中文摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-22页 |
1.1 转录因子的概述 | 第12-14页 |
1.1.1 转录因子的概念 | 第12-13页 |
1.1.2 转录因子的结构功能 | 第13页 |
1.1.3 转录因子的分类 | 第13-14页 |
1.2 植物bZIP类转录因子家族 | 第14-17页 |
1.2.1 bZIP类转录因子的结构特征 | 第14-15页 |
1.2.2 bZIP家族转录因子的分类 | 第15-16页 |
1.2.3 bZIP转录因子的功能 | 第16-17页 |
1.3 AREB/ABF转录因子研究进展 | 第17-19页 |
1.3.1 花生中AREB1研究进展 | 第18页 |
1.3.2 AREB1转录因子的结构特点及作用机理 | 第18-19页 |
1.4 TRV-VIGS的分子机制 | 第19-20页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第20-22页 |
2 材料与方法 | 第22-41页 |
2.1 AhAREB1-2基因的克隆与生物信息学分析 | 第22-27页 |
2.1.1 植物材料 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂、菌种和质粒 | 第22页 |
2.1.3 试验方法 | 第22-26页 |
2.1.4 AhAREB1-2基因的生物信息学分析 | 第26-27页 |
2.2 AhAREB1-2基因表达量检测 | 第27-31页 |
2.2.1 试验材料 | 第27页 |
2.2.2 主要试剂 | 第27页 |
2.2.3 试验所需培养基 | 第27-29页 |
2.2.4 试验方法 | 第29-31页 |
2.3 AhAREB1-2基因表量与花生苗期抗旱相关性分析 | 第31-33页 |
2.3.1 AhAREB1-2基因表量的测定 | 第31-32页 |
2.3.2 苗期的抗旱性鉴定试验 | 第32-33页 |
2.3.3 AhAREB1-2基因表量与花生苗期抗旱相关性分析方法 | 第33页 |
2.4 植物沉默载体的构建及遗传转化 | 第33-40页 |
2.4.1 设计构建沉默载体的特异性引物 | 第33-34页 |
2.4.2 质粒AhAREB1-2基因特异性引物扩增及鉴定 | 第34页 |
2.4.3 TRV2菌液质粒DNA的提取 | 第34-35页 |
2.4.4 载体TRV2双酶切鉴定 | 第35页 |
2.4.5 目的片段与线性化载体的重组反应 | 第35-36页 |
2.4.6 重组产物转化大肠杆菌感受态细胞 | 第36-37页 |
2.4.7 阳性重组质粒转化农杆菌GV3101并筛选鉴定 | 第37-38页 |
2.4.8 花生遗传转化 | 第38-40页 |
2.5 基因沉默植株表型鉴定试验 | 第40页 |
2.5.1 自然干旱胁迫植株实验 | 第40页 |
2.5.2 离体叶片非生物胁迫实验 | 第40页 |
2.5.3 离体叶片相对失水率的测定试验 | 第40页 |
2.5.4 气孔孔径成像和测量试验 | 第40页 |
2.6 数据分析 | 第40-41页 |
3 结果与分析 | 第41-69页 |
3.1 AhAERB1-2基因的克隆与生物信息学分析 | 第41-49页 |
3.1.1 花生幼苗总RNA的提取结果 | 第41页 |
3.1.2 AhAERB1-2基因片段的获得 | 第41-42页 |
3.1.3 重组子的鉴定 | 第42-45页 |
3.1.4 AhAERB1-2基因的生物信息学分析 | 第45-49页 |
3.2 AhAREB1-2基因表达模式分析 | 第49-53页 |
3.2.1 花生AhAREB1-2基因表达的组织特异性分析 | 第49-50页 |
3.2.2 不同非生物胁迫对AhAREB1-2基因表达的影响 | 第50-52页 |
3.2.3 PEG胁迫4h,不同品种AhAREB1-2基因的表达量 | 第52-53页 |
3.3 不同花生品种(系)苗期抗旱性 | 第53-61页 |
3.3.1 PEG胁迫下花生品种(系)抗旱相关性状的测定与分析 | 第53-56页 |
3.3.2 花生品种(系)苗期抗旱性综合分析 | 第56-61页 |
3.4 AhAREB1-2表达量与抗旱相关性状表型值的相关性分析 | 第61-62页 |
3.5 病毒诱导基因沉默载体的构建及花生遗传转化 | 第62-65页 |
3.5.1 基因沉默载体的构建 | 第62-63页 |
3.5.2 获得AhAREB1-2基因沉默花生植株 | 第63-65页 |
3.6 非生物胁迫AhAREB1-2基因沉默植株的表型分析 | 第65-69页 |
3.6.1 干旱胁迫沉默植株的表型分析 | 第65页 |
3.6.2 PEG胁迫沉默植株离体叶片的表型分析 | 第65-66页 |
3.6.3 沉默植株离体叶片的相对失水率 | 第66-67页 |
3.6.4 沉默植株气孔的开度 | 第67页 |
3.6.5 盐胁迫沉默植株离体叶片的表型分析 | 第67-68页 |
3.6.6 甲基紫精胁迫沉默植株离体叶片的表型分析 | 第68-69页 |
4 讨论 | 第69-72页 |
4.1 花生AhAREB1-2基因的克隆及生物信息学分析 | 第69页 |
4.2 花生AhAREB1-2基因的表达 | 第69-70页 |
4.3 沉默载体构建及沉默AhAREB1-2基因植株的抗性研究 | 第70-72页 |
5 结论 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第84页 |