| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-47页 |
| 1.1 核酸扩增技术 | 第13-33页 |
| 1.1.1 核酸扩增技术的发展历程 | 第13-15页 |
| 1.1.2 常见变温核酸扩增技术的原理与应用 | 第15-21页 |
| 1.1.3 常见等温核酸扩增技术的原理与应用 | 第21-32页 |
| 1.1.4 常见变温和等温核酸扩增技术的对比 | 第32-33页 |
| 1.2 手足口病及其病原 EV71 和 CVA16 | 第33-38页 |
| 1.2.1 手足口病简述 | 第33-35页 |
| 1.2.2 手足口病病原 EV71 和 CVA16 | 第35-37页 |
| 1.2.3 手足口病病原的实验室检测 | 第37-38页 |
| 1.3 人感染 H7N9 禽流感及其病原 H7N9 | 第38-41页 |
| 1.3.1 人感染 H7N9 禽流感简述 | 第38-39页 |
| 1.3.2 人甲型流感 H7N9 病毒 | 第39-40页 |
| 1.3.3 人感染 H7N9 禽流感病原的实验室检测 | 第40-41页 |
| 1.4 艾滋病及其病原 HIV-1 病毒 | 第41-44页 |
| 1.4.1 艾滋病简述 | 第41-42页 |
| 1.4.2 艾滋病病原 HIV-1 病毒 | 第42-44页 |
| 1.4.3 艾滋病病原 HIV-1 病毒的实验室检测 | 第44页 |
| 1.5 本研究的意义及内容 | 第44-47页 |
| 1.5.1 本研究的意义 | 第44-45页 |
| 1.5.2 本研究的内容 | 第45-47页 |
| 第二章 新型等温多自配引发扩增 | 第47-57页 |
| 2.1 IMSA 引物设计 | 第47-48页 |
| 2.2 IMSA 体系与原理 | 第48-54页 |
| 2.3 IMSA 产物检测 | 第54-55页 |
| 2.4 IMSA 与 LAMP 二者的对比 | 第55-56页 |
| 2.5 本章小结 | 第56-57页 |
| 第三章 基于 IMSA 技术建立对手足口病病原 EV71 和 CVA16 的快速检测 | 第57-82页 |
| 3.1 实验材料与仪器耗材 | 第58-59页 |
| 3.1.1 病毒标准品及临床样本 | 第58页 |
| 3.1.2 主要试剂与常用溶液 | 第58-59页 |
| 3.1.3 实验仪器与耗材 | 第59页 |
| 3.2 IMSA 引物设计 | 第59-61页 |
| 3.3 实验方法 | 第61-67页 |
| 3.3.1 核酸提取 | 第61页 |
| 3.3.2 VP1 基因的 cDNA 的制备 | 第61-62页 |
| 3.3.3 VP1 基因的体外转录 RNA 的制备 | 第62-63页 |
| 3.3.4 IMSA 反应条件优化及对 EV71 和 CVA16 的检测特异性 | 第63-65页 |
| 3.3.5 IMSA 定量检测 EV71 和 CVA16 及其与 LAMP 法比较 | 第65页 |
| 3.3.6 IMSA 对 EV71 和 CVA16 的最低检测线及其与 LAMP 法比较 | 第65页 |
| 3.3.7 IMSA 引物组合对扩增效果的影响（以 CVA16 检测为例） | 第65-66页 |
| 3.3.8 IMSA 四种基本结构（SMS-1 至 SMS-4）的验证 | 第66页 |
| 3.3.9 IMSA 对手足口病临床样本的检测及其与 LAMP 法比较 | 第66-67页 |
| 3.4 实验结果和讨论 | 第67-80页 |
| 3.4.1 IMSA 实时浊度法和颜色判定法最优化反应条件 | 第67-69页 |
| 3.4.2 IMSA 颜色判定法的建立 | 第69-71页 |
| 3.4.3 IMSA 对 EV71 和 CVA16 的检测特异性 | 第71-72页 |
| 3.4.4 IMSA 对 EV71 和 CVA16 的定量检测 | 第72-74页 |
| 3.4.5 IMSA 对 EV71 和 CVA16 的最低检测线 | 第74-76页 |
| 3.4.6 IMSA 引物组合对扩增的影响（以 CVA16 检测为例） | 第76页 |
| 3.4.7 IMSA 四种基本结构（SMS-1 至 SMS-4）的验证 | 第76-79页 |
| 3.4.8 IMSA 对手足口病临床样本的检测 | 第79-80页 |
| 3.5 本章小结 | 第80-82页 |
| 第四章 基于 IMSA 技术建立对人感染 H7N9 禽流感病原 H7N9 的快速检测 | 第82-92页 |
| 4.1 实验材料与仪器耗材 | 第82-83页 |
| 4.1.1 病毒标准品及临床样本 | 第82页 |
| 4.1.2 主要试剂与常用溶液 | 第82-83页 |
| 4.1.3 实验仪器与耗材 | 第83页 |
| 4.2 IMSA 引物设计 | 第83-84页 |
| 4.3 实验方法 | 第84-85页 |
| 4.3.1 核酸提取 | 第84页 |
| 4.3.2 IMSA 实时浊度法和颜色判定法检测 H7 和 N9 基因的反应条件 | 第84页 |
| 4.3.3 IMSA 对 H7 和 N9 基因的检测特异性 | 第84页 |
| 4.3.4 IMSA 实时浊度法检测 H7 和 N9 基因的灵敏度 | 第84-85页 |
| 4.3.5 IMSA 颜色判定法显色灵敏度试验 | 第85页 |
| 4.3.6 IMSA 对临检中心盲测样本、临床和环境 H7N9 相关样本的检测 | 第85页 |
| 4.4 实验结果和讨论 | 第85-91页 |
| 4.4.1 IMSA 对 H7 和 N9 基因的检测特异性 | 第85-86页 |
| 4.4.2 IMSA 实时浊度法检测 H7 和 N9 基因的灵敏度 | 第86-88页 |
| 4.4.3 IMSA 颜色判定法检测 H7 和 N9 基因的显色灵敏度 | 第88-89页 |
| 4.4.4 IMSA 对盲测样本、临床和环境 H7N9 相关样本的检测结果 | 第89-91页 |
| 4.5 本章小结 | 第91-92页 |
| 第五章 基于 IMSA 技术建立对艾滋病病原 HIV-1 的快速检测 | 第92-100页 |
| 5.1 实验材料与仪器耗材 | 第92-93页 |
| 5.1.1 病毒标准品及临床样本 | 第92-93页 |
| 5.1.2 主要试剂与常用溶液 | 第93页 |
| 5.1.3 实验仪器与耗材 | 第93页 |
| 5.2 IMSA 引物设计 | 第93-94页 |
| 5.3 实验方法 | 第94-96页 |
| 5.3.1 核酸提取 | 第94页 |
| 5.3.2 HIV-1gag 基因的 cDNA 的制备 | 第94-95页 |
| 5.3.3 HIV-1gag 基因的体外转录 RNA 的制备 | 第95页 |
| 5.3.4 IMSA 实时浊度法和颜色判定法检测 HIV-1gag 基因的反应条件 | 第95页 |
| 5.3.5 IMSA 对 HIV-1 gag 基因的检测特异性 | 第95页 |
| 5.3.6 IMSA 实时浊度法检测 HIV-1 gag 基因的灵敏度 | 第95-96页 |
| 5.3.7 IMSA 颜色判定法显色灵敏度试验 | 第96页 |
| 5.3.8 IMSA 对 HIV-1 阳性临床样本的检测 | 第96页 |
| 5.4 实验结果和讨论 | 第96-99页 |
| 5.4.1 IMSA 对 HIV-1 gag 基因的检测特异性 | 第96-97页 |
| 5.4.2 IMSA 实时浊度法检测 HIV-1 gag 基因的灵敏度 | 第97-98页 |
| 5.4.3 IMSA 颜色判定法检测 HIV-1 gag 基因的显色灵敏度 | 第98-99页 |
| 5.4.4 IMSA 对艾滋病临床样本的检测 | 第99页 |
| 5.5 本章小结 | 第99-100页 |
| 结论与展望 | 第100-103页 |
| 参考文献 | 第103-112页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第112-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
| 附件 | 第115页 |
