| 目录 | 第4-9页 |
| TABLE OF CONTENTS | 第9-13页 |
| 摘要 | 第13-17页 |
| Abstract | 第17-21页 |
| 第一章 前言 | 第24-44页 |
| 1.1 Myxococcus xanthus的多细胞行为综述 | 第24-26页 |
| 1.2 Myxococcus xanthus在固体界面的滑动运动 | 第26-34页 |
| 1.2.1 S运动系统 | 第27-34页 |
| 1.2.2 A运动系统 | 第34页 |
| 1.3 运动的调节系统 | 第34-40页 |
| 1.3.1 Dif化感系统 | 第34-36页 |
| 1.3.2 Frz化感系统 | 第36-40页 |
| 1.4 海洋耐盐粘细菌(Myxococcus fulvus HW-1)的生存模式简述 | 第40-42页 |
| 1.4.1 海洋耐盐粘细菌(Myxococcus fulvus HW-1)的社会性行为 | 第40-41页 |
| 1.4.2 HW-1环境适应性进化生活模式转换的机制研究 | 第41-42页 |
| 1.5 论文工作的开展思路以及研究内容 | 第42-44页 |
| 第二章 橙色粘细菌遗传学方法检测type Ⅳ pilus PilM/N/O/P/Q复合物 | 第44-66页 |
| 2.1 实验材料 | 第45-50页 |
| 2.1.1 菌株及质粒 | 第45-47页 |
| 2.1.2 培养基 | 第47页 |
| 2.1.3 实验试剂及仪器耗材 | 第47-50页 |
| 2.2 试验方法 | 第50-55页 |
| 2.2.1 目的基因缺失载体的构建流程 | 第50-51页 |
| 2.2.2 M. xanthus DK1622的电转化及突变株的筛选纯化 | 第51-52页 |
| 2.2.3 目的基因的异源回补及示意图 | 第52页 |
| 2.2.4 敲除突变株中的点突变置换 | 第52-54页 |
| 2.2.5 运动能力分析 | 第54页 |
| 2.2.6 胞外多糖分析 | 第54-55页 |
| 2.3 结果与分析 | 第55-64页 |
| 2.3.1 Myxococcus xanthus中Type Ⅳ pilus系统的作用 | 第55页 |
| 2.3.2 pilM/N/O/P/Q敲除突变株回补表型 | 第55-57页 |
| 2.3.3 pilB~*能够抑制pilG/H/I敲除突变株EPS缺失但不抑制pilM/N/O/P/Q/C敲除突变株EPS的缺失 | 第57-64页 |
| 2.4 小章总结 | 第64-66页 |
| 第三章 Type Ⅳ pili蛋白间的直接相互作用 | 第66-102页 |
| 3.1 实验材料 | 第67-75页 |
| 3.1.1 菌株及质粒 | 第67-72页 |
| 3.1.2 培养基 | 第72-73页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第73-75页 |
| 3.1.4 实验仪器及耗材 | 第75页 |
| 3.2 试验方法 | 第75-81页 |
| 3.2.1 酵母双杂和细菌双杂的质粒构建 | 第75-76页 |
| 3.2.2 酵母转化或者共转化实验 | 第76-78页 |
| 3.2.3 酵母mating方式获得二倍体细胞 | 第78页 |
| 3.2.4 酵母转化子β-半乳糖苷酶活性分析(ONPG作为底物) | 第78-79页 |
| 3.2.5 酵母转化replica复制平板的方法 | 第79页 |
| 3.2.6 酵母三杂交系统检测三个蛋白间的相互作用 | 第79-80页 |
| 3.2.7 稀释点板试验 | 第80页 |
| 3.2.8 细菌双杂交检测蛋白相互作用的步骤 | 第80-81页 |
| 3.3 实验结果 | 第81-100页 |
| 3.3.1 酵母双杂交检测M. xanthus Type Ⅳ pili蛋白间相互作用 | 第81-89页 |
| 3.3.2 酵母三杂交检测M. xanthus Type Ⅳ pili蛋白可能相互作用 | 第89-90页 |
| 3.3.3 M. xanthus PilC蛋白的相互作用检测 | 第90-93页 |
| 3.3.4 细菌双杂交系统检测M. xanthus PilM,PilN,PilT和PilB蛋白相互作用 | 第93-95页 |
| 3.3.5 Thermus thermophilus PilN/O/P/Q蛋白相互作用的发现和验证 | 第95-100页 |
| 3.4 本章小结 | 第100-102页 |
| 第四章 Myxococcus fulvus HW-1和Myxococcus xanthus预测的Na~+/H~+ antiportercluster的功能分析 | 第102-130页 |
| 4.1 实验材料 | 第103-108页 |
| 4.1.1 菌株及质粒 | 第103-104页 |
| 4.1.2 培养基 | 第104-105页 |
| 4.1.3 实验试剂及仪器 | 第105-108页 |
| 4.2 试验方法 | 第108-113页 |
| 4.2.1 运动能力分析 | 第108-109页 |
| 4.2.2 胞外多糖分析 | 第109页 |
| 4.2.3 发育能力的分析 | 第109-110页 |
| 4.2.4 细胞胞外多糖染料结合实验 | 第110页 |
| 4.2.5 Southern杂交插入位点的验证 | 第110-111页 |
| 4.2.6 RT-PCR实验 | 第111页 |
| 4.2.7 Q-PCR实验 | 第111-112页 |
| 4.2.8 敲除突变株的获得 | 第112-113页 |
| 4.2.9 生长曲线的测定方法 | 第113页 |
| 4.2.10 死活孢子染色实验 | 第113页 |
| 4.3 实验结果和分析 | 第113-127页 |
| 4.3.1 HW-1突变株社会学行为能力分析 | 第113-116页 |
| 4.3.2 HW-1突变株插入位点的确定以及插入单一性的验证 | 第116-117页 |
| 4.3.3 YLH0402插入转座子对插入基因以及上下游基因的影响 | 第117-118页 |
| 4.3.4 YLH0402突变株发育阶段的LILAB_27425表达水平的初步分析 | 第118-119页 |
| 4.3.5 DK1622中与HW-1的LILAB_27425同源基因的比较 | 第119-120页 |
| 4.3.6 DK1622中MXAN_3848基因的插入失活突变株性质分析 | 第120-121页 |
| 4.3.7 YL1001应答盐调控和社会学行为的分析 | 第121-122页 |
| 4.3.8 YL1011社会学行为的变化 | 第122-126页 |
| 4.3.9 MXAN_3844-MXAN_3850基因簇中单个基因敲除突变株社会学行为分析 | 第126-127页 |
| 4.4 本章小结 | 第127-130页 |
| 第五章 M.fulvus HW-1中在淡水和海水条件下差异表达的外膜蛋白功能的初步探索 | 第130-148页 |
| 5.1 实验材料 | 第131-133页 |
| 5.1.1 菌株及质粒 | 第131-133页 |
| 5.1.2 培养基 | 第133页 |
| 5.1.3 实验试剂 | 第133页 |
| 5.1.4 仪器设备及耗材 | 第133页 |
| 5.2 实验方法 | 第133-134页 |
| 5.2.1 目的基因缺失载体的构建流程 | 第134页 |
| 5.2.2 DK1622黄色粘球菌的电转化和突变株筛选以及纯化 | 第134页 |
| 5.2.3 子实体发育及生孢能力的分析 | 第134页 |
| 5.2.4 运动能力的分析 | 第134页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第134-145页 |
| 5.3.1 芯片获得差异表达外膜蛋白的详细信息 | 第134-135页 |
| 5.3.2 编码差异表达的外膜蛋白基因敲除载体构建以及验证 | 第135-137页 |
| 5.3.3 敲除突变株的筛选,纯化与获得 | 第137-138页 |
| 5.3.4 目的敲除突变株在不同盐浓度下子实体的发育和生孢能力分析 | 第138-143页 |
| 5.3.5 目的敲除突变株在不同盐浓度条件下运动能力分析 | 第143-144页 |
| 5.3.6 未成功获得敲除突变株的基因的插入失活分析 | 第144-145页 |
| 5.4 本章小结 | 第145-148页 |
| 总结与展望 | 第148-150页 |
| 攻读博士期间发表的论文 | 第150-152页 |
| 致谢 | 第152-154页 |
| 参考文献 | 第154-164页 |
| 发表论文 | 第164-174页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第174页 |
