| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 文献综述 | 第12-28页 |
| 第一章 PRRSV 及其抗原表位的研究进展 | 第12-28页 |
| ·PRRS 简介 | 第12-19页 |
| ·病原 | 第12-16页 |
| ·流行病学 | 第16页 |
| ·主要症状 | 第16-17页 |
| ·诊断 | 第17-18页 |
| ·防治 | 第18-19页 |
| ·PRRSV 抗原表位 | 第19-25页 |
| ·抗原表位研究方法 | 第19-20页 |
| ·核衣壳蛋白（N 蛋白）表位研究 | 第20-21页 |
| ·基质蛋白（M 蛋白）表位研究 | 第21页 |
| ·GP5 表位研究 | 第21-22页 |
| ·GP4 表位研究 | 第22-23页 |
| ·GP3 表位研究 | 第23页 |
| ·GP2 表位研究 | 第23-24页 |
| ·非结构蛋白2（Nsp2）表位研究 | 第24页 |
| ·基于抗原表位的应用研究进展 | 第24-25页 |
| ·目的意义及技术路线 | 第25-28页 |
| ·目的意义 | 第25-27页 |
| ·技术路线 | 第27-28页 |
| 试验研究 | 第28-52页 |
| 第二章 PRRSV TP60 Nsp2 克隆测序及BLE 的预测 | 第28-36页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·毒株、细胞、菌种 | 第28页 |
| ·主要试剂及配制 | 第28-29页 |
| ·其它试剂 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-32页 |
| ·引物设计 | 第29页 |
| ·PRRSV 总RNA 提取 | 第29-30页 |
| ·RT-PCR 扩增Nsp2 | 第30页 |
| ·PCR 产物回收和纯化 | 第30-31页 |
| ·PCR 产物的连接 | 第31页 |
| ·感受态细胞制备 | 第31页 |
| ·转化 | 第31页 |
| ·菌液PCR 鉴定 | 第31-32页 |
| ·BLE 预测 | 第32页 |
| ·结果 | 第32-33页 |
| ·目的基因扩增 | 第32-33页 |
| ·Nsp2 基因序列测定及分析 | 第33页 |
| ·BLE 预测结果 | 第33页 |
| ·讨论 | 第33页 |
| ·小结 | 第33-36页 |
| 第三章 间接ELISA 的条件优化及线性表位的筛选分析 | 第36-52页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·阴阳性抗原表位和阴阳性血清 | 第36页 |
| ·相关溶液配制 | 第36页 |
| ·其它试剂 | 第36-37页 |
| ·主要仪器设备 | 第37页 |
| ·检测血清 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-39页 |
| ·棋盘法测定抗原和血清最佳稀释度 | 第37-38页 |
| ·抗原最佳包被时间和酶标二抗浓度优化 | 第38页 |
| ·血清孵育时间优化 | 第38页 |
| ·封闭液的种类及其浓度优化 | 第38页 |
| ·封闭时间优化 | 第38页 |
| ·酶标二抗孵育时间优化 | 第38页 |
| ·实验特异性检测 | 第38-39页 |
| ·实验重复性检测 | 第39页 |
| ·临界值确定 | 第39页 |
| ·间接ELISA 检测 | 第39页 |
| ·BLE 生物信息学分析 | 第39页 |
| ·结果 | 第39-47页 |
| ·棋盘法测定抗原和血清最佳稀释度 | 第39-40页 |
| ·抗原最佳包被时间和酶标二抗浓度优化 | 第40-41页 |
| ·血清孵育时间优化 | 第41页 |
| ·封闭液的种类及其浓度优化 | 第41-42页 |
| ·封闭时间优化 | 第42页 |
| ·酶标二抗孵育时间优化 | 第42-43页 |
| ·优化后程序 | 第43页 |
| ·特异性试验 | 第43页 |
| ·重复性试验 | 第43-44页 |
| ·PRRSV TP60 抗体阳性血清制备 | 第44-45页 |
| ·ELISA 反应临界值的确定 | 第45-46页 |
| ·间接 ELISA 检测结果 | 第46-47页 |
| ·线性表位生物信息学分析 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 缩略词 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |