| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 引言 | 第10-18页 |
| 1.1 福建柏的简介 | 第10-13页 |
| 1.1.1 福建柏的生物学特性及生态学习性 | 第10页 |
| 1.1.2 福建柏的生态园林应用价值 | 第10-11页 |
| 1.1.3 福建柏的培育及栽培管理技术 | 第11-12页 |
| 1.1.4 福建柏的分子生物学研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2 cDNA文库的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.2.1 cDNA文库的基本概念 | 第13-14页 |
| 1.2.2 cDNA文库的分类及特点 | 第14-15页 |
| 1.2.3 全长cDNA文库的构建策略 | 第15-16页 |
| 1.3 表达序列标签(EST)技术的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.3.1 表达序列标签的概念及原理 | 第16-17页 |
| 1.3.2 表达序列标签(EST)的应用 | 第17页 |
| 1.4 研究的意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-30页 |
| 2.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.2 主要试验设备 | 第18页 |
| 2.3 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.3.1 生化试剂 | 第18-19页 |
| 2.3.2 主要溶液配制与处理 | 第19页 |
| 2.4 RNA提取 | 第19-22页 |
| 2.4.1 试验前准备工作 | 第19页 |
| 2.4.2 CTAB法提取福建柏叶片总RNA | 第19-20页 |
| 2.4.3 CTAB-LiCl法提取福建柏叶片总RNA | 第20-21页 |
| 2.4.4 Trizol法提取福建柏叶片总RNA | 第21页 |
| 2.4.5 百泰克试剂盒法提取福建柏叶片总RNA | 第21页 |
| 2.4.6 天根试剂盒法提取福建柏叶片总RNA | 第21页 |
| 2.4.7 琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性 | 第21-22页 |
| 2.4.8 微量紫外分光光度计测定RNA浓度和纯度 | 第22页 |
| 2.5 福建柏叶片全长cDNA文库的构建 | 第22-28页 |
| 2.5.1 第一链cDNA的合成 | 第22-23页 |
| 2.5.2 ds cDNA的合成 | 第23-24页 |
| 2.5.3 cDNA片段的纯化分级 | 第24-25页 |
| 2.5.4 cDNA片段与载体的连接 | 第25-26页 |
| 2.5.5 连接产物的电转 | 第26-27页 |
| 2.5.6 cDNA文库质量检测 | 第27-28页 |
| 2.5.7 原始文库的扩增 | 第28页 |
| 2.6 EST测序与分析 | 第28-30页 |
| 2.6.1 EST测序 | 第28页 |
| 2.6.2 EST序列的初步处理 | 第28-29页 |
| 2.6.3 EST序列的分析 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-43页 |
| 3.1 总RNA的提取 | 第30-32页 |
| 3.1.1 RNA的提取结果 | 第30-31页 |
| 3.1.2 不同方法对RNA提取结果的影响 | 第31-32页 |
| 3.2 全长cDNA文库的结果分析 | 第32-35页 |
| 3.2.1 dsDNA的合成 | 第32页 |
| 3.2.2 cDNA过柱分级纯化 | 第32-33页 |
| 3.2.3 文库质量评价 | 第33-35页 |
| 3.3 EST序列测定及生物信息学分析 | 第35-43页 |
| 3.3.1 EST片段的测序结果 | 第35-36页 |
| 3.3.2 有效EST序列的获取 | 第36页 |
| 3.3.3 EST序列的拼接及分析 | 第36-38页 |
| 3.3.4 EST序列的生物学信息分析 | 第38-43页 |
| 4 结论与讨论 | 第43-47页 |
| 4.1 结论 | 第43-44页 |
| 4.2 讨论 | 第44-47页 |
| 4.2.1 植物RNA提取策略 | 第44-46页 |
| 4.2.2 cDNA文库质量评价 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 缩略词 | 第51-52页 |
| 附表 | 第52-55页 |
| 附图 | 第55-58页 |
| 致谢 | 第58页 |