| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 英文缩略语索引 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-33页 |
| 1 副溶血弧菌的主要特征 | 第14-15页 |
| 2 副溶血弧菌检测方法研究现状 | 第15-20页 |
| 2.1 传统培养方法 | 第15-16页 |
| 2.2 KP 溶血试验 | 第16页 |
| 2.3 免疫学方法 | 第16-17页 |
| 2.4 核酸杂交 | 第17页 |
| 2.5 乳胶凝集试验 | 第17-18页 |
| 2.6 PCR 法 | 第18-19页 |
| 2.7 基因芯片技术 | 第19-20页 |
| 3 PCR 方法检测副溶血弧菌的靶基因及其优缺点 | 第20-21页 |
| 4 荧光定量 PCR 的原理和分类 | 第21-26页 |
| 4.1 原理 | 第21-22页 |
| 4.2 分类 | 第22-25页 |
| 4.3 存在的缺点 | 第25-26页 |
| 5 扩增内标的研究概况 | 第26-32页 |
| 5.1 扩增内标的构建方法 | 第26-30页 |
| 5.2 扩增内标在食源性致病菌PCR 检测体系中的应用 | 第30-32页 |
| 6 研究的目的与意义 | 第32-33页 |
| 第二章 副溶血弧菌特异性检测靶点的筛选及其验证 | 第33-49页 |
| 1 材料 | 第33-36页 |
| 1.1 菌种 | 第33-34页 |
| 1.2 培养基及主要试剂的配制 | 第34-35页 |
| 1.3 仪器和设备 | 第35-36页 |
| 2 方法 | 第36-40页 |
| 2.1 细菌的培养及基因组DNA 的提取 | 第36页 |
| 2.2 副溶血弧菌特异检测靶点的筛选及引物设计 | 第36-37页 |
| 2.3 PCR 反应条件的优化 | 第37页 |
| 2.4 特异性评价 | 第37页 |
| 2.5 灵敏度评价 | 第37-38页 |
| 2.6 抗干扰能力的评价 | 第38-40页 |
| 3 结果 | 第40-47页 |
| 3.1 副溶血弧菌特异检测靶点的筛选及引物设计 | 第40-41页 |
| 3.2 PCR 反应体系的优化 | 第41-42页 |
| 3.3 特异性评价 | 第42-43页 |
| 3.4 灵敏度评价 | 第43-44页 |
| 3.5 抗干扰能力评价 | 第44-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| 第三章 含有扩增内标的副溶血弧菌常规PCR 检测方法的建立 | 第49-66页 |
| 1 材料 | 第49-53页 |
| 1.1 菌种和质粒 | 第49-51页 |
| 1.2 培养基 | 第51-52页 |
| 1.3 主要试剂配方 | 第52-53页 |
| 1.4 仪器和设备 | 第53页 |
| 2 实验方法 | 第53-58页 |
| 2.1 扩增内标的构建 | 第53-57页 |
| 2.2 扩增内标添加量的选择试验 | 第57页 |
| 2.3 特异性评价 | 第57页 |
| 2.4 人工污染试验 | 第57页 |
| 2.5 食品样品检测试验 | 第57-58页 |
| 3 结果 | 第58-66页 |
| 3.1 扩增内标的构建 | 第58-59页 |
| 3.2 扩增内标添加量的选择试验 | 第59-61页 |
| 3.3 特异性评价 | 第61页 |
| 3.4 人工污染试验 | 第61页 |
| 3.5 食品样品检测试验 | 第61-66页 |
| 第四章 含有扩增内标的副溶血弧菌TaqMan 荧光定量PCR 检测方法的建立 | 第66-83页 |
| 1 材料 | 第66-67页 |
| 1.1 菌种 | 第66页 |
| 1.2 培养基 | 第66页 |
| 1.3 主要试剂 | 第66-67页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第67页 |
| 2 实验方法 | 第67-70页 |
| 2.1 引物和探针的设计 | 第67页 |
| 2.2 扩增内标的构建 | 第67-68页 |
| 2.3 含有扩增内标的荧光定量 PCR 反应体系的优化 | 第68-69页 |
| 2.4 特异性评价 | 第69页 |
| 2.5 灵敏度评价 | 第69页 |
| 2.6 抗干扰能力评价 | 第69页 |
| 2.7 人工污染试验 | 第69-70页 |
| 2.8 食品样品检测试验 | 第70页 |
| 3 结果 | 第70-78页 |
| 3.1 引物和探针的设计 | 第70-71页 |
| 3.2 含有扩增内标的荧光定量 PCR 反应体系的优化 | 第71-73页 |
| 3.3 特异性评价 | 第73页 |
| 3.4 灵敏度评价 | 第73-75页 |
| 3.5 抗干扰能力评价 | 第75-76页 |
| 3.6 人工污染试验 | 第76-77页 |
| 3.7 自然污染食品样品中副溶血弧菌的检测 | 第77-78页 |
| 4 讨论 | 第78-83页 |
| 第五章 总结与展望 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第97-99页 |
| 上海交通大学学位论文答辩决议书 | 第99-100页 |
