| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-20页 |
| 1.1 骨骼肌发育及肌纤维类型 | 第13-14页 |
| 1.2 肌纤维类型与肌肉组织的氧化能力和抗疲劳特性 | 第14页 |
| 1.3 Micro RNA的生物合成与调控机制 | 第14-15页 |
| 1.4 Myo-miR调控网络在肌肉发育、代谢和疾病中的调控作用 | 第15-17页 |
| 1.5 Micro RNA与肌肉运动及代谢 | 第17页 |
| 1.6 miR-378a基因的研究进展 | 第17-20页 |
| 第二章 实验仪器、试剂和方法 | 第20-32页 |
| 2.1 实验仪器 | 第20页 |
| 2.2 试验试剂及配制 | 第20-22页 |
| 2.2.1 LB液体培养基配制 | 第20页 |
| 2.2.2 LB固体培养基配制 | 第20-21页 |
| 2.2.3 50x TAE Buffer制备 | 第21页 |
| 2.2.4 DNA提取组织裂解液配制 | 第21页 |
| 2.2.5 10x Tris-gly-SDS配制 | 第21页 |
| 2.2.6 转移缓冲液配制 | 第21-22页 |
| 2.2.7 10%FBS细胞生长培养基 | 第22页 |
| 2.2.8 DNA提取蛋白酶K（proteinase K）贮存液配制 | 第22页 |
| 2.2.9 100 mg/m L氨苄霉素储存液 | 第22页 |
| 2.2.10 实验细胞系 | 第22页 |
| 2.2.11 实验动物 | 第22页 |
| 2.3 试验方法 | 第22-32页 |
| 2.3.1 细胞复苏 | 第22-23页 |
| 2.3.2 细胞传代 | 第23页 |
| 2.3.3 细胞冻存 | 第23页 |
| 2.3.4 基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.3.5 组织RNA的提取 | 第24页 |
| 2.3.6 PCR产物纯化 | 第24页 |
| 2.3.7 第一链c DNA的合成 | 第24-25页 |
| 2.3.8 miR-378a反转录 | 第25页 |
| 2.3.9 Q-PCR定量反应体系（20μL）与反应程序 | 第25-26页 |
| 2.3.10 小鼠基因型快速鉴定 | 第26页 |
| 2.3.11 基因克隆 | 第26-27页 |
| 2.3.12 miR-378a靶标载体的构建 | 第27页 |
| 2.3.13 miR-378a靶标钓取 | 第27-28页 |
| 2.3.14 miR-378a靶标验证实 | 第28-29页 |
| 2.3.15 细胞转染 | 第29页 |
| 2.3.16 蛋白质提取及Western Blot | 第29-30页 |
| 2.3.17 miR-378a敲除小鼠的制备 | 第30页 |
| 2.3.18 血糖生化指标检测 | 第30-31页 |
| 2.3.19 DNA克隆及q-PCR定量检测引物 | 第31-32页 |
| 第三章 实验结果 | 第32-41页 |
| 3.1 miR-378a在小鼠肌肉组织中的表达谱 | 第32-33页 |
| 3.2 miR-378a敲除小鼠的制备、繁育与鉴定 | 第33-34页 |
| 3.3 miR-378a对肌纤维类型的影响 | 第34-35页 |
| 3.4 miR-378a对血糖、乳酸含量、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶的影响 | 第35-36页 |
| 3.5 miR-378a对骨骼肌中肌酸激酶和乳酸脱氢酶含量的影响 | 第36-37页 |
| 3.6 miR-378a靶基因钓取及q-PCR验证 | 第37-39页 |
| 3.7 过表达Rora可上调C2C12细胞肌酸激酶和乳酸脱氢酶的表达 | 第39-41页 |
| 第四章 讨论 | 第41-44页 |
| 4.1 miR-378a与肌纤维类型 | 第41页 |
| 4.2 miR-378a与骨骼肌能量代谢 | 第41-42页 |
| 4.3 miR-378a在肌肉中的功能 | 第42-44页 |
| 第五章 全文结论 | 第44-45页 |
| 5.1 本文研究结论 | 第44页 |
| 5.2 论文创新点 | 第44页 |
| 5.3 后续实验安排 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-53页 |
| 附录 | 第53-57页 |
| 附录 1 miR-378a敲除小鼠引物及检测产物序列 | 第53-54页 |
| 附录 2 靶基因Rora过表达载体载体构建信息 | 第54-56页 |
| 附录 3 Mmu-miR-378a前体及成熟序列信息 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简历 | 第58页 |
