| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-24页 |
| 1.1 IBDV的分类、地位及理化特性 | 第11页 |
| 1.2 IBDV形态结构 | 第11-12页 |
| 1.3 IBDV基因组结构 | 第12页 |
| 1.4 IBDV编码蛋白及其功能 | 第12-16页 |
| 1.4.1 VP1蛋白 | 第12-13页 |
| 1.4.2 VP2蛋白 | 第13-15页 |
| 1.4.3 VP3蛋白 | 第15页 |
| 1.4.4 VP4蛋白 | 第15页 |
| 1.4.5 VP5蛋白 | 第15-16页 |
| 1.5 IBDV致病机理及抗原结构变异 | 第16-17页 |
| 1.6 IBDV诊断技术进展 | 第17-19页 |
| 1.6.1 IBD临床诊断 | 第17页 |
| 1.6.2 实验室诊断 | 第17-19页 |
| 1.7 IBDV疫苗研究进展 | 第19-21页 |
| 1.7.1 传统IBDV疫苗 | 第19-20页 |
| 1.7.2 基因工程苗 | 第20-21页 |
| 1.8 IBDVVP2蛋白在不同表达系统的表达 | 第21-22页 |
| 1.9 存在问题 | 第22-23页 |
| 1.10 研究目的与意义 | 第23-24页 |
| 第二章 IBDVNB株VP2S-P基因在SUMO系统中的表达 | 第24-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-29页 |
| 2.1.1 菌种和质粒 | 第24页 |
| 2.1.2 抗体 | 第24页 |
| 2.1.3 酶类及其它相关试剂 | 第24-26页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.1.5 主要试剂配制 | 第27页 |
| 2.1.6 蛋白凝胶电泳及Westernblotting缓冲液 | 第27-29页 |
| 2.2 方法 | 第29-41页 |
| 2.2.1 IBDVVP2S-P基因的扩增 | 第29-31页 |
| 2.2.2 IBDVNB株VP2S-P基因重组克隆质粒的构建 | 第31-34页 |
| 2.2.3 pET-28a-SUMO-VP2S-P重组表达载体构建 | 第34-37页 |
| 2.2.4 重组阳性表达质粒转化BL21 | 第37页 |
| 2.2.5 重组表达菌株的诱导表达 | 第37-39页 |
| 2.2.6 诱导表达产物可溶性分析及诱导条件的优化 | 第39页 |
| 2.2.7 目的蛋白的纯化 | 第39-40页 |
| 2.2.8 VP2S-P蛋白的获得及鉴定 | 第40-41页 |
| 2.3 结果 | 第41-54页 |
| 2.3.1 IBDVVP2S-P基因片段的PCR扩增 | 第41页 |
| 2.3.2 IBDVNB株VP2S-P基因克隆载体的构建及鉴定 | 第41-43页 |
| 2.3.3 重组表达质粒的构建及鉴定 | 第43-45页 |
| 2.3.4 重组菌菌液鉴定 | 第45页 |
| 2.3.5 表达产物的分析及鉴定 | 第45-48页 |
| 2.3.6 表达产物的可溶性分析及条件优化 | 第48-50页 |
| 2.3.7 重组融合目的蛋白的纯化 | 第50-51页 |
| 2.3.8 重组融合蛋白的酶切及鉴定 | 第51-53页 |
| 2.3.9 重组蛋白及重组融合蛋白的特异性检测 | 第53-54页 |
| 第三章 讨论 | 第54-60页 |
| 3.1 VP2抗原集中区的选择 | 第54-55页 |
| 3.2 SUMO表达系统 | 第55页 |
| 3.3 影响外源基因在SUMO系统中可溶性表达的几个因素 | 第55-58页 |
| 3.4 融合重组蛋白SUMO-VP2S-P的纯化及酶切 | 第58-60页 |
| 第四章 结论与展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-72页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
