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花生抗旱相关转录因子AREB1-2基因的功能分析

中文摘要第9-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-22页
    1.1 转录因子的概述第12-14页
        1.1.1 转录因子的概念第12-13页
        1.1.2 转录因子的结构功能第13页
        1.1.3 转录因子的分类第13-14页
    1.2 植物bZIP类转录因子家族第14-17页
        1.2.1 bZIP类转录因子的结构特征第14-15页
        1.2.2 bZIP家族转录因子的分类第15-16页
        1.2.3 bZIP转录因子的功能第16-17页
    1.3 AREB/ABF转录因子研究进展第17-19页
        1.3.1 花生中AREB1研究进展第18页
        1.3.2 AREB1转录因子的结构特点及作用机理第18-19页
    1.4 TRV-VIGS的分子机制第19-20页
    1.5 本研究的目的及意义第20-22页
2 材料与方法第22-41页
    2.1 AhAREB1-2基因的克隆与生物信息学分析第22-27页
        2.1.1 植物材料第22页
        2.1.2 主要试剂、菌种和质粒第22页
        2.1.3 试验方法第22-26页
        2.1.4 AhAREB1-2基因的生物信息学分析第26-27页
    2.2 AhAREB1-2基因表达量检测第27-31页
        2.2.1 试验材料第27页
        2.2.2 主要试剂第27页
        2.2.3 试验所需培养基第27-29页
        2.2.4 试验方法第29-31页
    2.3 AhAREB1-2基因表量与花生苗期抗旱相关性分析第31-33页
        2.3.1 AhAREB1-2基因表量的测定第31-32页
        2.3.2 苗期的抗旱性鉴定试验第32-33页
        2.3.3 AhAREB1-2基因表量与花生苗期抗旱相关性分析方法第33页
    2.4 植物沉默载体的构建及遗传转化第33-40页
        2.4.1 设计构建沉默载体的特异性引物第33-34页
        2.4.2 质粒AhAREB1-2基因特异性引物扩增及鉴定第34页
        2.4.3 TRV2菌液质粒DNA的提取第34-35页
        2.4.4 载体TRV2双酶切鉴定第35页
        2.4.5 目的片段与线性化载体的重组反应第35-36页
        2.4.6 重组产物转化大肠杆菌感受态细胞第36-37页
        2.4.7 阳性重组质粒转化农杆菌GV3101并筛选鉴定第37-38页
        2.4.8 花生遗传转化第38-40页
    2.5 基因沉默植株表型鉴定试验第40页
        2.5.1 自然干旱胁迫植株实验第40页
        2.5.2 离体叶片非生物胁迫实验第40页
        2.5.3 离体叶片相对失水率的测定试验第40页
        2.5.4 气孔孔径成像和测量试验第40页
    2.6 数据分析第40-41页
3 结果与分析第41-69页
    3.1 AhAERB1-2基因的克隆与生物信息学分析第41-49页
        3.1.1 花生幼苗总RNA的提取结果第41页
        3.1.2 AhAERB1-2基因片段的获得第41-42页
        3.1.3 重组子的鉴定第42-45页
        3.1.4 AhAERB1-2基因的生物信息学分析第45-49页
    3.2 AhAREB1-2基因表达模式分析第49-53页
        3.2.1 花生AhAREB1-2基因表达的组织特异性分析第49-50页
        3.2.2 不同非生物胁迫对AhAREB1-2基因表达的影响第50-52页
        3.2.3 PEG胁迫4h,不同品种AhAREB1-2基因的表达量第52-53页
    3.3 不同花生品种(系)苗期抗旱性第53-61页
        3.3.1 PEG胁迫下花生品种(系)抗旱相关性状的测定与分析第53-56页
        3.3.2 花生品种(系)苗期抗旱性综合分析第56-61页
    3.4 AhAREB1-2表达量与抗旱相关性状表型值的相关性分析第61-62页
    3.5 病毒诱导基因沉默载体的构建及花生遗传转化第62-65页
        3.5.1 基因沉默载体的构建第62-63页
        3.5.2 获得AhAREB1-2基因沉默花生植株第63-65页
    3.6 非生物胁迫AhAREB1-2基因沉默植株的表型分析第65-69页
        3.6.1 干旱胁迫沉默植株的表型分析第65页
        3.6.2 PEG胁迫沉默植株离体叶片的表型分析第65-66页
        3.6.3 沉默植株离体叶片的相对失水率第66-67页
        3.6.4 沉默植株气孔的开度第67页
        3.6.5 盐胁迫沉默植株离体叶片的表型分析第67-68页
        3.6.6 甲基紫精胁迫沉默植株离体叶片的表型分析第68-69页
4 讨论第69-72页
    4.1 花生AhAREB1-2基因的克隆及生物信息学分析第69页
    4.2 花生AhAREB1-2基因的表达第69-70页
    4.3 沉默载体构建及沉默AhAREB1-2基因植株的抗性研究第70-72页
5 结论第72-73页
参考文献第73-83页
致谢第83-84页
攻读学位期间发表论文情况第84页

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