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不同运动负荷通过TRPV5调节骨关节炎的机制研究

摘要第4-10页
Abstract第10-17页
英文缩略语第18-24页
第一部分:软骨细胞中的TRPV5在大鼠骨性关节炎病程中表达水平变化的实验研究第24-41页
    1 前言第24-25页
    2.材料与方法第25-32页
        2.1 主要仪器和设备第25-26页
        2.2 主要实验耗材第26页
        2.3 主要实验试剂第26-27页
        2.4 主要试剂配置第27-28页
        2.5 实验方法及步骤第28-32页
    3 结果第32-38页
        3.1 X-ray影像学观察与评分第32-34页
        3.2 各组膝关节大体解剖观察与各组软骨组织学观察第34-36页
        3.3 不同组膝关节软骨组织中TRPV5mRNA表达水平的检测第36-37页
        3.4 不同组膝关节软骨组织中TRPV5蛋白表达水平检测第37-38页
    4 讨论第38-40页
    5 结论第40-41页
第二部分:TRPV5通过介导细胞外钙离子内流抑制软骨细胞自噬的机制研究第41-64页
    1 前言第41-42页
    2 材料与方法第42-50页
        2.1 主要仪器和设备第42-43页
        2.2 主要实验耗材第43页
        2.3 主要实验试剂第43-45页
        2.4 主要试剂配置第45-46页
        2.5 实验方法及步骤第46-50页
    3 结果第50-60页
        3.1 免疫组织化学染色显示LC3B随着膝关节骨性关节炎进展表达逐渐减弱第50-51页
        3.2 大鼠膝关节软骨中TRPV5、calmodulin、LC3的蛋白表达水平检测第51-53页
        3.3 大鼠膝关节软骨细胞形态学观察及免疫组织化学染色鉴定第53页
        3.4 TRPV5-siRNA转染大鼠关节软骨细胞干扰效率检测第53-55页
        3.5 免疫荧光法检测MIA刺激原代软骨细胞后calmodulin、LC3B的表达水平第55-56页
        3.6 检测各组细胞内钙离子反映TRPV5的钙离子通道的功能性第56-58页
        3.7 软骨细胞中TRPV5、calmodulin、CAMKⅡ、p-CAMKⅡ、Beclin1、p-Beclin1、LC3和Bcl-2的蛋白表达水平检测第58-60页
    4 讨论第60-63页
    5 结论第63-64页
第三部分:TRPV5通过介导细胞外钙离子内流诱导外源性软骨细胞凋亡的机制研究第64-84页
    1 前言第64-65页
    2 材料与方法第65-71页
        2.1 主要仪器和设备第65-66页
        2.2 主要实验耗材第66页
        2.3 主要实验试剂第66-68页
        2.4 主要试剂配置第68-69页
        2.5 实验方法及步骤第69-71页
    3 结果第71-80页
        3.1 免疫组织化学染色显示calmodulin随着膝关节骨性关节炎进展表达逐渐增加第71-72页
        3.2 大鼠膝关节软骨中TRPV5、calmodulin、Cleavedcaspase-8、Pro-caspase-8蛋白的表达水平检测第72-73页
        3.3 大鼠膝关节软骨细胞原代培养及鉴定以及siRNA干扰效率检测第73-74页
        3.4 免疫荧光法检测MIA刺激后大鼠原代细胞中calmodulin、Cleavedcaspase-8的表达水平第74-75页
        3.5 检测各组细胞内钙离子反映TRPV5的钙离子通道的功能性第75-76页
        3.6 AnnexinV-FITC&PI检测各组软骨细胞调亡率第76-80页
    4 讨论第80-83页
    5 结论第83-84页
第四部分:骨性关节炎大鼠软骨细胞中TRPV5在不同运动负荷中表达水平变化的实验研究第84-96页
    1 前言第84-85页
    2 材料与方法第85-90页
        2.1 主要仪器和设备第85-86页
        2.2 主要实验耗材第86页
        2.3 主要实验试剂第86-87页
        2.4 主要试剂配置第87-88页
        2.5 实验方法及步骤第88-90页
    3.结果第90-93页
        3.1 X-ray影像学评分第90-91页
        3.2 各组膝关节软骨组织学观察第91-92页
        3.3 不同运动负荷膝关节软骨组织中TRPV5蛋白表达水平检测第92-93页
    4.讨论第93-95页
    5 结论第95-96页
参考文献第96-101页
综述第101-113页
    参考文献第109-113页
攻读学位期间取得的研究成果第113-114页
个人简历第114-115页
致谢第115页

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