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苹果MAX2基因介导独脚金内酯信号调控腋芽萌发的功能研究

摘要第5-7页
abstract第7-9页
第一章 文献综述第14-27页
    1.1 植物腋生分生组织的形成和分枝类型第14-15页
        1.1.1 植物腋生分生组织的形成第14页
        1.1.2 分枝类型第14-15页
        1.1.3 苹果腋芽特性第15页
    1.2 植物腋芽萌发调控的研究进展第15-18页
        1.2.1 生长素及其极性运输调控腋芽萌发第16页
        1.2.2 细胞分裂素促进腋芽萌发第16-17页
        1.2.3 独脚金内酯抑制腋芽的萌发第17页
        1.2.4 脱落酸与植物分枝的关系第17页
        1.2.5 蔗糖信号调控腋芽萌发第17-18页
    1.3 植物激素调控腋芽萌发的相互作用关系第18-20页
        1.3.1 生长素和细胞分裂素调控腋芽萌发的关系第18-19页
        1.3.2 独脚金内酯与生长素调控腋芽萌发的关系第19-20页
        1.3.3 独脚金内酯与细胞分裂素调控腋芽萌发的关系第20页
    1.4 SLs途径调控腋芽萌发的研究进展第20-26页
        1.4.1 SLs的发现第21页
        1.4.2 SLs的生物合成第21-23页
        1.4.3 独脚金内酯的转运、信号识别与传递第23-24页
        1.4.4 MAX2介导SLs信号调控腋芽萌发的分子机制第24-25页
        1.4.5 独脚金内酯的其他生物学功能以及MAX2基因的多效性第25-26页
    1.5 苹果腋芽萌发调控的研究进展第26页
    1.6 本研究的目的与意义第26-27页
第二章 苹果多分枝突变体表型的生理差异分析第27-46页
    2.1 材料第27-28页
        2.1.1 试验材料和嫁接组合第27页
        2.1.2 主要试剂和仪器第27-28页
    2.2 方法第28-30页
        2.2.1 表型的测定第28页
        2.2.2 叶绿素含量、光合作用和叶绿素荧光的测定第28页
        2.2.3 可溶性糖的测定第28-29页
        2.2.4 植物激素的测定第29页
        2.2.5 植物有机碳、氮、磷、钾含量的测定第29页
        2.2.6 植物H2O2、MDA和抗氧化酶的提取和测定第29页
        2.2.7 激素处理嫁接苗第29-30页
        2.2.8 数据分析和软件作图第30页
    2.3 结果与分析第30-43页
        2.3.1 MB的分枝表型分析第30-31页
        2.3.2 MB影响根系生长和发育第31-32页
        2.3.3 MB叶片光合活力降低第32-33页
        2.3.4 MB植株中可溶性糖含量的分析第33-35页
        2.3.5 MB影响有机碳、全氮、磷、钾的分配第35页
        2.3.6 MB植株激素含量分析第35-37页
        2.3.7 MB植株的抗氧化能力弱第37-38页
        2.3.8 腋芽中激素和可溶性糖含量分析第38-40页
        2.3.9 外源细胞分裂素促使WT腋芽萌发第40-41页
        2.3.10 外源喷施蔗糖对苹果腋芽萌发的影响第41页
        2.3.11 外源独脚金内酯抑制苹果腋芽萌发第41页
        2.3.12 GR24和生长素极性运输抑制剂NPA对WT和MB腋芽萌发的影响第41-43页
    2.4 讨论第43-46页
第三章 基于转录组测序的苹果腋芽萌发相关基因的挖掘与鉴定第46-66页
    3.1 材料第46-47页
        3.1.1 试验材料和处理第46页
        3.1.2 主要试剂和仪器第46-47页
    3.2 方法第47-49页
        3.2.1 转录组测序(RNA-seq)与差异基因的筛选第47页
        3.2.2 基因表达基因的功能富集分析第47页
        3.2.3 RNA提取、反转录和测定第47-48页
        3.2.4 实时荧光定量发测定基因的表达量第48-49页
        3.2.5 数据分析和软件作图第49页
    3.3 结果与分析第49-63页
        3.3.1 测序样品的RNA质量第49页
        3.3.2 测序碱基组成和reads质量分布情况第49-50页
        3.3.3 RNA-seq数据质量分析第50-51页
        3.3.4 差异表达基因的筛选第51-52页
        3.3.5 差异表达基因GO功能显著性富集第52-53页
        3.3.6 差异表达基因的KEGGpathway分析第53-59页
        3.3.7 腋芽萌发阶段细胞复制与生长相关基因的表达分析第59-60页
        3.3.8 腋芽萌发阶段腋生分生组织相关基因的表达分析第60页
        3.3.9 腋芽萌发阶段糖运输与代谢相关基因的表达分析第60-61页
        3.3.10 腋芽萌发阶段细胞分裂素和生长素相关基因的表达分析第61-62页
        3.3.11 腋芽萌发阶段独脚金内酯相关基因的表达分析第62-63页
    3.4 讨论第63-66页
第四章 苹果MAX2基因调控腋芽萌发的功能分析第66-94页
    4.1 试验材料第66-67页
        4.1.1 植物材料第66页
        4.1.2 试剂和仪器第66-67页
        4.1.3 质粒和菌株第67页
    4.2 方法第67-71页
        4.2.1 生物信息学分析第67页
        4.2.2 RNA的提取、反转和检测第67页
        4.2.3 WT和MB材料DNA的提取第67-68页
        4.2.4 MAX2、D14表达量的测定、编码区和启动子的克隆第68-69页
        4.2.5 PCR纯化产物连接pMD19-T载体、转化与检测第69页
        4.2.6 编码区和启动子的序列分析第69页
        4.2.7 启动子瞬时表达载体的构建第69页
        4.2.8 GUS染色和活性定量分析第69-70页
        4.2.9 植物表达载体的构建第70页
        4.2.10 农杆菌介导的拟南芥转化第70-71页
    4.3 结果与分析第71-92页
        4.3.1 独脚金内酯信号基因的同源鉴定第71-73页
        4.3.2 腋芽RNA-seq数据中独脚金内酯信号基因的表达分析第73-74页
        4.3.3 苹果不同组织中MAX2和D14基因的表达第74-75页
        4.3.4 ‘长富2号’腋芽萌发中MdMAX2和MdD14基因的表达分析第75-76页
        4.3.5 不同处理对WT和MB腋芽MbD14和MbMAX2基因表达的影响第76-78页
        4.3.6 MbD14基因的克隆与序列分析第78-80页
        4.3.7 MbMAX2基因的克隆与序列分析第80-83页
        4.3.8 MbMAX2基因在野生型和max2突变体拟南芥中过表达分析第83-85页
        4.3.9 MB中差异MbMAX2基因序列在max2突变体中过表达分析第85-86页
        4.3.10 MbMAX2和MbD14基因启动子的克隆与序列分析第86-90页
        4.3.11 MbMAX2和MbD14基因启动子的活性分析第90-92页
    4.4 讨论第92-94页
第五章 苹果MAX2分枝相关互作蛋白验证与筛选第94-104页
    5.1 材料第94-95页
        5.1.1 植物材料、克隆引物、质粒载体和菌株第94页
        5.1.2 试剂和培养基配制第94-95页
    5.2 方法第95-97页
        5.2.1 模式植物中已知互作蛋白与苹果MAX2互作的验证第95页
        5.2.2 酵母双杂交cDNA文库的构建与转化第95-96页
        5.2.3 酵母转化、自激活和自毒的检测第96页
        5.2.4 酵母双杂交互作蛋白的筛选第96-97页
        5.2.5 酵母双杂交载体的构建与初步验证第97页
    5.3 结果与分析第97-102页
        5.3.1 苹果MdMAX2互作蛋白的鉴定第97-98页
        5.3.2 苹果腋芽酵母表达cDNA文库的构建第98-99页
        5.3.3 苹果MAX2的自激活和自毒检测第99页
        5.3.4 苹果MAX2互作蛋白的筛选第99-101页
        5.3.5 苹果MAX2互作蛋白的初步验证第101-102页
    5.4 讨论第102-104页
第六章 结论和创新点第104-105页
    6.1 结论第104页
    6.2 创新点第104-105页
参考文献第105-118页
附录第118-124页
致谢第124-125页
作者简介第125页

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