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拟南芥MUSE基因图位克隆及番茄MUSE相关生物信息学分析

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 文献综述第13-33页
    1.1 拟南芥的研究价值第13-21页
        1.1.1 拟南芥生物学特性第13-14页
        1.1.2 拟南芥作为模式植物的优势第14-15页
        1.1.3 拟南芥突变体的遗传筛选第15-16页
        1.1.4 拟南芥基因的图位克隆第16-19页
        1.1.5 研究拟南芥的意义第19-21页
    1.2 植物的免疫系统第21-27页
        1.2.1 PAMP 激活免疫第22-23页
        1.2.2 Effector 激活免疫第23-26页
        1.2.3 过敏性坏死反应和系统获得性抗性第26页
        1.2.4 线粒体与植物免疫系统第26-27页
    1.3 生物信息学分析第27-30页
        1.3.1 拟南芥和番茄基因组数据库第27-28页
        1.3.2 序列比对及系统发生分析第28页
        1.3.3 DNA 微阵列基因表达谱数据库第28-29页
        1.3.4 蛋白质的分析第29-30页
    1.4 本研究的背景、目的和意义第30-33页
第二章 MUSE5/TXR1/AtPAM16 的图位克隆及功能研究第33-50页
    2.1 试验材料第33页
    2.2 试验方法第33-37页
        2.2.1 muse 突变体遗传筛选第33页
        2.2.2 基因表达分析第33-34页
        2.2.3 病原菌感染试验第34页
        2.2.4 图位克隆及 Illumina 全基因组重测序第34页
        2.2.5 转基因互补试验第34-35页
        2.2.6 酵母互补试验第35页
        2.2.7 激光共聚焦显微照相第35页
        2.2.8 线粒体分离及蛋白酶 K 消化第35页
        2.2.9 冷冻固定及免疫金标记第35-36页
        2.2.10 Allelism 检测及突变体的构建第36页
        2.2.11 GUS 染色第36页
        2.2.12 DAB 染色第36页
        2.2.13 ROS 的测定第36-37页
    2.3 试验结果第37-47页
        2.3.1 三突变体 muse5-1 mos4 snc1 的抗病特性第37-38页
        2.3.2 muse5-1 的图位克隆第38-39页
        2.3.3 MUSE5 是 At3g59280 的验证第39-40页
        2.3.4 MUSE5 与酵母 PAM16 同源第40-42页
        2.3.5 MUSE5/AtPAM16 定位于线粒体内膜第42-45页
        2.3.6 单突变体 AtPam16 的免疫反应特性第45页
        2.3.7 AtPam16-1 和 AtPam16-2 可以增强 snc1 介导的免疫反应第45-47页
    2.4 讨论第47-50页
第三章 MUSE10 的图位克隆及初步功能研究第50-60页
    3.1 试验材料第50页
    3.2 试验方法第50-53页
        3.2.1 muse 突变体遗传筛选第50页
        3.2.2 拟南芥的种植第50-51页
        3.2.3 病原菌感染试验第51页
        3.2.4 DNA 提取、PCR 及琼脂糖凝胶电泳第51页
        3.2.5 GUS 染色第51页
        3.2.6 分子标记及引物设计第51-52页
        3.2.7 拟南芥转基因第52-53页
        3.2.8 突变体的构建第53页
    3.3 试验结果第53-59页
        3.3.1 三突变体 muse10-1 mos2 snc1 的抗病反应第53-54页
        3.3.2 MUSE10 的图位克隆及全基因重测序第54-56页
        3.3.3 Allelism test 验证 MUSE10第56-57页
        3.3.4 单突变体筛选及其抗病性检测第57-58页
        3.3.5 muse10-2 snc1 双突变体的构建及其抗病性鉴定第58页
        3.3.6 转基因 MUSE10-GFP 到 Col、muse10-2 和 snc1第58-59页
    3.4 讨论第59-60页
第四章 番茄及其他植物中 Pam18 和 Pam16 同源蛋白分析第60-74页
    4.1 材料与方法第60-62页
        4.1.1 植物中 Pam18 和 Pam16 同源蛋白的鉴定第60页
        4.1.2 多重序列比对和系统发生树第60页
        4.1.3 氨基酸组成和蛋白疏水性分析第60页
        4.1.4 跨膜结构域预测和功能位点分析第60-61页
        4.1.5 亚细胞定位预测第61页
        4.1.6 DNA 微距阵基因表达数据分析第61页
        4.1.7 植物材料及试验描述第61-62页
    4.2 试验结果第62-73页
        4.2.1 植物中 Pam18 和 Pam16 同源蛋白的筛选第62页
        4.2.2 植物中 Pam18 和 Pam16 的系统进化树第62-64页
        4.2.3 Pam18 和 Pam16 的氨基酸序列多重比对第64页
        4.2.4 氨基酸组成和功能位点分析第64-66页
        4.2.5 疏水性分析第66页
        4.2.6 跨膜结构域预测第66-67页
        4.2.7 亚细胞定位预测第67-70页
        4.2.8 AtPam18 和 AtPam16 基因表达分析第70-73页
    4.3 讨论第73-74页
第五章 番茄 PHD 锌指基因家族及蛋白分析第74-87页
    5.1 材料与方法第75-76页
        5.1.1 搜索编码 PHD 锌指蛋白的基因第75页
        5.1.2 基因注释和蛋白结构域组成第75页
        5.1.3 PHD 锌指结构域的多重序列比对第75页
        5.1.4 番茄 PHD 锌指蛋白家族的进化分析第75页
        5.1.5 番茄 PHD 锌指蛋白家族细胞核定位预测第75页
        5.1.6 植物材料及基因表达第75-76页
    5.2 试验结果第76-85页
        5.2.1 番茄中编码 PHD 锌指蛋白的基因及其染色体分布第76-78页
        5.2.2 番茄 PHD 锌指蛋白氨基酸序列多重比对第78-79页
        5.2.3 番茄 PHD 锌指蛋白保守结构域的组成第79-81页
        5.2.4 番茄 PHD 锌指基因的进化第81-82页
        5.2.5 番茄 PHD 锌指蛋白的细胞核定位预测第82页
        5.2.6 不同器官组织及不同发育时期 PHD 锌指基因的表达第82-83页
        5.2.7 不同胁迫下 PHD 锌指基因的表达第83-84页
        5.2.8 番茄 Micro-Tom PHD 锌指基因的表达第84-85页
    5.3 讨论第85-87页
第六章 结论第87-89页
参考文献第89-97页
附录第97-99页
致谢第99-100页
作者简介第100页

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