75页 |
2.3 细胞黏附实验 | 第75-76页 |
2.4 细胞侵袭实验 | 第76-77页 |
2.5 动物实验 | 第77-81页 |
2.6 统计学分析 | 第81页 |
3 结果 | 第81-88页 |
3.1 生长速率减慢 | 第81-82页 |
3.2 生物膜形成能力减弱 | 第82-83页 |
3.3 黏附上皮细胞能力下降 | 第83-84页 |
3.4 侵袭上皮细胞能力下降 | 第84-85页 |
3.5 动物体内的致病能力减弱 | 第85-88页 |
4 讨论 | 第88-90页 |
实验三 DprA参与肺炎链球菌毒力的机制研究 | 第90-98页 |
1 材料 | 第90-93页 |
1.1 菌株 | 第90页 |
1.2 主要试剂 | 第90-91页 |
1.3 常用缓冲液和培养基 | 第91-92页 |
1.4 主要仪器 | 第92-93页 |
2 方法 | 第93-94页 |
2.1 胆碱结合蛋白分析 | 第93页 |
2.2 MALDI-TOF-MS质谱分析 | 第93-94页 |
2.3 Western blot鉴定差异蛋白 | 第94页 |
3 结果 | 第94-97页 |
3.1 胆碱结合蛋白缺失 | 第94-95页 |
3.2 MALDI-TOF-MS质谱鉴定CbpA缺失 | 第95-96页 |
3.3 Western blot鉴定CbpA缺失 | 第96-97页 |
4 讨论 | 第97-98页 |
小结 | 第98-99页 |
参考文献 | 第99-112页 |
个人简历和研究成果 | 第112-113页 |
致谢 | 第113页 |