摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
图和附表清单 | 第11-12页 |
英文缩略词对照表 | 第12-13页 |
1 引言 | 第13-15页 |
2 材料和方法 | 第15-38页 |
2.1 标本来源 | 第15页 |
2.2 新布尼亚病毒河南分离株的分子特征 | 第15-19页 |
2.2.1 细胞培养材料 | 第15-16页 |
2.2.2 核酸提取及病毒扩增全序材料 | 第16页 |
2.2.3 凝胶电泳及产物纯化材料 | 第16页 |
2.2.4 生物信息学分析软件 | 第16页 |
2.2.5 实验所需耗材 | 第16-17页 |
2.2.6 实验所需主要仪器设备 | 第17页 |
2.2.7 引物设计合成 | 第17-19页 |
2.3 新布尼亚病毒相关蛋白的表达 | 第19-23页 |
2.3.1 主要生化试剂 | 第19-20页 |
2.3.4 质粒和毒株 | 第20-21页 |
2.3.5 培养基及常用试剂的配置 | 第21-22页 |
2.3.6 蛋白纯化用试剂 | 第22页 |
2.3.7 western blotting 及 ELISA 试剂 | 第22页 |
2.3.8 引物设计和合成 | 第22-23页 |
2.4 实验方法 | 第23-38页 |
2.4.1 技术路线 | 第23页 |
2.4.2 新布尼亚病毒河南分离株的分子特征分析 | 第23-29页 |
2.4.3 新布尼亚病毒相关蛋白的表达 | 第29-36页 |
2.4.4 统计学方法 | 第36页 |
2.4.5 质量控制 | 第36-38页 |
3 结果 | 第38-52页 |
3.1 新布尼亚病毒的培养及鉴定结果 | 第38-40页 |
3.1.1 致细胞病变效应 | 第38页 |
3.1.2 qRT-PCR 扩增结果 | 第38-40页 |
3.2 全基因组 RT-PCR 扩增及测序结果 | 第40页 |
3.3 新布尼亚病毒系统进化分析 | 第40-44页 |
3.4 新布尼亚病毒河南分离株同源性分析及保守序列的筛选 | 第44-46页 |
3.5 新布尼亚病毒保守序列的 PCR 扩增结果 | 第46-47页 |
3.6 重组克隆载体 pMD18-T-NP 的鉴定与序列分析 | 第47页 |
3.7 重组表达载体 pMAL-c2x-NP 的鉴定 | 第47-48页 |
3.8 重组蛋白的诱导表达结果 | 第48页 |
3.9 重组蛋白可溶性分析结果 | 第48-49页 |
3.10 重组蛋白纯化结果 | 第49-50页 |
3.11 纯化蛋白的 western blot 分析 | 第50页 |
3.12 建立 ELISA 方法初步检测临床样本 | 第50-52页 |
4 讨论 | 第52-56页 |
4.1 新布尼亚病毒河南分离株的分子分型分析 | 第52-53页 |
4.2 新布尼亚病毒序列同源性比较与保守序列的筛选 | 第53页 |
4.3 保守序列编码相应蛋白的表达 | 第53-56页 |
5 创新和不足 | 第56-57页 |
6 结论 | 第57-58页 |
7 参考文献 | 第58-62页 |
综述 | 第62-71页 |
参考文献 | 第67-71页 |
附表:本研究所获得的新布尼亚病毒河南分离株基因登录号 | 第71-72页 |
个人简历及在校期间发表的学术论文与研究成果 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |