| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-31页 |
| 1 Bt资源研究现状 | 第11页 |
| 2 Bt的生物学特征及分布 | 第11-12页 |
| 3 Bt杀虫晶体蛋白基因 | 第12-23页 |
| ·杀虫晶体蛋白基因分类 | 第12-20页 |
| ·杀虫晶体蛋白基因的分布 | 第20页 |
| ·杀虫晶体蛋白基因的鉴定 | 第20-23页 |
| 4 Bt杀虫晶体蛋白 | 第23-28页 |
| ·杀虫晶体蛋白三维结构 | 第23-25页 |
| ·杀虫晶体蛋白的作用机制 | 第25-28页 |
| ·晶体蛋白的溶解 | 第26页 |
| ·酶解活化 | 第26页 |
| ·毒素与受体结合 | 第26-28页 |
| ·插入及孔洞或离子通道的形成 | 第28页 |
| 5 Bt杀虫晶体蛋白基因的应用 | 第28-29页 |
| ·植物抗虫基因工程 | 第28-29页 |
| ·重组Bt工程菌的构建 | 第29页 |
| ·高效广谱Bt工程菌 | 第29页 |
| ·多功能Bt工程菌 | 第29页 |
| 6 本研究的立题依据和目的意义 | 第29-31页 |
| 第二章 蒙顶山Bt的分离和cry基因的鉴定 | 第31-45页 |
| 1 材料与方法 | 第31-39页 |
| ·材料与仪器 | 第31-34页 |
| ·土样 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31-32页 |
| ·仪器设备 | 第32-34页 |
| ·研究方法 | 第34-39页 |
| ·土样的采集方法 | 第34-36页 |
| ·Bt菌株的分离 | 第36-37页 |
| ·菌株的保存 | 第37页 |
| ·Bt总DNA提取 | 第37页 |
| ·Bt质粒DNA的提取 | 第37-38页 |
| ·PCR反应 | 第38页 |
| ·酶切分析 | 第38页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第38页 |
| ·DNA回收 | 第38-39页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-44页 |
| ·菌株的分离 | 第39页 |
| ·伴胞晶体的形态观察 | 第39页 |
| ·cry基因的鉴定 | 第39-43页 |
| ·cry基因的通用引物鉴定结果 | 第39-40页 |
| ·cry1型基因的酶切鉴定分析 | 第40页 |
| ·cry2型新基因的发现 | 第40-43页 |
| ·Bt杀虫晶体蛋白的SDS-PAGE分析 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-45页 |
| 第三章 JF19-2中新型模式基因cry2Ag1的克隆表达研究 | 第45-57页 |
| 1. 材料与方法 | 第45-49页 |
| ·材料与仪器 | 第45-47页 |
| ·菌株与质粒 | 第45页 |
| ·培养基 | 第45-46页 |
| ·主要试剂 | 第46-47页 |
| ·仪器设备 | 第47页 |
| ·研究方法 | 第47-49页 |
| ·分子生物学操作 | 第47页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第47页 |
| ·E. coli质粒DNA提取 | 第47-48页 |
| ·cry2型新基因部分片段的克隆 | 第48页 |
| ·序列分析 | 第48页 |
| ·全长基因的克隆 | 第48页 |
| ·基因原核表达载体的构建 | 第48-49页 |
| ·cry2Ag1基因在大肠杆菌中的表达及SDS-PAGE检测 | 第49页 |
| 2. 结果与分析 | 第49-55页 |
| ·新型模式基因部分序列的克隆测序 | 第49-50页 |
| ·新型模式基因全长基因的克隆 | 第50-51页 |
| ·Cry2Ag1蛋白氨基酸组成与分析 | 第51-52页 |
| ·cry2Ag1基因原核表达载体的构建 | 第52页 |
| ·cry2Ag1基因在大肠杆菌中的表达 | 第52-53页 |
| ·cry2Ag1基因表达产物的生物活性 | 第53-55页 |
| 3. 讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 致谢 | 第64页 |