| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一篇 文献综述 | 第11-23页 |
| 第一章 猪伪狂犬病毒和实时荧光定量PCR研究进展 | 第11-23页 |
| 1 猪伪狂犬病毒的研究进展 | 第11-18页 |
| 1.1 病原学 | 第11-12页 |
| 1.2 PRV基因结构和编码蛋白 | 第12-14页 |
| 1.3 流行病学 | 第14页 |
| 1.4 诊断方法 | 第14-17页 |
| 1.5 疫苗研究 | 第17-18页 |
| 2 实时荧光定量PCR研究进展 | 第18-23页 |
| 2.1 实时定量PCR技术的原理 | 第18-19页 |
| 2.2 实时定量PCR方法及其特点 | 第19-20页 |
| 2.3 实时定量方法应用于动物病原体检测 | 第20-21页 |
| 2.4 实时定量方法的应用前景 | 第21-23页 |
| 第二篇 试验部分 | 第23-57页 |
| 第二章 猪伪狂犬病毒NJ-guoyao株的分离及其 gB基因遗传进化和抗原性分析 | 第23-39页 |
| 1 材料与方法 | 第23-28页 |
| 1.1 实验材料 | 第23页 |
| 1.2 实验仪器 | 第23-24页 |
| 1.3 病料处理和病毒分离与增殖 | 第24页 |
| 1.4 gB基因的提取和测序 | 第24-27页 |
| 1.5 gB基因核酸和氨基酸序列遗传进化分析 | 第27-28页 |
| 1.6 gB基因抗原性分析 | 第28页 |
| 2 结果 | 第28-37页 |
| 2.1 病料接种细胞病变的观察 | 第28-29页 |
| 2.2 PRV基因片段的扩增 | 第29页 |
| 2.3 重组质粒双酶切鉴定和测序 | 第29-31页 |
| 2.4 gB基因序列的同源性分析 | 第31-32页 |
| 2.5 gB基因的氨基酸序列分析 | 第32-33页 |
| 2.6 gB蛋白的抗原性比较分析 | 第33-37页 |
| 3 讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 猪伪狂犬病毒gB基因荧光定量PCR检测方法的建立与应用 | 第39-51页 |
| 1 材料和方法 | 第39-42页 |
| 1.1 实验材料 | 第39页 |
| 1.2 实验仪器 | 第39页 |
| 1.3 gB标准阳性质粒制备 | 第39-40页 |
| 1.4 gB基因实时荧光定量PCR方法的建立 | 第40-42页 |
| 1.5 病料组织中病毒DNA提取 | 第42页 |
| 1.6 样品检测 | 第42页 |
| 2 结果 | 第42-49页 |
| 2.1 常规PCR检验引物的结果 | 第42-43页 |
| 2.2 标准曲线的建立 | 第43-45页 |
| 2.3 重复性结果 | 第45-46页 |
| 2.4 特异性结果 | 第46-47页 |
| 2.5 敏感性结果 | 第47-48页 |
| 2.6 样品检测结果 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 荧光定量PCR检测的伪狂犬病毒基因拷贝数与病毒滴度关系 | 第51-57页 |
| 1 材料与方法 | 第51-53页 |
| 1.1 实验材料和仪器 | 第51页 |
| 1.2 荧光定量PCR法测定病毒拷贝数 | 第51-52页 |
| 1.3 CPE法测定病毒滴度 | 第52-53页 |
| 2 结果 | 第53-54页 |
| 2.1 CPE法测得的病毒滴度 | 第53页 |
| 2.2 荧光定量PCR检测不同滴度病毒gB基因拷贝数 | 第53-54页 |
| 2.3 2种方法测得的病毒滴度的比较 | 第54页 |
| 3 讨论 | 第54-57页 |
| 全文结论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
