附件 | 第3-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一部分 利用蛋白质组学方法研究食物中能够进入淋巴液的蛋白质 | 第11-32页 |
前言 | 第12-14页 |
技术路线 | 第14-15页 |
材料与方法 | 第15-22页 |
1 实验材料 | 第15页 |
2 实验方法 | 第15-22页 |
2.1 大鼠肠道淋巴瘘管模型的建立 | 第15-16页 |
2.2 大鼠食用牛奶前后肠道淋巴液的收集 | 第16-17页 |
2.3 大鼠肠道淋巴液中低分子量蛋白/多肽的提取 | 第17-19页 |
2.4 大鼠肠道淋巴液蛋白质的SDS-PAGE分离和胶内酶切 | 第19-20页 |
2.5 大鼠肠道淋巴液低分子量蛋白/多肽的质谱鉴定 | 第20-21页 |
2.6 大鼠肠道淋巴液牛源蛋白的确定(种属特异性分析) | 第21页 |
2.7 使用PEAKS 6.0检索牛源性蛋白的翻译后修饰 | 第21-22页 |
第一章 大鼠肠道淋巴瘘管模型的建立及淋巴液的收集 | 第22-24页 |
1.1 引言 | 第22页 |
1.2 实验结果 | 第22-23页 |
1.2.1 大鼠肠道淋巴瘘管模型的建立 | 第22页 |
1.2.2 大鼠食用牛奶前后肠道淋巴液的收集 | 第22-23页 |
1.3 小结 | 第23-24页 |
第二章 大鼠肠道淋巴液中食物蛋白的鉴定及共同特征分析 | 第24-28页 |
2.1 引言 | 第24页 |
2.2 实验结果及讨论 | 第24-27页 |
2.2.1 大鼠食用牛奶前后肠道淋巴液的SDS-PAGE分析 | 第24页 |
2.2.2 大鼠肠道淋巴液中低分子量蛋白/多肽的富集 | 第24-25页 |
2.2.3 大鼠肠道淋巴液的质谱鉴定结果及分析 | 第25-27页 |
2.2.4 牛奶蛋白能够以多种形式存在于大鼠肠道淋巴液中 | 第27页 |
2.2.5 大鼠肠道淋巴液中牛源性蛋白主要是牛奶中的高丰度蛋白 | 第27页 |
2.2.6 大鼠肠道淋巴液中牛源性蛋白共同特征的分析 | 第27页 |
2.3 小结和展望 | 第27-28页 |
参考文献 | 第28-32页 |
第二部分 尿蛋白质组影响因素的研究 | 第32-60页 |
前言 | 第33-36页 |
材料与方法 | 第36-41页 |
1 实验材料 | 第36页 |
2 实验方法 | 第36-41页 |
2.1 大鼠尿液样本的收集 | 第36-37页 |
2.2 丙酮沉淀法提取尿液蛋白质 | 第37页 |
2.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第37-38页 |
2.4 尿液蛋白质的膜上酶切和除盐 | 第38-39页 |
2.5 尿液蛋白的质谱鉴定 | 第39页 |
2.6 数据库检索 | 第39-40页 |
2.7 非标记(label-free)定量蛋白质组学分析 | 第40-41页 |
第一章 三种常用利尿剂对尿蛋白质组的影响 | 第41-48页 |
1.1 引言 | 第41页 |
1.2 实验结果 | 第41-46页 |
1.2.1 大鼠用药前后尿量的变化 | 第41-42页 |
1.2.2 大鼠用药前后尿蛋白的SDS-PAGE分析 | 第42-43页 |
1.2.3 利尿剂给药前后大鼠尿蛋白质组的变化 | 第43-44页 |
1.2.4 三种利尿剂对尿蛋白质组的影响 | 第44-45页 |
1.2.5 利尿剂引起的大鼠差异尿蛋白的人源性蛋白分析 | 第45-46页 |
1.3 小结和讨论 | 第46-48页 |
第二章 衰老对尿蛋白质组的影响 | 第48-55页 |
2.1 引言 | 第48-49页 |
2.2 实验结果 | 第49-54页 |
2.2.1 青年和老年大鼠体重、尿量及尿肌酐和蛋白的变化 | 第49页 |
2.2.2 青年和老年大鼠尿蛋白SDS-PAGE分析 | 第49-50页 |
2.2.3 青年和老年大鼠质谱结果分析 | 第50-52页 |
2.2.4 青老年大鼠尿液差异蛋白的人同源蛋白分析 | 第52-53页 |
2.2.5 衰老差异蛋白的组织定位分析 | 第53-54页 |
2.3 小节和讨论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
第三部分 肾透明细胞癌患者手术前后的尿蛋白质组学研究 | 第60-77页 |
前言 | 第61-65页 |
材料与方法 | 第65-67页 |
1 实验材料 | 第65页 |
2 实验方法 | 第65-67页 |
2.1 肾癌患者尿液样品的收集 | 第65页 |
2.2 丙酮沉淀法提取尿液蛋白质 | 第65页 |
2.3 尿液蛋白质硝酸纤维膜上的保存和洗脱 | 第65-66页 |
2.4 尿液蛋白质的SDS-PAGE分析 | 第66页 |
2.5 尿液蛋白质的膜上酶切与质谱鉴定 | 第66页 |
2.6 尿液蛋白质组的非标记定量分析 | 第66-67页 |
实验结果及讨论 | 第67-71页 |
1 入选样本临床资料总结 | 第67页 |
2 肾透明细胞癌患者手术前后尿液蛋白质SDS-PAGE分析 | 第67-68页 |
3 尿液质谱鉴定结果及重复性分析 | 第68页 |
4 肾透明细胞癌患者手术前后尿液样本间的差异蛋白质分析 | 第68-71页 |
小结 | 第71页 |
展望 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-77页 |
文献综述 | 第77-92页 |
参考文献 | 第85-92页 |
附录 | 第92-103页 |
个人简历 | 第103-104页 |
在读期间学术成果 | 第104-105页 |
致谢 | 第105-106页 |
附件 | 第106-121页 |