| 英文缩略词 | 第4-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| 1.1 乳腺发育及泌乳的研究 | 第11-14页 |
| 1.1.1 乳腺的组织结构和细胞组成 | 第12-13页 |
| 1.1.2 乳腺发育的过程 | 第13页 |
| 1.1.3 乳腺的泌乳功能 | 第13-14页 |
| 1.2 乳腺上皮细胞的培养 | 第14-17页 |
| 1.2.1 乳腺上皮细胞的分离 | 第14-15页 |
| 1.2.2 乳腺上皮细胞的纯化 | 第15-16页 |
| 1.2.3 乳腺上皮细胞系的建立 | 第16-17页 |
| 1.3 miR-200c 研究进展 | 第17-19页 |
| 1.3.1 miR-200c 与肿瘤发生 | 第18页 |
| 1.3.2 miR-200c 与脂肪酸代谢 | 第18-19页 |
| 1.4 ACACA 基因研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4.1 ACACA 基因的结构和功能 | 第19页 |
| 1.4.2 ACACA 基因多态性与脂肪酸合成 | 第19-20页 |
| 1.5 本研究的目的意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-47页 |
| 2.1 材料 | 第21-25页 |
| 2.1.1 乳腺组织、菌株和载体 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第21-23页 |
| 2.1.3 常用试剂的配制 | 第23-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-47页 |
| 2.2.1 乳腺上皮细胞的分离与培养 | 第25-27页 |
| 2.2.2 分泌上皮细胞的单克隆培养 | 第27-28页 |
| 2.2.3 单克隆分泌上皮细胞的鉴定 | 第28-31页 |
| 2.2.4 单克隆分泌上皮细胞的生物学性状检测 | 第31-32页 |
| 2.2.5 miR-200c 的选择及其靶基因的预测 | 第32-33页 |
| 2.2.6 miR-200c 及其预测靶基因靶向关系的 qRT-PCR 验证 | 第33-36页 |
| 2.2.7 双荧光素酶报告基因系统的验证 | 第36-44页 |
| 2.2.8 Western-blot 验证靶基因蛋白表达量的变化 | 第44-46页 |
| 2.2.9 统计分析 | 第46-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-62页 |
| 3.1 乳腺分泌上皮细胞系的建立 | 第47-53页 |
| 3.1.1 原代乳腺上皮细胞的培养 | 第47-49页 |
| 3.1.2 单细胞克隆集落的生长与筛选 | 第49-50页 |
| 3.1.3 单克隆分泌上皮细胞的鉴定 | 第50-51页 |
| 3.1.4 单克隆分泌上皮细胞的生物学性状检测 | 第51-53页 |
| 3.2 miR-200c 对 ACACA 基因的表达调控验证 | 第53-62页 |
| 3.2.1 miR-200c 与 ACACA 基因的预测结合位点 | 第53-54页 |
| 3.2.2 miR-200c 对 ACACA 基因 mRNA 表达的影响 | 第54-56页 |
| 3.2.3 miR-200c 对荧光素酶活性的影响 | 第56-60页 |
| 3.2.4 miR-200c 对 ACACA 基因蛋白表达的影响 | 第60-62页 |
| 4 讨论 | 第62-65页 |
| 4.1 乳腺分泌上皮细胞的分离和纯化 | 第62-63页 |
| 4.2 乳腺分泌上皮细胞的鉴定 | 第63-64页 |
| 4.3 miR-200c 对乳脂代谢的调节作用 | 第64页 |
| 4.4 miR-200c 与 ACACA 基因的表达关系 | 第64-65页 |
| 5 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第76页 |
