中文摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
文献综述 | 第9-19页 |
1 核盘菌概述 | 第9-11页 |
1.1 核盘菌简介 | 第9页 |
1.2 核盘菌的生活史及分类 | 第9-10页 |
1.3 核盘菌病害的防治 | 第10-11页 |
2 MADS-box 转录因子概述 | 第11-13页 |
2.1 MADS-box 转录因子的研究现状 | 第11页 |
2.2 在酿酒酵母中 MADS-box 转录因子的作用 | 第11-12页 |
2.3 在动物中 MADS-box 转录因子的作用 | 第12页 |
2.4 在植物中 MADS-box 转录因子的作用 | 第12-13页 |
3 RNA 沉默技术 | 第13-15页 |
3.1 RNA 沉默在真菌中的研究进展 | 第13-15页 |
3.2 RNA 沉默技术的优势 | 第15页 |
4 丝状真菌的遗传转化技术的研究进展 | 第15-16页 |
4.1 丝状真菌的遗传转化方法 | 第15-16页 |
4.2 在丝状真菌突变体的研究方法 | 第16页 |
5 本研究的目的与意义 | 第16-19页 |
第一章 核盘菌SsMCM1 基因的克隆与RNA 干扰载体的构建 | 第19-35页 |
1 材料 | 第19-20页 |
1.1 菌株及载体 | 第19页 |
1.2 主要试剂 | 第19页 |
1.3 主要仪器 | 第19页 |
1.4 主要培养基的配制 | 第19-20页 |
2 方法 | 第20-29页 |
2.1 SsMCM1 基因的克隆 | 第20-25页 |
2.2 SsMCM1 基因的生物信息学分析 | 第25页 |
2.3 SsMCM1 基因 RNA 干扰载体的构建 | 第25-28页 |
2.4 SsMCM1 基因 RNA 干扰载体的鉴定 | 第28-29页 |
3 结果与分析 | 第29-35页 |
3.1 SsMCM1 基因的克隆结果 | 第29-30页 |
3.2 SsMCM1 基因序列分析 | 第30-32页 |
3.3 pSD-SsMCM1 和 pS1-SsMCM1 干扰载体的构建 | 第32-35页 |
第二章 核盘菌遗传转化与 SsMCM1 沉默转化子的筛选 | 第35-40页 |
1 材料 | 第35-36页 |
1.1 菌株及载体 | 第35页 |
1.2 酶和主要试剂 | 第35页 |
1.3 主要试剂的配制 | 第35-36页 |
2 方法 | 第36-38页 |
2.1 制备核盘菌菌丝的原生质体 | 第36-37页 |
2.2 PEG-CaCl2介导核盘菌原生质体的遗传转化 | 第37-38页 |
2.3 pS1-SsMCM1 和 pSD-SsMCM1 遗传转化子的筛选 | 第38页 |
3 结果与分析 | 第38-40页 |
第三章 SsMCM1 沉默转化子分子生物学分析 | 第40-48页 |
1 材料 | 第40-41页 |
1.1 菌株 | 第40页 |
1.2 酶和主要试剂 | 第40页 |
1.3 主要试剂的配制 | 第40页 |
1.4 主要实验仪器 | 第40-41页 |
2 方法 | 第41-44页 |
2.1 pS1-SsMCM1 沉默转化子的 PCR 分析 | 第41-42页 |
2.2 pSD-SsMCM1 沉默转化子的 PCR 分析 | 第42-43页 |
2.3 沉默转化子 SsMCM1 基因 Real Time PCR 测定方法 | 第43-44页 |
3 结果与分析 | 第44-48页 |
3.1 pS1-SsMCM1 与 pSD-SsMCM1 干扰载体已转化核盘菌基因组 | 第44-45页 |
3.2 沉默转化子 SsMCM1 基因 Real Time PCR 测定结果 | 第45-48页 |
第四章 SsMCM1 转录因子生物学功能分析 | 第48-53页 |
1 材料 | 第48页 |
1.1 菌株 | 第48页 |
1.2 酶和主要试剂 | 第48页 |
1.3 主要试剂配制 | 第48页 |
2 方法 | 第48-49页 |
2.1 SsMCM1 沉默转化子菌落形态观察 | 第48-49页 |
2.2 SsMCM1 沉默转化子菌丝生长速率测定方法 | 第49页 |
2.3 SsMCM1 沉默转化子致病力的测定方法 | 第49页 |
3 结果与分析 | 第49-53页 |
3.1 SsMCM1 沉默转化子菌落形态的观察结果 | 第49-50页 |
3.2 SsMCM1 沉默转化子生长速率的测定结果 | 第50-52页 |
3.3 SsMCM1 沉默转化子致病力的测定结果 | 第52-53页 |
讨论 | 第53-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-64页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |