| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩写词表 | 第11-13页 |
| 1 综述 | 第13-28页 |
| 1.1 男性生殖健康 | 第13-19页 |
| 1.1.1 男性不育症发展现状 | 第13-14页 |
| 1.1.2 精液中活性氧的来源 | 第14-15页 |
| 1.1.3 氧化应激对生殖的影响 | 第15-16页 |
| 1.1.4 超低温保存对生殖的影响 | 第16-19页 |
| 1.2 自噬的基本特征 | 第19-26页 |
| 1.2.1 自噬的生理功能 | 第23-24页 |
| 1.2.2 自噬的调节机制 | 第24-25页 |
| 1.2.3 自噬与活性氧的关系 | 第25-26页 |
| 1.3 研究内容和创新点 | 第26-28页 |
| 1.3.1 研究内容 | 第26-27页 |
| 1.3.2 研究创新点 | 第27-28页 |
| 2 实验材料 | 第28-35页 |
| 2.1 样本收集 | 第28页 |
| 2.2 实验仪器 | 第28-29页 |
| 2.3 实验试剂 | 第29页 |
| 2.4 溶液配制 | 第29-35页 |
| 3 实验方法 | 第35-46页 |
| 3.1 精液常规检测 | 第35页 |
| 3.2 制作精子涂片 | 第35-39页 |
| 3.2.1 处理载玻片 | 第35-36页 |
| 3.2.2 涂片方法 | 第36页 |
| 3.2.3 非连续密度梯度法制备正常精子悬液 | 第36-37页 |
| 3.2.4 外源性过氧化氢处理精子标本 | 第37页 |
| 3.2.5 超低温保存精子标本 | 第37-38页 |
| 3.2.6 检测精子活性氧 | 第38页 |
| 3.2.7 精子线粒体膜电位的检测 | 第38-39页 |
| 3.3 WesternBlot | 第39-43页 |
| 3.3.1 收集蛋白样品 | 第39-40页 |
| 3.3.2 蛋白浓度的测定 | 第40页 |
| 3.3.3 SDS-PAGE电泳 | 第40-41页 |
| 3.3.4 转膜 | 第41-42页 |
| 3.3.5 封闭 | 第42页 |
| 3.3.6 一抗孵育 | 第42页 |
| 3.3.7 二抗孵育 | 第42-43页 |
| 3.3.8 显影 | 第43页 |
| 3.3.9 蛋白检测 | 第43页 |
| 3.4 免疫荧光染色 | 第43-44页 |
| 3.5 免疫荧光共定位 | 第44-45页 |
| 3.5.1 精子线粒体定位 | 第44页 |
| 3.5.2 免疫荧光染色 | 第44页 |
| 3.5.3 免疫荧光染色图像采集 | 第44-45页 |
| 3.6 数据分析 | 第45-46页 |
| 4 实验结果 | 第46-60页 |
| 4.1 精液常规检测结果 | 第46页 |
| 4.2 洗涤方式对人类精子活力的影响 | 第46-47页 |
| 4.3 外源性过氧化氢对人类精子活力的影响 | 第47页 |
| 4.4 超低温保存对人类精子活力的影响 | 第47-48页 |
| 4.5 外源性过氧化氢对人类精子内活性氧水平的影响 | 第48-49页 |
| 4.6 超低温保存对人类精子内活性氧水平的影响 | 第49-50页 |
| 4.7 外源性过氧化氢对人类精子线粒体膜电位的影响 | 第50-51页 |
| 4.8 超低温保存对人类精子线粒体膜电位的影响 | 第51-52页 |
| 4.9 人类精子中LC3-II/LC3-I的变化 | 第52-53页 |
| 4.10 外源性过氧化氢对人类精子中LC3表达的影响 | 第53-54页 |
| 4.11 超低温保存对人类精子中LC3表达的影响 | 第54-55页 |
| 4.12 外源性过氧化氢对人类精子中p62表达的影响 | 第55-56页 |
| 4.13 超低温保存对人类精子中p62表达的影响 | 第56-57页 |
| 4.14 人类精子线粒体自噬 | 第57-60页 |
| 5 实验结论 | 第60-61页 |
| 6 讨论与展望 | 第61-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 附录Ι攻读学位期间发表的论文目录 | 第72-73页 |
