| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-23页 |
| 1.1 苏云金芽孢杆菌的概述 | 第12-15页 |
| 1.1.1 Bt的种类和结构 | 第13-14页 |
| 1.1.2 Bt的作用机制 | 第14-15页 |
| 1.2 抗性现状 | 第15-21页 |
| 1.2.1 抗性机理 | 第16-17页 |
| 1.2.2 受体调控Bt抗性的研究进展 | 第17-20页 |
| 1.2.3 受体与Bt毒素的结合能力与抗性的关系 | 第20-21页 |
| 1.3 本文研究的目的 | 第21-23页 |
| 1.3.1 研究内容 | 第21-22页 |
| 1.3.2 目的与意义 | 第22-23页 |
| 第二章 棉铃虫中肠受体片段的表达 | 第23-33页 |
| 2.1 材料与方法 | 第23-29页 |
| 2.1.1 供试昆虫 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂及缓冲液的配制 | 第23-24页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第24页 |
| 2.1.4 总RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.1.5 第一链c DNA的合成 | 第25-26页 |
| 2.1.6 表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.1.7 表达载体转化克隆菌株及鉴定 | 第27页 |
| 2.1.8 表达载体转入表达菌株 | 第27-28页 |
| 2.1.9 CAD、APN、ALP多肽片段的表达 | 第28页 |
| 2.1.10 Western blot分析 | 第28-29页 |
| 2.1.11 重组CAD、APN、ALP蛋白的纯化 | 第29页 |
| 2.2 结果与分析 | 第29-31页 |
| 2.2.1 棉铃虫中肠CAD、APN、ALP基因的克隆及表达载体的构建 | 第29-30页 |
| 2.2.2 棉铃虫APN4基因片段在大肠杆菌中的表达及可溶性检测 | 第30-31页 |
| 2.2.3 Western blot分析 | 第31页 |
| 2.3 讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 棉铃虫中肠受体和Bt毒素结合能力的测定 | 第33-38页 |
| 3.1 材料与方法 | 第33-34页 |
| 3.1.1 供试试剂 | 第33页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第33-34页 |
| 3.1.3 Ligand blot分析 | 第34页 |
| 3.1.4 ELISA分析 | 第34页 |
| 3.2 结果与分析 | 第34-36页 |
| 3.2.1 Ligand blot | 第34-35页 |
| 3.2.2 ELISA结合分析 | 第35-36页 |
| 3.3 讨论 | 第36-38页 |
| 第四章 棉铃虫、甜菜夜蛾中肠受体与Bt毒素结合能力的比较 | 第38-52页 |
| 4.1 材料与方法 | 第38-45页 |
| 4.1.1 供试试剂 | 第38-39页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第39页 |
| 4.1.3 总RNA的提取 | 第39-40页 |
| 4.1.4 引物设计 | 第40-41页 |
| 4.1.5 PCR及RACE反应 | 第41-42页 |
| 4.1.6 alp2基因在甜菜夜蛾不同龄期的表达 | 第42-43页 |
| 4.1.7 重组蛋白ALP2的表达纯化 | 第43-44页 |
| 4.1.8 Western blot分析 | 第44页 |
| 4.1.9 重组ALP2蛋白的纯化 | 第44页 |
| 4.1.10 Ligand blot分析 | 第44页 |
| 4.1.11 ELISA分析 | 第44-45页 |
| 4.2 结果与分析 | 第45-52页 |
| 4.2.1 甜菜夜蛾中肠alp2基因的克隆、序列分析 | 第45-48页 |
| 4.2.2 甜菜夜蛾幼虫不同龄期ALP2的表达量 | 第48-49页 |
| 4.2.3 甜菜夜蛾alp2基因片段的表达 | 第49页 |
| 4.2.4 Western blot分析 | 第49页 |
| 4.2.5 ALP2重组蛋白的纯化 | 第49页 |
| 4.2.6 Ligand blot分析 | 第49-50页 |
| 4.2.7 ELISA分析 | 第50-51页 |
| 4.2.8 棉铃虫、甜菜夜蛾结合能力的比较 | 第51-52页 |
| 第五章 全文总结 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
