摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7页 |
第一章 研究背景及文献综述 | 第11-24页 |
第一节 转录因子TFEB综述 | 第11-19页 |
一、MiTF/TFE家族 | 第11-12页 |
二、TFEB的结构及调控机制 | 第12-15页 |
1. TFEB的结构 | 第12-13页 |
2. 调控TFEB的相关机制 | 第13-15页 |
三、TFEB的生物学功能 | 第15-19页 |
第二节 细胞因子及其经典调控通路 | 第19-24页 |
一、细胞因子的分类及功能 | 第19-21页 |
1. 细胞因子的分类 | 第19页 |
2. 细胞因子的功能 | 第19-21页 |
二、细胞因子的表达调控 | 第21-24页 |
1. 通过TLRs激活依赖于MyD88的NF-κB和MAPK信号通路 | 第21-22页 |
2. TNF激活NF-κB和MAPK信号通路 | 第22-24页 |
第二章 实验材料与实验方法 | 第24-51页 |
第一节 实验材料与试剂 | 第24-35页 |
一、实验材料 | 第24-25页 |
1. 细胞系 | 第24页 |
2. 质粒 | 第24页 |
3. 引物 | 第24-25页 |
4. siRNA | 第25页 |
二、实验试剂 | 第25-34页 |
主要试剂及抗体 | 第25-26页 |
试剂的配制 | 第26-34页 |
三、实验仪器 | 第34-35页 |
第二节 实验方法 | 第35-51页 |
一、质粒的构建 | 第35-39页 |
二、细胞培养 | 第39-40页 |
三、细胞转染 | 第40-41页 |
四、RT-PCR检测基因mRNA的水平 | 第41-45页 |
五、蛋白质免疫印迹Western Blot检测蛋白 | 第45-46页 |
六、免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CoIP) | 第46-48页 |
七、体内泛素化(Ni-NTA法) | 第48-49页 |
八、Luciferase(荧光素酶)报告基因 | 第49页 |
九、免疫荧光技术 | 第49-51页 |
第三章 实验结果 | 第51-63页 |
第一节 TFEB能够影响NF-κB-luciferase的活性 | 第51-52页 |
第二节 TFEB能够与TRAF6相互作用并影响其泛素化 | 第52-54页 |
第三节 TFEB能够影响细胞因子表达 | 第54-57页 |
第四节 LPS、TNFα、IL-1β能够抑制细胞TFEB的表达 | 第57-59页 |
第五节 TFEB调控细胞因子表达的机制探究 | 第59-63页 |
第四章 实验结果分析与讨论 | 第63-66页 |
附录 | 第66-68页 |
表一 胞因子的分类 | 第66-67页 |
表二 略词表 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-72页 |
致谢 | 第72页 |