| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 第一章 文献回顾 | 第12-33页 |
| ·药物基因组学的研究进展 | 第12-15页 |
| ·药物基因组学的发展简史 | 第12页 |
| ·药物基因组学的研究现状 | 第12-13页 |
| ·药物基因组学的研究方法 | 第13-14页 |
| ·药物基因组学的应用 | 第14-15页 |
| ·细胞色素P450酶的研究进展 | 第15-25页 |
| ·CYP450的发现史 | 第16页 |
| ·CYP的命名 | 第16-17页 |
| ·CYP450结构特征与分布 | 第17-18页 |
| ·CYP450的催化机制 | 第18-19页 |
| ·CYP450的主要功能 | 第19-20页 |
| ·CYP450在药物代谢中的作用 | 第20-21页 |
| ·影响CYP活性的因素 | 第21-22页 |
| ·与CYP450有关的药物代谢酶研究方法进展 | 第22-25页 |
| ·CYP3A4的研究进展 | 第25-32页 |
| ·CYP3A4的基因序列与结构 | 第25-26页 |
| ·CYP3A4的突变及其表型 | 第26-29页 |
| ·CYP3A4的活性影响因素 | 第29-30页 |
| ·CYP3A4与药物代谢以及个体化用药 | 第30-31页 |
| ·CYP3A4与疾病易感性 | 第31-32页 |
| ·立题背景及意义 | 第32-33页 |
| 第二章 CYP3A4两个非同义突变[CYP3A4(F176V),CYP3A4(1223R)]的重组表达及纯化 | 第33-51页 |
| ·材料与仪器 | 第33-38页 |
| ·菌株与质粒 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33-34页 |
| ·主要培养基 | 第34-36页 |
| ·主要溶液(主要用于转化和鉴定) | 第36-37页 |
| ·主要仪器 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-45页 |
| ·F176V及I223R重组大肠杆菌的构建 | 第38-41页 |
| ·重组酵母菌株的构建 | 第41-44页 |
| ·酵母微粒体的制取 | 第44-45页 |
| ·实验结果 | 第45-49页 |
| ·CYP3A4两个突变等位基因cDNA的扩增 | 第45-46页 |
| ·CYP3A4重组质粒的鉴定 | 第46-47页 |
| ·测序结果 | 第47页 |
| ·目的蛋白的Western-blot分析 | 第47页 |
| ·BSA标准曲线绘制 | 第47-48页 |
| ·微粒体蛋白浓度测定结果 | 第48页 |
| ·CYP3A4酶的CO定量 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第三章 CYP3A4酶的体外酶促反应动力学分析和药物相互作用的研究 | 第51-64页 |
| ·材料 | 第51-53页 |
| ·菌株 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·主要溶液 | 第51-52页 |
| ·抑制实验所选的药物 | 第52页 |
| ·主要实验仪器及生产厂家 | 第52-53页 |
| ·实验方法 | 第53-56页 |
| ·重组酶的活性分析 | 第53-55页 |
| ·荧光法研究WT与所构建的两个突变株在药物抑制方面的差异性 | 第55-56页 |
| ·实验结果 | 第56-61页 |
| ·应用荧光方法研究WT与两个突变株在药物代谢方面的差异 | 第56-60页 |
| ·应用荧光方法研究各等位基因和WT在药物相互作用方面差异 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-64页 |
| ·检测系统的选择 | 第61-62页 |
| ·酶动力学差异分析 | 第62页 |
| ·药物抑制分析 | 第62-64页 |
| 全文小结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 附录 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
