摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
INDEX | 第6-9页 |
1 INTRODUCTION | 第9-30页 |
1.1 Breast cancer | 第9-11页 |
1.2 Cell migration | 第11-18页 |
1.3 GABABreceptor | 第18-19页 |
1.4 Molecular structure of GABABreceptor | 第19-21页 |
1.5 GABABreceptor subtypes | 第21-24页 |
1.6 GABABreceptor distribution | 第24-25页 |
1.7 The pharmacology of GABABreceptor | 第25-26页 |
1.8 GABABreceptor in cancer cells and downstream signaling events | 第26-27页 |
1.9 PI3K/Akt pathway in the treatment of breast cancer | 第27-29页 |
1.10 Objectives | 第29-30页 |
2 PRINCIPLES | 第30-38页 |
2.1 Cell culture | 第30-31页 |
2.2 The MTT assay: cell viability | 第31页 |
2.3 SDS-PAGE | 第31-32页 |
2.4 Immunoblotting | 第32-35页 |
2.5 Wound healing assay | 第35页 |
2.6 Transwell –migration assay | 第35-36页 |
2.7 Transwell-invasion assay | 第36页 |
2.8 RT-PCR | 第36-38页 |
3 MATERIALS AND METHODS | 第38-48页 |
3.1 Reagents, antibodies and others | 第38页 |
3.2 Apparatus | 第38-39页 |
3.3 Cells and cell line | 第39页 |
3.4 Drug Preparation | 第39-40页 |
3.5 Treatment with GABABreceptor agonist and/or allosteric modulator | 第40页 |
3.6 Wound healing assay | 第40-41页 |
3.7 Transwell-migration assay | 第41-42页 |
3.8 Transwell-invasion assay | 第42页 |
3.9 MTT assay | 第42-43页 |
3.10 SDS-PAGE | 第43-44页 |
3.11 Membrane transfer | 第44页 |
3.12 Immunoblotting | 第44-45页 |
3.13 RT-PCR | 第45-48页 |
4 RESULTS | 第48-58页 |
4.1 Activation of GABABreceptor did not affect the viability of the cells | 第48页 |
4.2 Activation of GABABreceptor activated Akt and ERK1/2 | 第48-50页 |
4.3 The effects of GABABreceptor activation on the expression levels of EMT markers | 第50-52页 |
4.4 GABABreceptor activation suppressed cell motility | 第52-53页 |
4.5 GABABreceptor activation inhibited cell migration | 第53-55页 |
4.6 GABABreceptor activation inhibited cell invasion | 第55-57页 |
4.7 The effects of GABABreceptor activation on the expression of transcription factors of E-Cadherin | 第57-58页 |
5 DISCUSSION AND PERSPECTIVES | 第58-60页 |
6 ACKNOWLEDGEMENT | 第60-62页 |
7 REFERENCES | 第62-71页 |
8 ABBREVIATIONS | 第71-72页 |