摘要 | 第4-10页 |
Abstract | 第10-17页 |
英文缩略语 | 第18-24页 |
第一部分:软骨细胞中的TRPV5在大鼠骨性关节炎病程中表达水平变化的实验研究 | 第24-41页 |
1 前言 | 第24-25页 |
2.材料与方法 | 第25-32页 |
2.1 主要仪器和设备 | 第25-26页 |
2.2 主要实验耗材 | 第26页 |
2.3 主要实验试剂 | 第26-27页 |
2.4 主要试剂配置 | 第27-28页 |
2.5 实验方法及步骤 | 第28-32页 |
3 结果 | 第32-38页 |
3.1 X-ray影像学观察与评分 | 第32-34页 |
3.2 各组膝关节大体解剖观察与各组软骨组织学观察 | 第34-36页 |
3.3 不同组膝关节软骨组织中TRPV5mRNA表达水平的检测 | 第36-37页 |
3.4 不同组膝关节软骨组织中TRPV5蛋白表达水平检测 | 第37-38页 |
4 讨论 | 第38-40页 |
5 结论 | 第40-41页 |
第二部分:TRPV5通过介导细胞外钙离子内流抑制软骨细胞自噬的机制研究 | 第41-64页 |
1 前言 | 第41-42页 |
2 材料与方法 | 第42-50页 |
2.1 主要仪器和设备 | 第42-43页 |
2.2 主要实验耗材 | 第43页 |
2.3 主要实验试剂 | 第43-45页 |
2.4 主要试剂配置 | 第45-46页 |
2.5 实验方法及步骤 | 第46-50页 |
3 结果 | 第50-60页 |
3.1 免疫组织化学染色显示LC3B随着膝关节骨性关节炎进展表达逐渐减弱 | 第50-51页 |
3.2 大鼠膝关节软骨中TRPV5、calmodulin、LC3的蛋白表达水平检测 | 第51-53页 |
3.3 大鼠膝关节软骨细胞形态学观察及免疫组织化学染色鉴定 | 第53页 |
3.4 TRPV5-siRNA转染大鼠关节软骨细胞干扰效率检测 | 第53-55页 |
3.5 免疫荧光法检测MIA刺激原代软骨细胞后calmodulin、LC3B的表达水平 | 第55-56页 |
3.6 检测各组细胞内钙离子反映TRPV5的钙离子通道的功能性 | 第56-58页 |
3.7 软骨细胞中TRPV5、calmodulin、CAMKⅡ、p-CAMKⅡ、Beclin1、p-Beclin1、LC3和Bcl-2的蛋白表达水平检测 | 第58-60页 |
4 讨论 | 第60-63页 |
5 结论 | 第63-64页 |
第三部分:TRPV5通过介导细胞外钙离子内流诱导外源性软骨细胞凋亡的机制研究 | 第64-84页 |
1 前言 | 第64-65页 |
2 材料与方法 | 第65-71页 |
2.1 主要仪器和设备 | 第65-66页 |
2.2 主要实验耗材 | 第66页 |
2.3 主要实验试剂 | 第66-68页 |
2.4 主要试剂配置 | 第68-69页 |
2.5 实验方法及步骤 | 第69-71页 |
3 结果 | 第71-80页 |
3.1 免疫组织化学染色显示calmodulin随着膝关节骨性关节炎进展表达逐渐增加 | 第71-72页 |
3.2 大鼠膝关节软骨中TRPV5、calmodulin、Cleavedcaspase-8、Pro-caspase-8蛋白的表达水平检测 | 第72-73页 |
3.3 大鼠膝关节软骨细胞原代培养及鉴定以及siRNA干扰效率检测 | 第73-74页 |
3.4 免疫荧光法检测MIA刺激后大鼠原代细胞中calmodulin、Cleavedcaspase-8的表达水平 | 第74-75页 |
3.5 检测各组细胞内钙离子反映TRPV5的钙离子通道的功能性 | 第75-76页 |
3.6 AnnexinV-FITC&PI检测各组软骨细胞调亡率 | 第76-80页 |
4 讨论 | 第80-83页 |
5 结论 | 第83-84页 |
第四部分:骨性关节炎大鼠软骨细胞中TRPV5在不同运动负荷中表达水平变化的实验研究 | 第84-96页 |
1 前言 | 第84-85页 |
2 材料与方法 | 第85-90页 |
2.1 主要仪器和设备 | 第85-86页 |
2.2 主要实验耗材 | 第86页 |
2.3 主要实验试剂 | 第86-87页 |
2.4 主要试剂配置 | 第87-88页 |
2.5 实验方法及步骤 | 第88-90页 |
3.结果 | 第90-93页 |
3.1 X-ray影像学评分 | 第90-91页 |
3.2 各组膝关节软骨组织学观察 | 第91-92页 |
3.3 不同运动负荷膝关节软骨组织中TRPV5蛋白表达水平检测 | 第92-93页 |
4.讨论 | 第93-95页 |
5 结论 | 第95-96页 |
参考文献 | 第96-101页 |
综述 | 第101-113页 |
参考文献 | 第109-113页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第113-114页 |
个人简历 | 第114-115页 |
致谢 | 第115页 |