部分缩略词表 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
第一章 位点特异性重组系统的机理及应用研究综述 | 第13-55页 |
引言 | 第13页 |
1 前言 | 第13-14页 |
2 位点特异性重组系统的来源和分类 | 第14-16页 |
3 位点特异性重组系统的反应机理研究 | 第16-27页 |
·识别位点的结构与构象 | 第17-19页 |
·重组反应的分子机理 | 第19-23页 |
·重组酶的结构域与杂合酶改造 | 第23-27页 |
4 位点特异性重组系统的应用 | 第27-38页 |
·位点特异性重组酶做为工具酶的体外应用 | 第27-28页 |
·位点特异性重组酶在体内遗传操作中的应用 | 第28-34页 |
·多重重组及多种重组酶的联合应用 | 第34-36页 |
·位点特异性重组系统体内应用存在的一些问题 | 第36-38页 |
5 结语和展望 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-55页 |
第二章 噬菌体φBT1整合酶介导体外位点特异性重组系统的建立 | 第55-89页 |
1 前言 | 第55-57页 |
2 材料和方法 | 第57-74页 |
·实验材料 | 第57-64页 |
·实验方法 | 第64-74页 |
3 实验结果 | 第74-82页 |
·φBT1整合酶的表达与纯化 | 第74-75页 |
·φBT1整合酶高效介导体外位点特异性重组 | 第75-76页 |
·重组反应的优化条件 | 第76-79页 |
·重组反应的方向性控制 | 第79-80页 |
·反应所需的最小位点 | 第80-82页 |
4 小结与讨论 | 第82-84页 |
参考文献 | 第84-89页 |
第三章 φBT1整合酶催化位点特异性重组的生化机理 | 第89-129页 |
1 前言 | 第89-90页 |
2 材料和方法 | 第90-109页 |
·实验材料 | 第90-98页 |
·实验方法 | 第98-109页 |
3 实验结果 | 第109-122页 |
·DNA切割起始独立于联会复合体的形成 | 第109-112页 |
·φBT1整合酶可催化单底物拓扑结构之改变 | 第112-114页 |
·含有不同核心之底物之间的重组受到抑制 | 第114-116页 |
·相同突变核心的底物参与反应效率与野生型相当 | 第116-117页 |
·核心突变会导致底物反向平行配对并发生重组 | 第117-119页 |
·整合酶四聚体可与attP先形成整合体随后捕获attB | 第119-122页 |
4 小结与讨论 | 第122-124页 |
参考文献 | 第124-129页 |
第四章 埃博霉素生物合成及异源表达研究综述 | 第129-151页 |
1 前言 | 第129-130页 |
2 埃博霉素的发现及基本特性 | 第130-135页 |
·埃博霉素的发现与应用 | 第130-132页 |
·埃博霉素的发酵分离及基本物理化学性质 | 第132-135页 |
3 埃博霉素的生物合成 | 第135-138页 |
4 埃博霉素的异源表达与遗传改造 | 第138-141页 |
5 埃博霉素的临床研究 | 第141-142页 |
致谢 | 第142页 |
参考文献 | 第142-151页 |
第五章 埃博霉素生物合成基因簇的串联重组拼装 | 第151-187页 |
1 前言 | 第151-153页 |
2 材料和方法 | 第153-172页 |
·实验材料 | 第153-161页 |
·实验方法 | 第161-172页 |
3 实验结果 | 第172-180页 |
·"入门载体"的设计和构建 | 第172-174页 |
·"入门克隆"的构建 | 第174页 |
·epoD的串联重组拼装 | 第174-177页 |
·全长epothilones生物合成基因簇的拼装 | 第177-180页 |
4 小结与讨论 | 第180-183页 |
参考文献 | 第183-187页 |
全文总结与展望 | 第187-191页 |
学术论文、会议摘要及专利申请 | 第191-193页 |
致谢 | 第193-195页 |